| 摘要 | 第3-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 1 绪论 | 第10-21页 |
| 1.1 泌尿系结石 | 第10页 |
| 1.2 草酸降解酶 | 第10-11页 |
| 1.3 草酸脱羧酶的性质及应用研究进展 | 第11-17页 |
| 1.3.1 草酸脱羧酶的来源及性质 | 第11-13页 |
| 1.3.2 Oxdc的催化机理 | 第13页 |
| 1.3.3 Oxdc的应用研究进展 | 第13-16页 |
| 1.3.4 草酸降解菌预防治疗草酸钙结石症的研究进展 | 第16-17页 |
| 1.4 蛋白质(酶)在固体材料表面的吸附研究 | 第17页 |
| 1.5 草酸钙晶体的吸附研究 | 第17-18页 |
| 1.6 蛋白质的化学修饰 | 第18-20页 |
| 1.6.1 蛋白质的化学修饰类型 | 第19页 |
| 1.6.2 修饰剂类型 | 第19-20页 |
| 1.7 研究的目的及意义 | 第20-21页 |
| 2 Oxdc促进草酸钙结晶溶解的体外研究 | 第21-30页 |
| 2.1 引言 | 第21页 |
| 2.2 实验材料、试剂及仪器 | 第21-22页 |
| 2.2.1 培养基及菌种 | 第21页 |
| 2.2.2 主要试剂 | 第21页 |
| 2.2.3 主要仪器 | 第21-22页 |
| 2.3 实验方法 | 第22-25页 |
| 2.3.1 Oxdc的制备与酶活力检测 | 第22-24页 |
| 2.3.2 标准溶液的制备及标准曲线的绘制 | 第24-25页 |
| 2.3.3 Oxdc溶解草酸钙结晶的实验 | 第25页 |
| 2.4 结果与讨论 | 第25-29页 |
| 2.4.1 Oxdc的诱导表达与纯化结果 | 第25-26页 |
| 2.4.2 不同加酶量对Oxdc溶解草酸钙结晶的实验 | 第26-27页 |
| 2.4.3 反应pH值对Oxdc溶解草酸钙结晶的实验 | 第27页 |
| 2.4.4 反应温度对Oxdc溶解草酸钙结晶的实验 | 第27-28页 |
| 2.4.5 反应产物对Oxdc溶解草酸钙结晶的实验 | 第28-29页 |
| 2.5 小结 | 第29-30页 |
| 3 草酸钙晶体吸附分子的初步筛选及其在草酸钙晶体上的吸附研究 | 第30-41页 |
| 3.1 引言 | 第30页 |
| 3.2 实验材料、试剂及仪器 | 第30-31页 |
| 3.2.1 材料与试剂 | 第30页 |
| 3.2.2 主要仪器 | 第30-31页 |
| 3.3 实验方法 | 第31-34页 |
| 3.3.1 COM饱和溶液的制备 | 第31页 |
| 3.3.2 EDTA在COM晶体上的吸附实验 | 第31页 |
| 3.3.3 EDTA的浓度测定 | 第31-32页 |
| 3.3.4 COM对EDTA的吸附特性研究 | 第32-34页 |
| 3.3.5 数据处理 | 第34页 |
| 3.4 结果与讨论 | 第34-40页 |
| 3.4.1 不同因素对EDTA吸附的影响 | 第34-37页 |
| 3.4.2 COM对EDTA的吸附特性研究 | 第37-40页 |
| 3.5 小结 | 第40-41页 |
| 4 乙二胺四乙酸二酸酐对Oxdc的修饰研究 | 第41-62页 |
| 4.1 引言 | 第41页 |
| 4.2 实验材料、试剂及仪器 | 第41页 |
| 4.2.1 培养基及菌种 | 第41页 |
| 4.2.2 主要试剂 | 第41页 |
| 4.2.3 主要仪器 | 第41页 |
| 4.3 实验方法 | 第41-46页 |
| 4.3.1 Oxdc的制备与酶活力检测 | 第41-43页 |
| 4.3.2 EDTAD修饰草酸脱羧酶的单因素优化 | 第43页 |
| 4.3.3 修饰率和酶活回收率的测定 | 第43页 |
| 4.3.4 响应面优化分析 | 第43-44页 |
| 4.3.5 SDS-PAGE分析 | 第44页 |
| 4.3.6 超高效液相色谱-质谱联用（UPLC-MS）分析 | 第44页 |
| 4.3.7 修饰前后Oxdc的结构与催化特征分析 | 第44-45页 |
| 4.3.8 部分酶学性质比较 | 第45页 |
| 4.3.9 吸附实验 | 第45-46页 |
| 4.4 结果与讨论 | 第46-60页 |
| 4.4.1 Oxdc的诱导表达与纯化结果 | 第46页 |
| 4.4.2 EDTAD修饰Oxdc的单因素优化 | 第46-48页 |
| 4.4.3 响应面优化分析 | 第48-53页 |
| 4.4.4 SDS-PAGE分析 | 第53-54页 |
| 4.4.5 UPLC-MS分析 | 第54-56页 |
| 4.4.6 修饰前后Oxdc的结构与催化特征分析 | 第56-58页 |
| 4.4.7 部分酶学性质比较 | 第58-60页 |
| 4.4.8 吸附性能比较 | 第60页 |
| 4.5 小结 | 第60-62页 |
| 5 结论与展望 | 第62-64页 |
| 5.1 结论 | 第62页 |
| 5.2 展望 | 第62-64页 |
| 参考文献 | 第64-75页 |
| 致谢 | 第75-76页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第76页 |
