中文摘要 | 第4-7页 |
Abstract | 第7-10页 |
缩略语/符号说明 | 第13-14页 |
前言 | 第14-19页 |
研究现状、成果 | 第14-17页 |
研究目的、方法 | 第17-19页 |
一、对象和方法 | 第19-34页 |
1.1 实验材料 | 第19-22页 |
1.1.1 细胞系 | 第19页 |
1.1.2 实验动物 | 第19页 |
1.1.3 常用试剂 | 第19-21页 |
1.1.4 主要仪器设备 | 第21-22页 |
1.1.5 主要分析工具软件 | 第22页 |
1.1.6 引物 | 第22页 |
1.2 实验方法 | 第22-34页 |
1.2.1 试剂配制 | 第22-25页 |
1.2.2 细胞培养 | 第25-26页 |
1.2.3 超速离心 | 第26-27页 |
1.2.4 蔗糖密度梯度离心 | 第27页 |
1.2.5 细胞或组织总蛋白的提取 | 第27页 |
1.2.6 蛋白浓度测定 | 第27-28页 |
1.2.7 TRIzol法提取细胞总RNA | 第28页 |
1.2.8 RT-PCR和PCR反应条件 | 第28-30页 |
1.2.9 Western blot | 第30页 |
1.2.10 PKH67荧光标记 | 第30页 |
1.2.11 exosome对细胞的侵染试验 | 第30-31页 |
1.2.12 共聚焦荧光显微镜分析 | 第31页 |
1.2.13 FACS流式细胞仪分析细胞转染效率和荧光强度 | 第31-32页 |
1.2.14 荧光exosome体内分布试验 | 第32页 |
1.2.15 电击转化 | 第32页 |
1.2.16 局部肌肉注射 | 第32页 |
1.2.17 Cellmask 标记 exosome方法: | 第32-34页 |
二、实验结果 | 第34-44页 |
2.1 C2C12来源exosome的鉴定分析 | 第34-36页 |
2.1.1 Exosome形态鉴定 | 第34-35页 |
2.1.2 Exosome特征性蛋白的检测及密度分析 | 第35-36页 |
2.2 Exosome进入其源细胞的能力及在细胞中的定位 | 第36-38页 |
2.2.1 C2C12细胞来源的exosome进入其源细胞的时间效应 | 第36-37页 |
2.2.2 Exosome在C2C12细胞中的定位 | 第37-38页 |
2.3 C2C12来源exosome具有肌肉细胞和组织趋向性 | 第38-41页 |
2.3.1 C2C12来源exosome对肌肉细胞具有趋向性 | 第38-40页 |
2.3.2 肌肉细胞来源exosome的体内分布 | 第40-41页 |
2.4 Exosome在DMD模型上的测试 | 第41-44页 |
2.4.1 电击转化条件的优化及体外测试 | 第41-42页 |
2.4.2 Exosome在mdx小鼠上的局部测试 | 第42-44页 |
三、讨论 | 第44-46页 |
结论 | 第46-47页 |
参考文献 | 第47-51页 |
发表论文和参加科研情况说明 | 第51-52页 |
综述 Exosome的研究进展 | 第52-69页 |
综述参考文献 | 第64-69页 |
致谢 | 第69页 |