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光敏色素B调控水稻干旱胁迫耐性的机理研究

摘要第1-11页
Abstract第11-15页
英文缩写符号及中英文对照表第15-17页
第一部分 文献综述第17-33页
 1 植物耐旱性反应的机制第17-25页
   ·植物气孔的发育第17-20页
     ·控制气孔发育的基本遗传途径第18-19页
     ·调控气孔发育基本途径的相关基因及调控机制第19-20页
   ·ABA 途径在植物干旱胁迫反应中的作用第20-24页
     ·ABA 代谢调控途径第20-22页
     ·ABA 依赖与ABA 不依赖的干旱胁迫反应及其信号转导途径第22-24页
   ·渗透调节第24-25页
 2 光信号影响植物干旱胁迫反应第25-28页
   ·光对气孔发育的调控第25-26页
   ·光对植物根系发育的影响第26-27页
   ·光敏色素介导的光信号与ABA 反应第27-28页
 3 光敏色素所介导的光信号转导及其在植物生长发育中的作用第28-31页
   ·光敏色素第28-30页
   ·光敏色素介导的光信号转导的分子机制第30-31页
 4 论文选题的目的及意义第31-33页
第二部分 实验论文第33-92页
 第一章 光敏色素B 介导的光信号对水稻干旱胁迫耐性的影响第33-50页
  1 实验材料第33-34页
   ·植物材料第33-34页
   ·主要化学试剂第34页
   ·主要仪器设备第34页
  2 实验方法第34-39页
   ·实验材料的培养及处理第34页
   ·耐旱性测定第34-36页
     ·干旱胁迫处理第34-35页
     ·可溶性糖含量测定第35页
     ·脯氨酸含量测定第35-36页
   ·根系生长的测定第36-37页
     ·材料的培养第36-37页
     ·主根长度测定第37页
     ·根冠比测定第37页
     ·根长度、表面积和直径测定第37页
   ·叶片生长及气孔相关指标测定第37-39页
     ·总叶面积测定第37页
     ·离体叶片失水速率测定第37-38页
     ·光合速率、蒸腾速率、气孔导度和水分利用率测定第38页
     ·气孔密度和长度测定第38-39页
  3 实验结果第39-47页
   ·干旱胁迫处理前后野生型和phyB 突变体的生长状况第39-41页
   ·干旱胁迫条件下可溶性糖和脯氨酸含量的变化第41-42页
   ·野生型及phyB 突变体根系生长情况比较第42-43页
   ·野生型和phyB 突变体植株总叶面积比较第43-44页
   ·野生型和phyB 突变体的离体叶片失水速率第44-45页
   ·野生型和phyB 突变体的光合速率、蒸腾速率、气孔导度及水分利用率第45-46页
   ·野生型和phyB 突变体叶片的气孔数目和长度第46-47页
  4 讨论第47-50页
 第二章 气孔发育相关基因在水稻phyB 突变体中的表达第50-80页
  1 实验材料第50-51页
   ·植物材料第50页
   ·菌株和质粒载体第50页
   ·酶和生化试剂第50页
   ·培养基、常用生化及分子生物学试剂第50-51页
   ·主要仪器设备第51页
   ·分析软件第51页
  2 实验方法第51-62页
   ·水稻气孔发育相关基因的来源与基因芯片分析第51-52页
   ·荧光定量PCR 检测气孔发育相关基因的表达第52-55页
     ·RNAiso 提取水稻叶片总RNA第52-53页
     ·反转录第53页
     ·Real-time PCR 操作方法第53-55页
   ·水稻ERECTA-like(ERL)基因植物表达载体的构建和烟草遗传转化第55-59页
     ·水稻ERECTA-like(ERL)基因cDNA 序列的获得第55页
     ·PCR 产物(OsERL 编码区)与T-载体的连接第55-56页
     ·大肠杆菌感受态细胞制备及转化第56页
     ·质粒提取和酶切鉴定第56-57页
     ·植物表达载体的构建第57页
     ·植物表达载体的农杆菌转化第57-58页
     ·农杆菌质粒的提取与鉴定第58页
     ·叶盘法转化烟草第58-59页
   ·转基因烟草的外源基因检测第59-60页
     ·PCR 检测第59-60页
     ·RT-PCR 检测第60页
   ·转基因烟草的生理学分析第60-61页
     ·耐旱性测定第60页
     ·离体叶片失水速率测定第60页
     ·光合速率、蒸腾速率、气孔导度和水分利用率测定第60-61页
     ·表皮细胞面积、气孔大小、数目和气孔指数测定第61页
   ·荧光定量PCR 检测水稻ERECTA-like 基因在红光下的表达第61-62页
     ·植物材料的培养第61页
     ·RNAiso 提取水稻叶片总RNA第61页
     ·反转录第61页
     ·Real-time PCR 操作方法第61-62页
  3 实验结果第62-77页
   ·水稻中气孔发育相关的同源基因的分子特征第62-66页
   ·水稻气孔发育相关基因的芯片结果及表达模式验证第66-67页
   ·气孔发育相关基因在野生型和phyB 突变体叶原基和分生组织中的表达水平第67-69页
   ·水稻ERECTA-like 基因植物表达载体的构建及转基因烟草的遗传分析第69-72页
     ·目的cDNA 获得第69-70页
     ·植物表达载体pCAMBIA1390-Ubi-OsERL 的构建第70页
     ·转基因烟草的遗传分析第70-72页
   ·转基因植株的耐旱性分析第72-73页
   ·转基因植株离体叶片的失水速率第73页
   ·转基因植株的光合速率、蒸腾速率及水分利用率第73-74页
   ·野生型和转基因植株气孔密度和气孔指数的比较第74-76页
   ·红光对水稻ERECTA 家族基因表达的影响第76-77页
  4 讨论第77-80页
 第三章 ABA 途径与水稻phyB 突变体耐旱性的相关性分析第80-92页
  1 实验材料第80页
  2 实验方法第80-84页
   ·水稻种子的ABA 处理第80页
   ·Real-time PCR 检测ABA 代谢途径相关基因的表达第80-81页
     ·RNAiso 提取水稻叶片总RNA第80页
     ·反转录第80-81页
     ·Real-time PCR 操作方法第81页
   ·水稻ABA 信号途径相关基因的表达谱分析第81-82页
   ·半定量RT-PCR 检测ABA 应答途径相关基因的表达第82-84页
     ·RNAiso 提取水稻叶片总RNA第82页
     ·反转录第82-83页
     ·半定量PCR第83-84页
  3 实验结果第84-89页
   ·水稻野生型和phyB 突变体对ABA 的敏感性分析第84-86页
   ·ABA 代谢途径相关基因在野生型和phyB 突变体中的表达模式分析第86-87页
   ·野生型和phyB 突变体干旱处理不同时间的基因表达图谱第87-88页
   ·ABA 信号途径相关基因在干旱胁迫条件下的表达差异分析第88-89页
  4 讨论第89-92页
第三部分 总结第92-94页
参考文献第94-105页
附录第105-108页
攻读博士学位期间整理发表的论文第108-109页
致谢第109页

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