| 摘要 | 第3-4页 |
| ABSTRACT | 第4页 |
| 第一章 文献综述 | 第7-22页 |
| 1.1 木质纤维素 | 第7-13页 |
| 1.1.1 木质纤维素的来源和化学组成 | 第7-8页 |
| 1.1.2 木质纤维素的预处理和产物 | 第8-11页 |
| 1.1.3 木质纤维素降解物作为发酵原料 | 第11-13页 |
| 1.2 B. subtilis的木糖运输机制 | 第13-16页 |
| 1.2.1 木糖运输系统 | 第13-14页 |
| 1.2.2 AraR对木糖运输的调控 | 第14-15页 |
| 1.2.3 CcpA对木糖运输的调控 | 第15-16页 |
| 1.3 B. subtilis的木糖代谢与调控 | 第16-19页 |
| 1.3.1 xyl操纵子的结构和功能 | 第16-17页 |
| 1.3.2 XylR对xyl操纵子的调控 | 第17-19页 |
| 1.3.3 CCR效应对xyl操纵子的调控 | 第19页 |
| 1.4 木糖代谢基因工程菌的构建 | 第19-21页 |
| 1.4.1 木糖代谢基因工程菌株的构建研究现状 | 第19-20页 |
| 1.4.2 B. subtilis木糖代谢存在的问题 | 第20-21页 |
| 1.5 本文的研究内容和意义 | 第21-22页 |
| 第二章 材料与方法 | 第22-34页 |
| 2.1 实验材料 | 第22-27页 |
| 2.1.1 菌株和质粒 | 第22页 |
| 2.1.2 主要药品 | 第22-24页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第24-25页 |
| 2.1.4 培养基 | 第25页 |
| 2.1.5 主要仪器 | 第25-26页 |
| 2.1.6 PCR引物 | 第26-27页 |
| 2.2 实验方法 | 第27-34页 |
| 2.2.1 B. subtilis染色体DNA提取 | 第27-28页 |
| 2.2.2 质粒的小规模提取 | 第28页 |
| 2.2.3 普通PCR扩增 | 第28-29页 |
| 2.2.4 三个DNA片段的重叠PCR拼接 | 第29-31页 |
| 2.2.5 DNA的酶切 | 第31页 |
| 2.2.6 DNA与pEASY-T1 载体的连接反应 | 第31页 |
| 2.2.7 琼脂糖凝胶电泳 | 第31-32页 |
| 2.2.8 E. coli感受态细胞的制备 | 第32页 |
| 2.2.9 E. coli感受态细胞的转化 | 第32-33页 |
| 2.2.10 B. subtilis的Spizizen转化 | 第33页 |
| 2.2.11 菌体生长曲线的测定 | 第33-34页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第34-58页 |
| 3.1 araE缺陷型菌株的构建 | 第34-42页 |
| 3.1.1 AEu、E、AEp片断的PCR扩增 | 第34-35页 |
| 3.1.2 AEE片段的重叠PCR拼接 | 第35-37页 |
| 3.1.3 重组质粒T-AEE的构建 | 第37-38页 |
| 3.1.4 B. subtilis 168 araE- 菌株的构建 | 第38-42页 |
| 3.2 araR和xylR双缺陷型菌株的构建 | 第42-50页 |
| 3.2.1 Xu、C、Xp片断的PCR扩增 | 第42-44页 |
| 3.2.2 XC片段的重叠PCR拼接 | 第44-45页 |
| 3.2.3 重组质粒T-XC的构建 | 第45-46页 |
| 3.2.4 B. subtilis 168C xylR -菌株的构建 | 第46-50页 |
| 3.3 缺陷菌株的生长比较 | 第50-53页 |
| 3.4 缺陷菌株的生长曲线 | 第53-58页 |
| 3.4.1 基本培养基生长曲线 | 第53-54页 |
| 3.4.2 发酵培养基生长曲线 | 第54-58页 |
| 第四章 结论与展望 | 第58-59页 |
| 4.1 主要结论 | 第58页 |
| 4.2 展望 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-64页 |
| 致谢 | 第64页 |
