| 摘要 | 第1-11页 |
| Abstract | 第11-15页 |
| 英文缩写符号及中英文对照表 | 第15-17页 |
| 第一部分 文献综述 | 第17-33页 |
| 1 植物耐旱性反应的机制 | 第17-25页 |
| ·植物气孔的发育 | 第17-20页 |
| ·控制气孔发育的基本遗传途径 | 第18-19页 |
| ·调控气孔发育基本途径的相关基因及调控机制 | 第19-20页 |
| ·ABA 途径在植物干旱胁迫反应中的作用 | 第20-24页 |
| ·ABA 代谢调控途径 | 第20-22页 |
| ·ABA 依赖与ABA 不依赖的干旱胁迫反应及其信号转导途径 | 第22-24页 |
| ·渗透调节 | 第24-25页 |
| 2 光信号影响植物干旱胁迫反应 | 第25-28页 |
| ·光对气孔发育的调控 | 第25-26页 |
| ·光对植物根系发育的影响 | 第26-27页 |
| ·光敏色素介导的光信号与ABA 反应 | 第27-28页 |
| 3 光敏色素所介导的光信号转导及其在植物生长发育中的作用 | 第28-31页 |
| ·光敏色素 | 第28-30页 |
| ·光敏色素介导的光信号转导的分子机制 | 第30-31页 |
| 4 论文选题的目的及意义 | 第31-33页 |
| 第二部分 实验论文 | 第33-92页 |
| 第一章 光敏色素B 介导的光信号对水稻干旱胁迫耐性的影响 | 第33-50页 |
| 1 实验材料 | 第33-34页 |
| ·植物材料 | 第33-34页 |
| ·主要化学试剂 | 第34页 |
| ·主要仪器设备 | 第34页 |
| 2 实验方法 | 第34-39页 |
| ·实验材料的培养及处理 | 第34页 |
| ·耐旱性测定 | 第34-36页 |
| ·干旱胁迫处理 | 第34-35页 |
| ·可溶性糖含量测定 | 第35页 |
| ·脯氨酸含量测定 | 第35-36页 |
| ·根系生长的测定 | 第36-37页 |
| ·材料的培养 | 第36-37页 |
| ·主根长度测定 | 第37页 |
| ·根冠比测定 | 第37页 |
| ·根长度、表面积和直径测定 | 第37页 |
| ·叶片生长及气孔相关指标测定 | 第37-39页 |
| ·总叶面积测定 | 第37页 |
| ·离体叶片失水速率测定 | 第37-38页 |
| ·光合速率、蒸腾速率、气孔导度和水分利用率测定 | 第38页 |
| ·气孔密度和长度测定 | 第38-39页 |
| 3 实验结果 | 第39-47页 |
| ·干旱胁迫处理前后野生型和phyB 突变体的生长状况 | 第39-41页 |
| ·干旱胁迫条件下可溶性糖和脯氨酸含量的变化 | 第41-42页 |
| ·野生型及phyB 突变体根系生长情况比较 | 第42-43页 |
| ·野生型和phyB 突变体植株总叶面积比较 | 第43-44页 |
| ·野生型和phyB 突变体的离体叶片失水速率 | 第44-45页 |
| ·野生型和phyB 突变体的光合速率、蒸腾速率、气孔导度及水分利用率 | 第45-46页 |
| ·野生型和phyB 突变体叶片的气孔数目和长度 | 第46-47页 |
| 4 讨论 | 第47-50页 |
| 第二章 气孔发育相关基因在水稻phyB 突变体中的表达 | 第50-80页 |
| 1 实验材料 | 第50-51页 |
| ·植物材料 | 第50页 |
| ·菌株和质粒载体 | 第50页 |
| ·酶和生化试剂 | 第50页 |
| ·培养基、常用生化及分子生物学试剂 | 第50-51页 |
| ·主要仪器设备 | 第51页 |
| ·分析软件 | 第51页 |
| 2 实验方法 | 第51-62页 |
| ·水稻气孔发育相关基因的来源与基因芯片分析 | 第51-52页 |
| ·荧光定量PCR 检测气孔发育相关基因的表达 | 第52-55页 |
| ·RNAiso 提取水稻叶片总RNA | 第52-53页 |
| ·反转录 | 第53页 |
| ·Real-time PCR 操作方法 | 第53-55页 |
| ·水稻ERECTA-like(ERL)基因植物表达载体的构建和烟草遗传转化 | 第55-59页 |
