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Kiss1调控骨质的分子机理研究

摘要第6-7页
ABSTRACT第7页
第一章 研究背景第13-42页
    第一节 骨组织结构第13-14页
        1.1 骨结构概述第13页
        1.2 骨基质成分组成第13-14页
        1.3 骨组织形态第14页
    第二节 骨细胞分类第14-24页
        2.1 骨细胞(Osteocyte):第14-15页
        2.2 成骨细胞(osteoblast)和骨形成:第15-21页
        2.3 破骨细胞(osteoclast)和骨吸收:第21-24页
    第三节 骨重塑过程第24-33页
        3.1 骨重塑第24-26页
        3.2 骨重塑的调节第26-29页
        3.3 RANKL/RANK/OPG系统第29-33页
    第四节 GPCR家族及功能第33-42页
        4.1 分类第34页
        4.2 功能第34-35页
        4.3 GPCR与骨代谢第35-36页
        4.4 Kiss1和Gpr54第36-39页
        4.5 Kiss1/Gpr54下游信号通路第39页
        4.6 Kiss1/Gpr54生理功能第39-42页
第二章 前言第42-44页
第三章 材料与方法第44-72页
    第一节 实验材料第44-55页
        1.1 实验细胞第44页
        1.2 实验试剂第44-47页
        1.3 实验仪器、耗材第47-48页
        1.4 实验溶液配置第48-55页
    第二节 实验方法第55-72页
        2.1 cDNA制备:第55-56页
        2.2 RT-PCR、 Q-PCR:第56-58页
        2.3 荧光素酶报告基因检测:第58页
        2.4 免疫共沉淀:第58-59页
        2.5 小鼠骨髓基质分离间充质干细胞:第59-60页
        2.6 小鼠骨髓来源间充质干细胞向成骨细胞分化第60页
        2.7 初生乳鼠头盖骨分离成骨细胞:第60-61页
        2.8 小鼠骨髓来源BMM细胞培养:第61页
        2.9 破骨细胞骨片侵蚀:第61-62页
        2.10 成骨细胞-破骨细胞共培养:第62页
        2.11 成骨细胞克隆形成:第62-63页
        2.12 成骨细胞ALP碱性磷酸酶染色:第63页
        2.13 成骨细胞Von Kossa矿化染色:第63页
        2.14 破骨细胞TRAP染色:第63页
        2.15 未脱钙骨组织切片:第63-66页
        2.16 Von Kossa矿化切片染色:第66-67页
        2.17 Goldner's三色染色:第67-69页
        2.18 骨生成率(BFR)检测:第69页
        2.19 骨髓嵌合体小鼠模型:第69-70页
        2.20 所用引物:第70-72页
第四章 实验结果与分析第72-104页
    第一节 Gpr54和Kiss1在骨代谢相关细胞分化过程中的表达情况第72-74页
        1.1 Gpr54和Kiss1在成骨细胞分化过程中的表达情况第72-73页
        1.2 Gpr54和Kiss1在破骨细胞分化过程中的表达情况第73-74页
        1.3 小结第74页
    第二节 Gpr54和Kiss1敲除小鼠骨量下降第74-79页
        2.1 Gpr54~(-/-)小鼠骨量下降第74-76页
        2.2 Kiss1~(-/-)小鼠骨量下降第76-78页
        2.3 小结第78-79页
    第三节 Kiss1/Gpr54负调控破骨细胞分化和功能第79-83页
        3.1 Kiss1敲除小鼠破骨细胞分化加剧第79-80页
        3.2 Kiss1敲除小鼠体内破骨细胞活性增强第80页
        3.3 激活Kiss1抑制破骨细胞活性第80-82页
        3.4 小结第82-83页
    第四节 Kiss1通过成骨细胞调控破骨细胞活性第83-87页
        4.1 成骨细胞缺失Kiss1促进破骨细胞分化第83-84页
        4.2 成骨细胞缺失Kiss1促进RANKL的表达第84-86页
        4.3 小结第86-87页
    第五节 Kiss1/Gpr54负调控成骨细胞分化和功能第87-95页
        5.1 Gpr54和Kiss1敲除小鼠骨生成作用增强第87-90页
        5.2 Gpr54和Kiss1敲除小鼠成骨细胞的增殖和分化加剧第90-94页
        5.3 小结第94-95页
    第六节 Kiss1/Gpr54胞内信号机制第95-99页
        6.1 Kiss1/Gpr54通过DUSP18影响AKT、C-SRC调节破骨细胞活性第95-97页
        6.2 Kiss1/Gpr54通过DUSP18、RUNX2调节成骨细胞活性第97-98页
        6.3 小结第98-99页
    第七节 Kisspeptin直接调节骨重塑第99-101页
        7.1 小结第101页
    第八节 Kisspeptin抑制OVX导致的骨丢失第101-104页
        8.1 小结第102-104页
第五章 论文总结第104-107页
参考文献第107-115页
附录 缩略词汇表第115-116页
攻读硕士期间参与的科研项目第116-117页
致谢第117页

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