| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 第一章 前言 | 第10-31页 |
| 1 生物对硫化物耐受的研究概况 | 第10-17页 |
| ·硫化物的毒性 | 第11-12页 |
| ·真核生物对硫化物的耐受 | 第12-17页 |
| 2 硫醌氧化还原酶研究进展 | 第17-20页 |
| ·SQR的细胞学定位 | 第17-18页 |
| ·SQR催化最初产物为过硫化物 | 第18页 |
| ·SQR酶活中心的保守氨基酸 | 第18-19页 |
| ·SQR催化特性 | 第19-20页 |
| ·硫化物利用、耐受与解毒 | 第20页 |
| 3 刺螠动物硫化物耐受的研究概况 | 第20-22页 |
| ·美洲刺螠的硫化物耐受研究 | 第21页 |
| ·单环刺螠硫化物耐受研究 | 第21-22页 |
| 4 蛋白质相互作用的研究方法 | 第22-29页 |
| ·酵母双杂交技术及其应用 | 第23-24页 |
| ·免疫共沉淀技术及其应用 | 第24-26页 |
| ·Pull down技术及其应用 | 第26-28页 |
| ·噬菌体展示技术及其应用 | 第28页 |
| ·蛋白质芯片技术及其应用 | 第28-29页 |
| ·荧光共振能量转移(FRET)技术及其应用 | 第29页 |
| 5 本论文研究的意义 | 第29-31页 |
| 第二章 单环刺螠硫醌氧化还原酶的表达、纯化及复性 | 第31-46页 |
| 1 材料与方法 | 第31-40页 |
| ·实验材料 | 第31-33页 |
| ·菌株、载体 | 第31-32页 |
| ·酶类、分子量标准及其它试剂 | 第32页 |
| ·仪器设备 | 第32-33页 |
| ·实验方法 | 第33-40页 |
| ·pET28a(+)/SQR原核表达载体的构建 | 第33-36页 |
| ·单环刺螠6His-SQR蛋白的体外原核表达 | 第36-37页 |
| ·单环刺螠6His-SQR蛋白的纯化 | 第37-39页 |
| ·单环刺螠6His-SQR蛋白的复性 | 第39页 |
| ·对已复性的单环刺螠6His-SQR蛋白进行浓缩 | 第39-40页 |
| 2 结果 | 第40-44页 |
| ·pET28a(+)/SQR原核表达载体的构建 | 第40-41页 |
| ·pET28a(+)/SQR重组质粒转入大肠杆菌BL21(DE3) | 第41页 |
| ·单环刺螠6His-SQR蛋白的体外原核表达 | 第41-42页 |
| ·单环刺螠6His-SQR蛋白的纯化 | 第42-43页 |
| ·单环刺螠6His-SQR蛋白的复性 | 第43-44页 |
| 3 讨论 | 第44-46页 |
| 第三章 单环刺螠硫醌氧化还原酶相互作用蛋白质的筛选 | 第46-55页 |
| 1 材料与方法 | 第46-50页 |
| ·实验材料 | 第47页 |
| ·实验动物 | 第47页 |
| ·主要试剂的配制 | 第47页 |
| ·实验方法 | 第47-50页 |
| ·单环刺螠的硫化物处理和取样 | 第47-48页 |
| ·Ni~(2+)-NTA树脂饱和结合单环刺螠6His-SQR蛋白 | 第48-49页 |
| ·单环刺螠体壁组织细胞裂解液的制备 | 第49页 |
| ·His-pulldown实验 | 第49-50页 |
| ·毛细管液相色谱-离子肼质谱分析与单环刺螠6His-SQR互作的蛋白质 | 第50页 |
| 2 结果 | 第50-53页 |
| ·单环刺螠6His-SQR互作蛋白质的筛选 | 第50-52页 |
| ·单环刺螠6His-SQR互作蛋白的质谱分析 | 第52-53页 |
| 3 讨论 | 第53-55页 |
| 结论 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-67页 |
| 附录 | 第67-69页 |
| 致谢 | 第69-70页 |
| 个人简历 | 第70页 |
| 发表的学术论文 | 第70页 |
