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单环刺螠硫醌氧化还原酶相互作用蛋白质的筛选

摘要第1-5页
Abstract第5-10页
第一章 前言第10-31页
 1 生物对硫化物耐受的研究概况第10-17页
   ·硫化物的毒性第11-12页
   ·真核生物对硫化物的耐受第12-17页
 2 硫醌氧化还原酶研究进展第17-20页
   ·SQR的细胞学定位第17-18页
   ·SQR催化最初产物为过硫化物第18页
   ·SQR酶活中心的保守氨基酸第18-19页
   ·SQR催化特性第19-20页
   ·硫化物利用、耐受与解毒第20页
 3 刺螠动物硫化物耐受的研究概况第20-22页
   ·美洲刺螠的硫化物耐受研究第21页
   ·单环刺螠硫化物耐受研究第21-22页
 4 蛋白质相互作用的研究方法第22-29页
   ·酵母双杂交技术及其应用第23-24页
   ·免疫共沉淀技术及其应用第24-26页
   ·Pull down技术及其应用第26-28页
   ·噬菌体展示技术及其应用第28页
   ·蛋白质芯片技术及其应用第28-29页
   ·荧光共振能量转移(FRET)技术及其应用第29页
 5 本论文研究的意义第29-31页
第二章 单环刺螠硫醌氧化还原酶的表达、纯化及复性第31-46页
 1 材料与方法第31-40页
   ·实验材料第31-33页
     ·菌株、载体第31-32页
     ·酶类、分子量标准及其它试剂第32页
     ·仪器设备第32-33页
   ·实验方法第33-40页
     ·pET28a(+)/SQR原核表达载体的构建第33-36页
     ·单环刺螠6His-SQR蛋白的体外原核表达第36-37页
     ·单环刺螠6His-SQR蛋白的纯化第37-39页
     ·单环刺螠6His-SQR蛋白的复性第39页
     ·对已复性的单环刺螠6His-SQR蛋白进行浓缩第39-40页
 2 结果第40-44页
   ·pET28a(+)/SQR原核表达载体的构建第40-41页
   ·pET28a(+)/SQR重组质粒转入大肠杆菌BL21(DE3)第41页
   ·单环刺螠6His-SQR蛋白的体外原核表达第41-42页
   ·单环刺螠6His-SQR蛋白的纯化第42-43页
   ·单环刺螠6His-SQR蛋白的复性第43-44页
 3 讨论第44-46页
第三章 单环刺螠硫醌氧化还原酶相互作用蛋白质的筛选第46-55页
 1 材料与方法第46-50页
   ·实验材料第47页
     ·实验动物第47页
     ·主要试剂的配制第47页
   ·实验方法第47-50页
     ·单环刺螠的硫化物处理和取样第47-48页
     ·Ni~(2+)-NTA树脂饱和结合单环刺螠6His-SQR蛋白第48-49页
     ·单环刺螠体壁组织细胞裂解液的制备第49页
     ·His-pulldown实验第49-50页
     ·毛细管液相色谱-离子肼质谱分析与单环刺螠6His-SQR互作的蛋白质第50页
 2 结果第50-53页
   ·单环刺螠6His-SQR互作蛋白质的筛选第50-52页
   ·单环刺螠6His-SQR互作蛋白的质谱分析第52-53页
 3 讨论第53-55页
结论第55-56页
参考文献第56-67页
附录第67-69页
致谢第69-70页
个人简历第70页
发表的学术论文第70页

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