摘要 | 第9-11页 |
ABSTRACT | 第11-12页 |
符号及缩略说明表 | 第13-15页 |
第一章 文献综述、研究目的及意义 | 第15-41页 |
1 亚洲镰孢菌研究进展 | 第15-24页 |
1.1 小麦赤霉病毒素 | 第16-17页 |
1.2 小麦赤霉病的侵染与再侵染 | 第17-18页 |
1.3 小麦赤霉病发病症状 | 第18-19页 |
1.4 影响小麦赤霉病发病情况的因素 | 第19-21页 |
1.4.1 菌源量的多寡 | 第19页 |
1.4.2 小麦品种的抗病性 | 第19-20页 |
1.4.3 气候和温度 | 第20-21页 |
1.4.4 其它因素 | 第21页 |
1.5 小麦赤霉病防治 | 第21-24页 |
1.5.1 农业防治 | 第21页 |
1.5.2 化学防治 | 第21-22页 |
1.5.3 生物防治 | 第22-23页 |
1.5.4 抗性育种 | 第23页 |
1.5.5 抗菌性的转基因技术 | 第23-24页 |
2 氰烯菌酯(JS399-19)的研究进展 | 第24-29页 |
2.1 氰烯菌酯研究现状 | 第24-25页 |
2.1.1 氰烯菌酯的理化性质 | 第24-25页 |
2.1.2 毒性 | 第25页 |
2.1.3 氰烯菌酯的抗菌谱 | 第25页 |
2.2 氰烯菌酯对亚洲镰孢菌的研究进展 | 第25-28页 |
2.2.1 氰烯菌酯对多菌灵抗性菌株和敏感菌株毒力比较 | 第26页 |
2.2.2 氰烯菌酯对小麦赤霉病内吸性疏导性的研究 | 第26-27页 |
2.2.3 氰烯菌酯敏感性基线的建立 | 第27页 |
2.2.4 氰烯菌酯对亚洲镰孢菌分生孢子萌发的影响 | 第27页 |
2.2.5 氰烯菌酯对亚洲镰孢菌呼吸作用的影响 | 第27-28页 |
2.3 亚洲镰孢菌对氰烯菌酯的抗药性研究进展 | 第28-29页 |
2.3.1 亚洲镰孢菌对氰烯菌酯的室内抗药性风险评估 | 第28页 |
2.3.2 亚洲镰孢对氰烯菌酯的抗药性是由单个基因控制的 | 第28页 |
2.3.3 亚洲镰孢菌对氰烯菌酯抗药性生化机制的研究 | 第28页 |
2.3.4 氰烯菌酯对亚洲镰孢菌蛋白质组的影响 | 第28-29页 |
2.3.5 氰烯菌酯抗性相关基因的研究 | 第29页 |
3 肌球蛋白的研究进展 | 第29-35页 |
3.1 分子马达蛋白 | 第29-31页 |
3.1.1 肌动蛋白 | 第30-31页 |
3.1.2 肌球蛋白 | 第31页 |
3.1.3 驱动蛋白 | 第31页 |
3.2 马达蛋白的分类与结构 | 第31-33页 |
3.2.1 肌球蛋白的分类与结构 | 第31-32页 |
3.2.2 肌动蛋白的分类与结构 | 第32-33页 |
3.2.3 驱动蛋白的分类与结构 | 第33页 |
3.3 肌球蛋白和驱动蛋白的研究进展 | 第33-34页 |
3.3.1 驱动蛋白研究进展 | 第33-34页 |
3.3.2 肌球蛋白研究进展 | 第34页 |
3.4 肌球蛋白在氰烯菌酯中的研究 | 第34-35页 |
4 本论文的研究目的和意义 | 第35-37页 |
参考文献 | 第37-41页 |
第二章 FAMYO2B和FAMYO2调控亚洲镰孢菌对氰烯菌酯抗性水平及其生物学功能的研究 | 第41-67页 |
1 材料与方法 | 第43-48页 |
1.1 菌株 | 第43-44页 |
1.2 培养基 | 第44页 |
1.3 DNA和RNA的提取 | 第44页 |
1.4 亚洲镰孢菌FaMyo2B与FaMyo2基因的序列分析 | 第44页 |
1.5 RT-PCR进行基因表达量测定 | 第44页 |
1.6 FaMyo2基因的敲除及FaMyo2B基因的破坏 | 第44-47页 |
1.6.1 敲除载体的构建 | 第44-46页 |
1.6.2 基于同源置换法的FaMyo2B与FaMyo2基因的破坏与敲除 | 第46页 |
1.6.3 突变体的验证 | 第46-47页 |
1.7 FaMyo2B与FaMyo2基因敲除突变体表型测定 | 第47-48页 |
1.7.1 突变体对氰烯菌酯的敏感性测定 | 第47页 |
1.7.2 菌落生长速率测定 | 第47页 |
1.7.3 分生孢子及子囊壳的产生情况 | 第47页 |
1.7.4 致病力测定 | 第47-48页 |
1.7.5 突变体对毒素合成基因表达的影响 | 第48页 |
2 结果与分析 | 第48-60页 |
2.1 亚洲镰孢菌中FaMyo2B与FaMyo2基因的鉴定与序列分析 | 第48-50页 |
