| 摘要 | 第3-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 引言 | 第10-14页 |
| 1.1 乳腺癌的现状 | 第10-11页 |
| 1.1.1 乳腺癌发展现状 | 第10页 |
| 1.1.2 乳腺癌诊断现状及存在问题 | 第10-11页 |
| 1.1.3 乳腺癌研究新进展 | 第11页 |
| 1.2 microRNA | 第11-13页 |
| 1.2.1 miRNA的生物合成 | 第12页 |
| 1.2.2 miRNA与肿瘤 | 第12-13页 |
| 1.2.3 miRNA在乳腺癌中的研究进展 | 第13页 |
| 1.2.4 miRNA标志物在乳腺癌辅助诊断中的应用 | 第13页 |
| 1.3 MIRNA研究思路及新机遇 | 第13-14页 |
| 第一部分 miRNA高通量测序及表达差异筛选 | 第14-24页 |
| 1.1 材料 | 第14-15页 |
| 1.1.1 主要仪器 | 第14-15页 |
| 1.1.2 主要试剂 | 第15页 |
| 1.1.3 主要试剂制备 | 第15页 |
| 1.2 研究对象与方法 | 第15-18页 |
| 1.2.1 研究对象 | 第15-16页 |
| 1.2.2 标本处理 | 第16页 |
| 1.2.3 RNA提取 | 第16-17页 |
| 1.2.4 高通量测序 | 第17-18页 |
| 1.3 实验结果分析 | 第18-22页 |
| 1.3.1 RNA质量检测电泳结果 | 第18页 |
| 1.3.2 测序结果分析 | 第18-20页 |
| 1.3.3 结果 | 第20-22页 |
| 1.4 讨论 | 第22-24页 |
| 第二部分 乳腺癌差异性miRNA血清学验证 | 第24-32页 |
| 2.1 材料 | 第24-25页 |
| 2.1.1 主要仪器 | 第24-25页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第25页 |
| 2.1.3 引物设计 | 第25页 |
| 2.2 实验对象及标本处理 | 第25-26页 |
| 2.2.1 实验对象 | 第25-26页 |
| 2.2.2 标本处理 | 第26页 |
| 2.3 实验方法 | 第26-28页 |
| 2.3.1 血清miRNA提取 | 第26-27页 |
| 2.3.2 miRNA cDNA第一链合成 | 第27-28页 |
| 2.3.3 miRNA荧光定量PCR | 第28页 |
| 2.3.4 数据处理与统计 | 第28页 |
| 2.4 结果 | 第28-31页 |
| 2.4.1 血清循环miRNA的RT-PGR检测 | 第28-30页 |
| 2.4.2 实验组和对照组血清中miRNA表达情况分析 | 第30-31页 |
| 2.5 讨论 | 第31-32页 |
| 第三部分 miR-223、miR-423-5P在乳腺癌中功能的初步研究 | 第32-38页 |
| 3.1 材料 | 第32-33页 |
| 3.1.1 主要仪器 | 第32页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第32-33页 |
| 3.2 实验方法 | 第33-34页 |
| 3.2.1 乳腺癌细胞的培养 | 第33页 |
| 3.2.2 MDA-MB-453、MDA-MB-468细胞转染 | 第33-34页 |
| 3.2.3 miRNA-223-3p inhibitor、miR-423-5p inhibitor转染后的检测 | 第34页 |
| 3.2.4 miR-223靶基因预测及功能分析 | 第34页 |
| 3.3 实验结果 | 第34-36页 |
| 3.3.1 MDA-MB-453、MDA-MB-468细胞培养 | 第34页 |
| 3.3.2 CCK8检测miRNA对乳腺癌细胞生长活力的影响 | 第34-35页 |
| 3.3.3 miR-223-3p、miR-423-5p靶基因预测及分类 | 第35-36页 |
| 3.4 讨论 | 第36-38页 |
| 结语 | 第38-39页 |
| 参考文献 | 第39-41页 |
| 附录 | 第41-48页 |
| 附录1：英文缩写词 | 第41-42页 |
| 附录2：综述 | 第42-48页 |
| 参考文献 | 第46-48页 |
| 在校期间发表论文情况 | 第48-49页 |
| 致谢 | 第49-50页 |
| 统计学审核证明 | 第50页 |