| ·水稻ERECTA-like(ERL)基因cDNA 序列的获得 | 第55页 |
| ·PCR 产物(OsERL 编码区)与T-载体的连接 | 第55-56页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞制备及转化 | 第56页 |
| ·质粒提取和酶切鉴定 | 第56-57页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第57页 |
| ·植物表达载体的农杆菌转化 | 第57-58页 |
| ·农杆菌质粒的提取与鉴定 | 第58页 |
| ·叶盘法转化烟草 | 第58-59页 |
| ·转基因烟草的外源基因检测 | 第59-60页 |
| ·PCR 检测 | 第59-60页 |
| ·RT-PCR 检测 | 第60页 |
| ·转基因烟草的生理学分析 | 第60-61页 |
| ·耐旱性测定 | 第60页 |
| ·离体叶片失水速率测定 | 第60页 |
| ·光合速率、蒸腾速率、气孔导度和水分利用率测定 | 第60-61页 |
| ·表皮细胞面积、气孔大小、数目和气孔指数测定 | 第61页 |
| ·荧光定量PCR 检测水稻ERECTA-like 基因在红光下的表达 | 第61-62页 |
| ·植物材料的培养 | 第61页 |
| ·RNAiso 提取水稻叶片总RNA | 第61页 |
| ·反转录 | 第61页 |
| ·Real-time PCR 操作方法 | 第61-62页 |
| 3 实验结果 | 第62-77页 |
| ·水稻中气孔发育相关的同源基因的分子特征 | 第62-66页 |
| ·水稻气孔发育相关基因的芯片结果及表达模式验证 | 第66-67页 |
| ·气孔发育相关基因在野生型和phyB 突变体叶原基和分生组织中的表达水平 | 第67-69页 |
| ·水稻ERECTA-like 基因植物表达载体的构建及转基因烟草的遗传分析 | 第69-72页 |
| ·目的cDNA 获得 | 第69-70页 |
| ·植物表达载体pCAMBIA1390-Ubi-OsERL 的构建 | 第70页 |
| ·转基因烟草的遗传分析 | 第70-72页 |
| ·转基因植株的耐旱性分析 | 第72-73页 |
| ·转基因植株离体叶片的失水速率 | 第73页 |
| ·转基因植株的光合速率、蒸腾速率及水分利用率 | 第73-74页 |
| ·野生型和转基因植株气孔密度和气孔指数的比较 | 第74-76页 |
| ·红光对水稻ERECTA 家族基因表达的影响 | 第76-77页 |
| 4 讨论 | 第77-80页 |
| 第三章 ABA 途径与水稻phyB 突变体耐旱性的相关性分析 | 第80-92页 |
| 1 实验材料 | 第80页 |
| 2 实验方法 | 第80-84页 |
| ·水稻种子的ABA 处理 | 第80页 |
| ·Real-time PCR 检测ABA 代谢途径相关基因的表达 | 第80-81页 |
| ·RNAiso 提取水稻叶片总RNA | 第80页 |
| ·反转录 | 第80-81页 |
| ·Real-time PCR 操作方法 | 第81页 |
| ·水稻ABA 信号途径相关基因的表达谱分析 | 第81-82页 |
| ·半定量RT-PCR 检测ABA 应答途径相关基因的表达 | 第82-84页 |
| ·RNAiso 提取水稻叶片总RNA | 第82页 |
| ·反转录 | 第82-83页 |
| ·半定量PCR | 第83-84页 |
| 3 实验结果 | 第84-89页 |
| ·水稻野生型和phyB 突变体对ABA 的敏感性分析 | 第84-86页 |
| ·ABA 代谢途径相关基因在野生型和phyB 突变体中的表达模式分析 | 第86-87页 |
| ·野生型和phyB 突变体干旱处理不同时间的基因表达图谱 | 第87-88页 |
| ·ABA 信号途径相关基因在干旱胁迫条件下的表达差异分析 | 第88-89页 |
| 4 讨论 | 第89-92页 |
| 第三部分 总结 | 第92-94页 |
| 参考文献 | 第94-105页 |
| 附录 | 第105-108页 |
| 攻读博士学位期间整理发表的论文 | 第108-109页 |
| 致谢 | 第109页 |