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Neuropilin-1在脓毒症小鼠CD4~+CD25~+调节性T细胞中的表达及其对免疫抑制功能的影响

中文摘要第4-7页
Abstract第7-8页
縮略语/符号说明第12-14页
前言第14-17页
    研究现状、成果第14-16页
    研究目的、方法第16-17页
一、neuropilin-1在小鼠脓毒症模型脾脏Treg的表达第17-36页
    1.1 实验动物、仪器和试剂第17-20页
        1.1.1 实验动物第17-18页
        1.1.2 仪器及试剂第18-20页
    1.2 实验方法及观察指标第20-27页
        1.2.1 制作CLP小鼠脓毒症模型第20-21页
        1.2.2 实验分组第21-22页
        1.2.3 分离小鼠脾脏CD4~+CD25~+Treg第22-26页
        1.2.4 荧光抗体染色第26页
        1.2.5 FACS Calibur流式细胞分析仪第26-27页
    1.3 统计学方法第27页
    1.4 实验结果第27-32页
        1.4.1 盲肠不同结扎比例对CLP小鼠脓毒症模型24h内死亡率的影响第27-28页
        1.4.2 CD4~+CD25~+Treg活力及纯度检测第28-29页
        1.4.3 盲肠不同结扎比例对CLP24h后小鼠脓毒症模型CD4~+CD25~+Treg特征性标志物—Foxp-3表达的影响第29-30页
        1.4.4 盲肠不同结扎比例对CLP24h后小鼠脓毒症模型CD4~+CD25~+Treg表面分子neuropilin-1表达的影响第30-32页
    1.5 讨论第32-35页
    1.6 小结第35-36页
二:抗neuropilin-1对Treg膜相关TGF-β、CTLA-4和Foxp3表达的影响第36-55页
    2.1 实验动物、仪器和试剂第36-38页
        2.1.1 实验动物第36页
        2.1.2 仪器及试剂第36-38页
    2.2 实验方法及观察指标第38-40页
        2.2.1 分离纯化小鼠脾脏CD4+CD25+Treg第38页
        2.2.2 实验分组第38-39页
        2.2.3 荧光抗体染色第39页
        2.2.4 FACS Calibur流式细胞分析仪第39-40页
    2.3 统计学方法第40页
    2.4 结果第40-52页
        2.4.1 小鼠脾脏CD4+CD25+Treg活力及纯度检测第40页
        2.4.2 不同浓度LPS诱导24h后对小鼠脾脏CD4~+CD25~+Treg特征性标志物—Foxp-3表达的影响第40-42页
        2.4.3 不同浓度LPS诱导24h后对小鼠脾脏CD~4+CD25~+Treg表面neuropilin-1表达的影响第42-44页
        2.4.4 不同浓度LPS诱导24h后对小鼠脾脏CD4~+CD25~+Treg膜相关TGF-β表达的影响第44-46页
        2.4.5 不同浓度LPS诱导24h后对小鼠脾脏CD4~+CD25~+Treg表面分子CTLA-4表达的影响第46-48页
        2.4.6 不同浓度抗neuropilin-1干预24h后对小鼠脾脏CD4~+CD25~+Treg表面分子neuropilin-1和膜相关TGF-β表达的影响第48-51页
        2.4.7 不同浓度抗neuropilin-1干预24h后对小鼠脾脏CD4~+CD25~+Treg特征性标志物—Foxp-3和表面分子CTLA-4表达的影响第51-52页
    2.5 讨论第52-54页
    2.6 小结第54-55页
三.抗neuropilin-1对CD4~+CD25~+Treg免疫抑制功能的影响第55-73页
    3.1 实验动物、仪器和试剂第55-58页
        3.1.1 实验动物第55页
        3.1.2 仪器及试剂第55-58页
    3.2 实验方法及观察指标第58-62页
        3.2.1 分离纯化小鼠脾脏CD4+CD25+Treg第58页
        3.2.2 CCK-8检测CD4~+CD25~-T淋巴细胞增殖功能细胞浓度滴定第58页
        3.2.3 实验分组第58-59页
        3.2.4 检测小鼠脾脏CD4~+CD25~-T淋巴细胞增殖功能第59页
        3.2.5 检测小鼠脾脏CD4~+CD25~-T淋巴细胞凋亡第59页
        3.2.6 Western blot检测CD4~+CD25~-T淋巴细胞内Smad2和磷酸化Smad2表达第59-62页
        3.2.7 FACS Calibur流式细胞分析仪第62页
    3.3 统计学方法第62页
    3.4 结果第62-70页
        3.4.1 小鼠脾脏CD4+CD25+Treg和CD4+CD25-T淋巴细胞活力及纯度检测第62页
        3.4.2 不同小鼠脾脏CD4~+CD25~-T淋巴细胞浓度对CCK-8检测CD4~+CD25~-T淋巴细胞增殖功能的影响第62-64页
        3.4.3 抗neuropilin-1对小鼠脾脏CD4~+CD25~+Treg抑制CD4~+CD25~-T淋巴细胞增殖功能的影响第64-66页
        3.4.4 5μg/ml抗neuropilin-1封闭的CD4~+CD25~+Treg与CD4~+CD25~-T淋巴细胞共培养对CD4~+CD25~-T淋巴细胞凋亡的影响第66-69页
        3.4.5 小鼠脾脏Treg及抗neuropilin-1干预对CD4~+CD25~-T淋巴细胞内Smad2表达和磷酸化的影响第69-70页
    3.5 讨论第70-72页
    3.6 小结第72-73页
结论第73-74页
参考文献第74-80页
发表论文和参加科研情况说明第80-81页
综述第81-90页
    综述参考文献第87-90页
致谢第90页

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