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亚洲镰孢菌(Fusarium asiaticum)对氰烯菌酯抗性水平调控机制的研究

摘要第9-11页
ABSTRACT第11-12页
符号及缩略说明表第13-15页
第一章 文献综述、研究目的及意义第15-41页
    1 亚洲镰孢菌研究进展第15-24页
        1.1 小麦赤霉病毒素第16-17页
        1.2 小麦赤霉病的侵染与再侵染第17-18页
        1.3 小麦赤霉病发病症状第18-19页
        1.4 影响小麦赤霉病发病情况的因素第19-21页
            1.4.1 菌源量的多寡第19页
            1.4.2 小麦品种的抗病性第19-20页
            1.4.3 气候和温度第20-21页
            1.4.4 其它因素第21页
        1.5 小麦赤霉病防治第21-24页
            1.5.1 农业防治第21页
            1.5.2 化学防治第21-22页
            1.5.3 生物防治第22-23页
            1.5.4 抗性育种第23页
            1.5.5 抗菌性的转基因技术第23-24页
    2 氰烯菌酯(JS399-19)的研究进展第24-29页
        2.1 氰烯菌酯研究现状第24-25页
            2.1.1 氰烯菌酯的理化性质第24-25页
            2.1.2 毒性第25页
            2.1.3 氰烯菌酯的抗菌谱第25页
        2.2 氰烯菌酯对亚洲镰孢菌的研究进展第25-28页
            2.2.1 氰烯菌酯对多菌灵抗性菌株和敏感菌株毒力比较第26页
            2.2.2 氰烯菌酯对小麦赤霉病内吸性疏导性的研究第26-27页
            2.2.3 氰烯菌酯敏感性基线的建立第27页
            2.2.4 氰烯菌酯对亚洲镰孢菌分生孢子萌发的影响第27页
            2.2.5 氰烯菌酯对亚洲镰孢菌呼吸作用的影响第27-28页
        2.3 亚洲镰孢菌对氰烯菌酯的抗药性研究进展第28-29页
            2.3.1 亚洲镰孢菌对氰烯菌酯的室内抗药性风险评估第28页
            2.3.2 亚洲镰孢对氰烯菌酯的抗药性是由单个基因控制的第28页
            2.3.3 亚洲镰孢菌对氰烯菌酯抗药性生化机制的研究第28页
            2.3.4 氰烯菌酯对亚洲镰孢菌蛋白质组的影响第28-29页
            2.3.5 氰烯菌酯抗性相关基因的研究第29页
    3 肌球蛋白的研究进展第29-35页
        3.1 分子马达蛋白第29-31页
            3.1.1 肌动蛋白第30-31页
            3.1.2 肌球蛋白第31页
            3.1.3 驱动蛋白第31页
        3.2 马达蛋白的分类与结构第31-33页
            3.2.1 肌球蛋白的分类与结构第31-32页
            3.2.2 肌动蛋白的分类与结构第32-33页
            3.2.3 驱动蛋白的分类与结构第33页
        3.3 肌球蛋白和驱动蛋白的研究进展第33-34页
            3.3.1 驱动蛋白研究进展第33-34页
            3.3.2 肌球蛋白研究进展第34页
        3.4 肌球蛋白在氰烯菌酯中的研究第34-35页
    4 本论文的研究目的和意义第35-37页
    参考文献第37-41页
第二章 FAMYO2B和FAMYO2调控亚洲镰孢菌对氰烯菌酯抗性水平及其生物学功能的研究第41-67页
    1 材料与方法第43-48页
        1.1 菌株第43-44页
        1.2 培养基第44页
        1.3 DNA和RNA的提取第44页
        1.4 亚洲镰孢菌FaMyo2B与FaMyo2基因的序列分析第44页
        1.5 RT-PCR进行基因表达量测定第44页
        1.6 FaMyo2基因的敲除及FaMyo2B基因的破坏第44-47页
            1.6.1 敲除载体的构建第44-46页
            1.6.2 基于同源置换法的FaMyo2B与FaMyo2基因的破坏与敲除第46页
            1.6.3 突变体的验证第46-47页
        1.7 FaMyo2B与FaMyo2基因敲除突变体表型测定第47-48页
            1.7.1 突变体对氰烯菌酯的敏感性测定第47页
            1.7.2 菌落生长速率测定第47页
            1.7.3 分生孢子及子囊壳的产生情况第47页
            1.7.4 致病力测定第47-48页
            1.7.5 突变体对毒素合成基因表达的影响第48页
    2 结果与分析第48-60页