2.2 亚洲镰孢菌FaMyo2基因完全敲除和FaMyo2B基因部分敲除突变体的生物学特征 | 第50-60页 |
2.2.1 FaMyo2基因敲除突变体及FaMyo2B部分敲除突变体的获得 | 第50-51页 |
2.2.2 FaMyo2B与FaMyo2基因与亚洲镰孢菌对氰烯菌酯抗药性相关 | 第51-52页 |
2.2.3 FaMyo2B与FaMyo2基因对抗药性相关基因表达量的调控作用 | 第52页 |
2.2.4 FaMyo2基因对细胞壁敏感性的影响 | 第52-53页 |
2.2.5 FaMyo2B与FaMyo2基因对菌丝生长速率和菌丝形态的影响 | 第53-54页 |
2.2.6 FaMyo2B与FaMyo2基因影响亚洲镰孢菌无性生殖 | 第54-55页 |
2.2.7 FaMyo2基因影响亚洲镰孢菌菌丝内细胞核分布和隔膜形成 | 第55-56页 |
2.2.8 FaMyo2B与FaMyo2基因影响亚洲镰孢菌有性生殖 | 第56-57页 |
2.2.9 FaMyo2B与FaMyo2基因对亚洲镰孢菌致病力的影响 | 第57-59页 |
2.2.10 FaMyo2B与FaMyo2基因对亚洲镰孢菌致病力基因表达量的调控作用 | 第59-60页 |
3 讨论 | 第60-63页 |
参考文献 | 第63-67页 |
第三章 亚洲镰孢菌内FASMY1协同FAMYO2B参与对氰烯菌酯抗性水平的调控及其生物学功能的研究 | 第67-91页 |
1 材料与方法 | 第68-72页 |
1.1 菌株 | 第68-69页 |
1.2 培养基 | 第69页 |
1.3 DNA和RNA的提取 | 第69页 |
1.4 亚洲镰孢菌FaSmy1基因的序列分析 | 第69页 |
1.5 RT-PCR进行基因表达量测定 | 第69-70页 |
1.6 FaSmy1基因的敲除及回复 | 第70-71页 |
1.6.1 敲除载体的构建 | 第70-71页 |
1.6.2 基于同源置换法的FaSmy1基因的敲除与回复 | 第71页 |
1.6.3 突变体的验证 | 第71页 |
1.7 FaSmy1基因敲除与回复突变体的表型测定 | 第71-72页 |
1.7.1 突变体对氰烯菌酯的敏感性测定 | 第71页 |
1.7.2 菌落生长速率测定 | 第71页 |
1.7.3 分生孢子及子囊壳的产生情况 | 第71页 |
1.7.4 致病力测定 | 第71-72页 |
1.7.5 突变体产DON能力测定及对毒素合成基因表达影响 | 第72页 |
2 结果与分析 | 第72-85页 |
2.1 亚洲镰孢菌中FaSmy1基因的鉴定与序列分析 | 第72页 |
2.2 亚洲镰孢菌FaSmy1基因敲除突变体的生物学特征 | 第72-85页 |
2.2.1 FaSmy1基因敲除突变体的获得 | 第72-73页 |
2.2.2 FaSmy1突变体影响菌丝生长 | 第73-75页 |
2.2.3 FaSmy1基因影响亚洲镰孢菌的无性生殖 | 第75-76页 |
2.2.4 FaSmy1基因不影响亚洲镰孢菌的有性生殖 | 第76-77页 |
2.2.5 FaSmy1突变体的致病力显著降低 | 第77-78页 |
2.2.6 FaSmy1基因对亚洲镰孢菌毒素相关基因表达量的调控作用 | 第78-79页 |
2.2.7 FaSmy1突变体降低亚洲镰孢菌的毒素产量 | 第79页 |
2.2.8 FaSmy1突变体降低亚洲镰孢菌的穿透能力 | 第79-80页 |
2.2.9 FaSmy1基因与亚洲镰孢菌对氰烯菌酯抗药性相关 | 第80-82页 |
2.2.10 FaMyo2B、FaMyo2、FaSmy1基因对抗药性靶标基因表达量的调控作用 | 第82-83页 |
2.2.11 FaMyo2B与FaSmy1基因存在互作关系 | 第83-84页 |
2.2.12 氰烯菌酯处理对FaSmy1表达量的影响 | 第84-85页 |
3 讨论 | 第85-87页 |
参考文献 | 第87-91页 |
附录 | 第91-99页 |
1 生物实验常用试剂及培养基 | 第91-93页 |
2 亚洲镰孢菌分子生物学操作方法 | 第93-99页 |
2.1 CTAB法大量提取基因组DNA | 第93页 |
2.2 基于CTAB法的快速简易法提取基因组DNA | 第93页 |
2.3 RNA提取 | 第93-94页 |
2.4 PCR产物克隆及测序 | 第94页 |
2.5 亚洲镰孢菌原生质体转化方法 | 第94-96页 |
2.6 Southern杂交 | 第96-99页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第99-101页 |
致谢 | 第101页 |