| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4页 |
| 中英文对照表 | 第5-9页 |
| 第一部分 绪论 | 第9-27页 |
| 1.1 肝脏脂质代谢调控 | 第9-15页 |
| 1.1.1 脂肪酸摄取 | 第10-11页 |
| 1.1.2 脂肪酸氧化 | 第11-14页 |
| 1.1.3 VLDL分泌 | 第14-15页 |
| 1.2 长链非编码RNA研究进展 | 第15-21页 |
| 1.2.1 长链非编码RNA分类 | 第16-17页 |
| 1.2.2 长链非编码RNA的作用机制研究 | 第17-18页 |
| 1.2.3 长链非编码RNA调节了疾病的发生发展 | 第18-21页 |
| 1.3 载脂蛋白APOA4研究进展 | 第21-26页 |
| 1.3.1 APOA4结构 | 第22-23页 |
| 1.3.2 APOA4的生物学功能 | 第23-26页 |
| 1.4 研究目的及意义 | 第26-27页 |
| 第二部分 实验材料与方法 | 第27-53页 |
| 2.1 实验材料 | 第27-33页 |
| 2.1.1 人类和小鼠肝组织 | 第27页 |
| 2.1.2 主要实验仪器 | 第27-28页 |
| 2.1.3 主要实验药品及耗材 | 第28-29页 |
| 2.1.4 主要实验试剂配制 | 第29-31页 |
| 2.1.5 引物序列 | 第31-33页 |
| 2.2 实验方法 | 第33-53页 |
| 2.2.1 RNA-seq分析和Geneontology分析 | 第33页 |
| 2.2.2 RNA提取 | 第33-34页 |
| 2.2.3 cDNA末端快速扩增(RACE) | 第34-36页 |
| 2.2.4 蛋白提取 | 第36-37页 |
| 2.2.5 Westernblot | 第37页 |
| 2.2.6 体外翻译与丽春红染色 | 第37-38页 |
| 2.2.7 细胞培养 | 第38-39页 |
| 2.2.8 原代肝实质细胞的分离和培养 | 第39-40页 |
| 2.2.9 实时定量荧光PCR | 第40页 |
| 2.2.10 DNA琼脂糖凝胶电泳 | 第40-41页 |
| 2.2.11 分子克隆 | 第41-42页 |
| 2.2.12 感受态细胞的制备 | 第42-43页 |
| 2.2.13 Northernblot | 第43页 |
| 2.2.14 shRNA构建 | 第43-44页 |
| 2.2.15 免疫组化 | 第44-45页 |
| 2.2.16 TG测量 | 第45-46页 |
| 2.2.17 TC测量 | 第46页 |
| 2.2.18 HE染色 | 第46页 |
| 2.2.19 免疫荧光 | 第46-47页 |
| 2.2.20 PEI转染 | 第47-48页 |
| 2.2.21 腺病毒包装及纯化 | 第48-49页 |
| 2.2.22 DNA提取 | 第49页 |
| 2.2.23 RNAPullDown | 第49-50页 |
| 2.2.24 RIP | 第50页 |
| 2.2.25 CRISPR/Cas9腺病毒 | 第50-52页 |
| 2.2.26 统计方法 | 第52-53页 |
| 第三部分 实验结果 | 第53-88页 |
| 3.1 长链非编码RNAAPOA4-AS的发现与表征 | 第53-67页 |
| 3.1.1 运用生物信息学分析发现APOA4-AS | 第53-56页 |
| 3.1.2 RACE实验确定APOA4-AS序列 | 第56-58页 |
| 3.1.3 APOA4-AS不具备编码蛋白能力 | 第58-60页 |
| 3.1.4 APOA4-AS特异性引物设计与检测 | 第60-61页 |
| 3.1.5 APOA4-AS、APOA4在ob/ob小鼠中的表达 | 第61-62页 |
| 3.1.6 APOA4-AS、APOA4在脂肪肝患者中的表达 | 第62-63页 |
| 3.1.7 APOA4-AS、APOA4组织分布 | 第63-65页 |
| 3.1.8 APOA4-AS、APOA4亚细胞定位 | 第65-67页 |
| 3.1.9 小结 | 第67页 |
| 3.2 APOA4-AS对载脂蛋白APOA4的表达调控 | 第67-88页 |
| 3.2.1 体内体外条件下APOA4-AS调控APOA4表达 | 第67-70页 |
| 3.2.2 APOA4-AS调控APOA4表达具有特异性 | 第70-73页 |
| 3.2.3 病理条件下APOA4-AS调控APOA4表达 | 第73-75页 |
| 3.2.4 APOA4-AS影响甘油三酯分泌 | 第75-78页 |
| 3.2.5 APOA4-AS与mRNA稳定蛋白HuR形成复合物 | 第78-80页 |
| 3.2.6 APOA4-AS通过结合位点结合mRNA稳定蛋白HuR | 第80-82页 |
| 3.2.7 内源性APOA4-AS与HuR相互作用 | 第82-83页 |
| 3.2.8 HuR参与APOA4-AS调控APOA4的表达 | 第83-87页 |
| 3.2.9 小结 | 第87-88页 |
| 第四部分 讨论 | 第88-91页 |
| 第五部分 总结与创新点 | 第91-92页 |
| 参考文献 | 第92-105页 |
| 在学期间公开发表论文及著作情况 | 第105-106页 |
| 致谢 | 第106-107页 |
