| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 缩略词表 | 第7-11页 |
| 第一章 前言 | 第11-25页 |
| 1.1 植物细胞骨架蛋白 | 第11-13页 |
| 1.1.1 植物细胞骨架的动态性 | 第11-12页 |
| 1.1.2 细胞骨架调控细胞扩展和分裂 | 第12页 |
| 1.1.3 微丝微管共同促进皮层产生 | 第12-13页 |
| 1.2 微丝及微丝成束蛋白的概述 | 第13-16页 |
| 1.2.1 植物微丝骨架蛋白调控细胞形态建成 | 第14页 |
| 1.2.2 微丝成束蛋白及微丝束 | 第14-16页 |
| 1.3 微管及驱动蛋白的概述 | 第16-22页 |
| 1.3.1 微管蛋白的动态调控 | 第16-17页 |
| 1.3.2 微管蛋白的末端生长机制 | 第17-18页 |
| 1.3.3 驱动蛋白概述 | 第18-19页 |
| 1.3.4 驱动蛋白参与胞内转运 | 第19-20页 |
| 1.3.5 植物驱动蛋白对于细胞分化和生长的必需性 | 第20-21页 |
| 1.3.6 在拟南芥中驱动蛋白-12A调控细胞壁的生物合成 | 第21-22页 |
| 1.4 隔膜蛋白：蛋白高聚物的组装和膜功能之间的连接子 | 第22页 |
| 1.5 调宁蛋白的结构和功能 | 第22-23页 |
| 1.6 本研究的目的和意义 | 第23-25页 |
| 第二章 实验材料和方法 | 第25-34页 |
| 2.1 实验材料 | 第25-27页 |
| 2.1.1 动植物材料 | 第25页 |
| 2.1.2 菌株和载体 | 第25页 |
| 2.1.3 培养基 | 第25页 |
| 2.1.4 溶液 | 第25-26页 |
| 2.1.4.1 Actin提取溶液 | 第25-26页 |
| 2.1.4.2 His标签蛋白纯化用溶液 | 第26页 |
| 2.1.5 所用抗生素溶液 | 第26-27页 |
| 2.2 实验方法 | 第27-34页 |
| 2.2.1 拟南芥的培养 | 第27页 |
| 2.2.2 RNA的提取 | 第27-28页 |
| 2.2.3 RNA反转录 | 第28页 |
| 2.2.4 拟南芥总DNA的提取 | 第28页 |
| 2.2.5 半定量PCR(sqRT-PCR)和实时荧光定量PCR(qRT-PCR) | 第28-29页 |
| 2.2.6 大肠杆菌DH5a和Rosetta感受态制备 | 第29-30页 |
| 2.2.7 大肠杆菌DH5a和Rosetta转化 | 第30页 |
| 2.2.8 载体构建 | 第30页 |
| 2.2.9 诱导目的蛋白表达 | 第30-31页 |
| 2.2.10 丙酮粉的制备及actin提取 | 第31-32页 |
| 2.2.11 体外高速、低速共沉淀 | 第32页 |
| 2.2.12 微丝显微观察 | 第32页 |
| 2.2.13 CRISPR/Cas9载体构建 | 第32-34页 |
| 第三章 实验结果 | 第34-50页 |
| 3.1 拟南芥KCHs多突纯合突变体的建立 | 第34-41页 |
| 3.1.1 KCH2/3/4/5/6/7六突纯合突变体的建立 | 第34-35页 |
| 3.1.2 KCH1/2/3/4/5/6/7七突纯合突变体的建立 | 第35-36页 |
| 3.1.3 KCH1/2/3/5/6/7六突纯合突变体的建立 | 第36-37页 |
| 3.1.4 KCH1/2/3/4/6/7六突纯合突变体的建立 | 第37-38页 |
| 3.1.5 KCHs多突纯合突变体抑制水平检测 | 第38-40页 |
| 3.1.6 crispr-1六突突变体的建立 | 第40-41页 |
| 3.2 KCHs蛋白质CH结构域的功能研究 | 第41-43页 |
| 3.2.1 KCHs截短蛋白质的载体构建 | 第41-42页 |
| 3.2.2 KCHs截短蛋白质的提取纯化 | 第42-43页 |
| 3.3 KCHs截短蛋白质的生化功能研究 | 第43-50页 |
| 3.3.1 KCHsCH-Actin低速共沉淀检测 | 第43-44页 |
| 3.3.2 KCHsCH-Actin高速共沉淀检测 | 第44-45页 |
| 3.3.3 KCH1(0-466)-Actin共沉淀及显微观察 | 第45-47页 |
| 3.3.4 KCH4(0-162)-Actin共沉淀及显微观察 | 第47-48页 |
| 3.3.5 KCH6(0-466)-Actin共沉淀及显微观察 | 第48-50页 |
| 第四章 讨论 | 第50-54页 |
| 4.1 拟南芥KCHs家族T-DNA插入多基因突变体的获得 | 第50-51页 |
| 4.2 KCHs蛋白质的生化功能 | 第51-54页 |
| 第五章 结论与展望 | 第54-55页 |
| 5.1 结论 | 第54页 |
| 5.2 展望 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-63页 |
| 附录 | 第63-65页 |
| 在学期间的研究成果 | 第65-66页 |
| 致谢 | 第66页 |
