| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第一章 前言 | 第10-14页 |
| 第二章 PAK4-RNAi质粒转染HepG2细胞 | 第14-29页 |
| 2.1 实验材料和仪器 | 第14-16页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第14页 |
| 2.1.2 主要试剂配制 | 第14-16页 |
| 2.1.3 实验仪器 | 第16页 |
| 2.2 实验方法 | 第16-24页 |
| 2.2.1 细胞培养 | 第16-17页 |
| 2.2.2 提取细胞总蛋白及定量和变性 | 第17-18页 |
| 2.2.3 绘制细胞生长曲线 | 第18页 |
| 2.2.4 质粒构建 | 第18-20页 |
| 2.2.5 菌液扩增、质粒提取(小提中量) | 第20-21页 |
| 2.2.6 质粒转染HepG2细胞 | 第21-22页 |
| 2.2.7 细胞增殖活力检测(MTT法) | 第22页 |
| 2.2.8 目的蛋白表达量检测(Westernblotting) | 第22-24页 |
| 2.2.9 统计学分析 | 第24页 |
| 2.3 实验结果 | 第24-27页 |
| 2.3.1 HepG2细胞形态观察 | 第25页 |
| 2.3.2 HepG2细胞生长曲线 | 第25页 |
| 2.3.3 细胞增殖活力 | 第25-26页 |
| 2.3.4 目的蛋白表达量 | 第26-27页 |
| 2.4 讨论 | 第27-28页 |
| 2.5 本章小结 | 第28-29页 |
| 第三章 PAK4-RNAi慢病毒感染HepG2细胞 | 第29-51页 |
| 3.1 实验材料和仪器 | 第29-30页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第29页 |
| 3.1.2 实验仪器 | 第29-30页 |
| 3.2 实验方法 | 第30-35页 |
| 3.2.1 慢病毒构建 | 第30-32页 |
| 3.2.2 慢病毒感染细胞并观察GFP | 第32页 |
| 3.2.3 细胞增殖活力检测(MTT法) | 第32-33页 |
| 3.2.4 细胞周期检测(流式细胞仪) | 第33页 |
| 3.2.5 细胞迁移能力检测(Transwell法) | 第33-34页 |
| 3.2.6 目的蛋白相对表达量检测(免疫荧光法) | 第34页 |
| 3.2.7 目的蛋白表达量检测(Westernblotting) | 第34-35页 |
| 3.2.8 统计学分析 | 第35页 |
| 3.3 实验结果 | 第35-45页 |
| 3.3.1 慢病毒感染效率观察 | 第35-36页 |
| 3.3.2 细胞增殖活力 | 第36-37页 |
| 3.3.3 细胞周期 | 第37-38页 |
| 3.3.4 细胞迁移能力 | 第38-39页 |
| 3.3.5 目的蛋白表达量及定位 | 第39-42页 |
| 3.3.6 目的蛋白表达量 | 第42-45页 |
| 3.4 讨论 | 第45-49页 |
| 3.4.1 PAK4低表达抑制HepG2细胞增殖 | 第45-46页 |
| 3.4.2 PAK4低表达阻滞HepG2细胞周期 | 第46-47页 |
| 3.4.3 PAK4低表达激活HepG2细胞自噬 | 第47-48页 |
| 3.4.4 PAK4低表达抑制HepG2细胞迁移 | 第48-49页 |
| 3.5 本章小结 | 第49-51页 |
| 第四章 研究结论 | 第51-52页 |
| 4.1 本研究的主要结论 | 第51页 |
| 4.2 有待解决的问题 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-56页 |
| 附录 | 第56-57页 |
| 硕士期间研究成果及参与课题 | 第57-58页 |
| 致谢 | 第58页 |
