| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-13页 |
| 文献综述 | 第13-21页 |
| 第一章 非洲猪瘟病毒研究进展 | 第13-21页 |
| ·非洲猪瘟病毒生物学特性研究进展 | 第13-15页 |
| ·非洲猪瘟病毒形态特征 | 第13页 |
| ·非洲猪瘟病毒理化特征 | 第13-14页 |
| ·非洲猪瘟病毒抗原性 | 第14页 |
| ·非洲猪瘟病毒复制 | 第14-15页 |
| ·非洲猪瘟病毒分子生物学研究进展 | 第15-17页 |
| ·非洲猪瘟病毒基因组结构与毒力 | 第15页 |
| ·非洲猪瘟病毒蛋白的翻译与加工 | 第15页 |
| ·非洲猪瘟病毒基因型 | 第15页 |
| ·非洲猪瘟病毒编码的主要蛋白及功能 | 第15-17页 |
| ·非洲猪瘟的流行病学 | 第17-18页 |
| ·非洲猪瘟的临床表现 | 第18页 |
| ·非洲猪瘟的诊断 | 第18-19页 |
| ·非洲猪瘟的防治 | 第19-21页 |
| 试验研究 | 第21-49页 |
| 第二章 非洲猪瘟病毒VP73 基因B 细胞抗原表位预测 | 第21-24页 |
| ·材料与方法 | 第22页 |
| ·ASFV VP73 蛋白的氨基酸序列 | 第22页 |
| ·ASFV VP73 蛋白的抗原表位预测 | 第22页 |
| ·结果与分析 | 第22-23页 |
| ·讨论 | 第23页 |
| ·小结 | 第23-24页 |
| 第三章 非洲猪瘟病毒VP73 基因的原核表达及多克隆抗体的制备 | 第24-36页 |
| ·试验材料 | 第24-27页 |
| ·动物材料 | 第24页 |
| ·血清及抗体 | 第24页 |
| ·质粒与菌株 | 第24页 |
| ·工具酶和其他生化试剂 | 第24页 |
| ·引物合成及DNA 测序 | 第24-25页 |
| ·培养基及缓冲液配制 | 第25-26页 |
| ·主要仪器设备 | 第26-27页 |
| ·试验方法 | 第27-31页 |
| ·目的基因VP73 的获得和线性化表达载体pET32a（+）的制备 | 第27页 |
| ·连接及转化克隆菌株DH5α | 第27-28页 |
| ·转化子筛选 | 第28-29页 |
| ·重组质粒转化表达菌株BL21(DE3) | 第29页 |
| ·重组蛋白表达及纯化 | 第29-30页 |
| ·多克隆抗体的制备 | 第30-31页 |
| ·Western blotting 检测 | 第31页 |
| ·试验结果 | 第31-35页 |
| ·VP73 基因克隆和表达载体的构建 | 第31-32页 |
| ·重组蛋白的诱导表达及细胞定位 | 第32页 |
| ·重组蛋白的纯化 | 第32-34页 |
| ·多克隆抗体的制备 | 第34页 |
| ·表达产物Western blotting 分析 | 第34-35页 |
| ·讨论 | 第35页 |
| ·小结 | 第35-36页 |
| 第四章 非洲猪瘟病毒VP73 基因主要抗原表位区的原核表达 | 第36-44页 |
| ·试验材料 | 第36页 |
| ·血清和抗体 | 第36页 |
| ·质粒与菌株 | 第36页 |
| ·工具酶和其他生化试剂 | 第36页 |
| ·引物合成及DNA 测序 | 第36页 |
| ·培养基及缓冲液配制 | 第36页 |
| ·主要仪器设备 | 第36页 |
| ·试验方法 | 第36-40页 |
| ·非洲猪瘟病毒VP73 基因抗原表位区的PCR 扩增 | 第36-37页 |
| ·抗原表位区基因的克隆和原核表达载体的构建 | 第37-39页 |
| ·重组质粒转化表达菌株BL21(DE3) 及其表达纯化 | 第39-40页 |
| ·Western blotting 检测 | 第40页 |
| ·结果与分析 | 第40-43页 |
| ·VP73 基因主要抗原表位区的PCR 扩增与克隆 | 第40-42页 |
| ·重组蛋白的诱导表达及表达产物的可溶性分析 | 第42页 |
| ·重组蛋白的纯化 | 第42页 |
| ·表达产物Western blotting 分析 | 第42-43页 |
| ·讨论 | 第43页 |
| ·小结 | 第43-44页 |
| 第五章 非洲猪瘟病毒间接ELISA 检测方法的建立 | 第44-49页 |
| ·试验材料 | 第44-45页 |
| ·抗原、抗体及血清 | 第44页 |
| ·试剂及溶液配制 | 第44-45页 |
| ·试验仪器 | 第45页 |
| ·间接ELISA 检测方法的建立及反应条件的优化 | 第45-46页 |
| ·间接ELISA 检测方法的操作步骤 | 第45页 |
| ·抗原最佳包被浓度和血清最佳稀释度的确定 | 第45页 |
| ·包被液的选择 | 第45-46页 |
| ·封闭液的选择 | 第46页 |
| ·特异性检测 | 第46页 |
| ·试验结果 | 第46-48页 |
| ·抗原和血清最佳稀释倍数的确定 | 第46页 |
| ·最佳包被液的选择 | 第46-47页 |
| ·最佳封闭液的选择 | 第47页 |
| ·特异性检测 | 第47-48页 |
| ·讨论 | 第48页 |
| ·小结 | 第48-49页 |
| 结论 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-55页 |
| 英文缩略词 | 第55-56页 |
| 致谢 | 第56-57页 |
| 作者简介 | 第57页 |