        2.1 亚洲镰孢菌中FaMyo2B与FaMyo2基因的鉴定与序列分析第48-50页
        2.2 亚洲镰孢菌FaMyo2基因完全敲除和FaMyo2B基因部分敲除突变体的生物学特征第50-60页
            2.2.1 FaMyo2基因敲除突变体及FaMyo2B部分敲除突变体的获得第50-51页
            2.2.2 FaMyo2B与FaMyo2基因与亚洲镰孢菌对氰烯菌酯抗药性相关第51-52页
            2.2.3 FaMyo2B与FaMyo2基因对抗药性相关基因表达量的调控作用第52页
            2.2.4 FaMyo2基因对细胞壁敏感性的影响第52-53页
            2.2.5 FaMyo2B与FaMyo2基因对菌丝生长速率和菌丝形态的影响第53-54页
            2.2.6 FaMyo2B与FaMyo2基因影响亚洲镰孢菌无性生殖第54-55页
            2.2.7 FaMyo2基因影响亚洲镰孢菌菌丝内细胞核分布和隔膜形成第55-56页
            2.2.8 FaMyo2B与FaMyo2基因影响亚洲镰孢菌有性生殖第56-57页
            2.2.9 FaMyo2B与FaMyo2基因对亚洲镰孢菌致病力的影响第57-59页
            2.2.10 FaMyo2B与FaMyo2基因对亚洲镰孢菌致病力基因表达量的调控作用第59-60页
    3 讨论第60-63页
    参考文献第63-67页
第三章 亚洲镰孢菌内FASMY1协同FAMYO2B参与对氰烯菌酯抗性水平的调控及其生物学功能的研究第67-91页
    1 材料与方法第68-72页
        1.1 菌株第68-69页
        1.2 培养基第69页
        1.3 DNA和RNA的提取第69页
        1.4 亚洲镰孢菌FaSmy1基因的序列分析第69页
        1.5 RT-PCR进行基因表达量测定第69-70页
        1.6 FaSmy1基因的敲除及回复第70-71页
            1.6.1 敲除载体的构建第70-71页
            1.6.2 基于同源置换法的FaSmy1基因的敲除与回复第71页
            1.6.3 突变体的验证第71页
        1.7 FaSmy1基因敲除与回复突变体的表型测定第71-72页
            1.7.1 突变体对氰烯菌酯的敏感性测定第71页
            1.7.2 菌落生长速率测定第71页
            1.7.3 分生孢子及子囊壳的产生情况第71页
            1.7.4 致病力测定第71-72页
            1.7.5 突变体产DON能力测定及对毒素合成基因表达影响第72页
    2 结果与分析第72-85页
        2.1 亚洲镰孢菌中FaSmy1基因的鉴定与序列分析第72页
        2.2 亚洲镰孢菌FaSmy1基因敲除突变体的生物学特征第72-85页
            2.2.1 FaSmy1基因敲除突变体的获得第72-73页
            2.2.2 FaSmy1突变体影响菌丝生长第73-75页
            2.2.3 FaSmy1基因影响亚洲镰孢菌的无性生殖第75-76页
            2.2.4 FaSmy1基因不影响亚洲镰孢菌的有性生殖第76-77页
            2.2.5 FaSmy1突变体的致病力显著降低第77-78页
            2.2.6 FaSmy1基因对亚洲镰孢菌毒素相关基因表达量的调控作用第78-79页
            2.2.7 FaSmy1突变体降低亚洲镰孢菌的毒素产量第79页
            2.2.8 FaSmy1突变体降低亚洲镰孢菌的穿透能力第79-80页
            2.2.9 FaSmy1基因与亚洲镰孢菌对氰烯菌酯抗药性相关第80-82页
            2.2.10 FaMyo2B、FaMyo2、FaSmy1基因对抗药性靶标基因表达量的调控作用第82-83页
            2.2.11 FaMyo2B与FaSmy1基因存在互作关系第83-84页
            2.2.12 氰烯菌酯处理对FaSmy1表达量的影响第84-85页
    3 讨论第85-87页
    参考文献第87-91页
附录第91-99页
    1 生物实验常用试剂及培养基第91-93页
    2 亚洲镰孢菌分子生物学操作方法第93-99页
        2.1 CTAB法大量提取基因组DNA第93页
        2.2 基于CTAB法的快速简易法提取基因组DNA第93页
        2.3 RNA提取第93-94页
        2.4 PCR产物克隆及测序第94页
        2.5 亚洲镰孢菌原生质体转化方法第94-96页
        2.6 Southern杂交第96-99页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第99-101页
致谢第101页

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