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重组腺病毒Ad5-Notch 1对乳腺癌细胞增殖的影响

中文摘要第2-3页
Abstract第3页
引言第6-7页
第一章 实验材料第7-11页
    1 实验仪器第7页
    2 细胞株第7页
    3 主要试剂第7-8页
    4 溶液配制第8-11页
        4.1 细胞培养及增殖测定相关试剂第8页
        4.2 RT-PCR试剂所需第8-9页
        4.3 感受态细胞的制备第9页
        4.4 Western Blot试剂的配制第9-10页
        4.5 实验耗材及其它第10-11页
第二章 试验方法第11-22页
    1.1 U251细胞的培养第11页
    1.2 提取RNA所用器皿与电泳槽的处理第11页
    1.3 总RNA的提取第11-12页
    1.4 总RNA的定量及纯度检测第12页
    1.5 cDNA的合成第12页
    1.6 Notch1 NICD基因全长扩增第12-15页
        1.6.1 Notch1 NICD上游片段的合成第13-14页
        1.6.2 Notch1 NICD下游片段的合成第14页
        1.6.3 Notch1 NICD全长片段的合成第14-15页
    1.7 PCR产物的回收第15-16页
    1.8 Notch1基因胞内段NICD与PGEMT-easy载体的连接第16-17页
    1.9 连接产物转化感受态细胞第17页
    2.0 单克隆菌落挑取第17页
    2.1 质粒提取第17-18页
    2.2 质粒酶切及测序第18页
    2.3 重组腺病毒的包装第18-19页
    2.4 重组腺病毒感染乳腺癌细胞MCF-7第19页
    2.5 Western Blot检测转染前后NICD蛋白水平变化第19-20页
    2.6 MTT法检测细胞增殖状况第20页
    2.7 实时荧光定量PCR检测第20-22页
第三章 实验结果第22-27页
    1 聚合酶链式反应Notch1基因胞内段全长第22页
    2 酶切鉴定Notch1基因第22-23页
    3 上海生工测序Notch1基因胞内段功能区NICD第23-24页
    4 MTT法检测细胞转染后细胞增殖结果第24-25页
    5 Western Blot蛋白检测结果第25-26页
    6 荧光定量PCR检测Notch1胞内段mRNA结果第26-27页
第四章 讨论第27-29页
第五章 结论第29-30页
参考文献第30-31页
文献综述第31-39页
    综述参考文献第36-39页
攻读学位期间的研究成果第39-40页
英文缩略词表(Abbreviations and acronyms)第40-41页
致谢第41-42页

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