| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6页 |
| 第一章 绪论 | 第9-16页 |
| 1.1 综合毒性检测方法 | 第9-11页 |
| 1.1.1 鱼类 | 第9-10页 |
| 1.1.2 水蚤类 | 第10页 |
| 1.1.3 藻类 | 第10页 |
| 1.1.4 硝化细菌 | 第10页 |
| 1.1.5 发光细菌 | 第10-11页 |
| 1.2 发光细菌法检测水质综合毒性 | 第11-13页 |
| 1.2.1 概述 | 第11页 |
| 1.2.2 检测原理和操作 | 第11-12页 |
| 1.2.3 发光细菌法检测生物毒性的影响因素 | 第12-13页 |
| 1.3 发光细菌法的应用 | 第13页 |
| 1.4 青海弧菌简介 | 第13-15页 |
| 1.5 实验目的和思路 | 第15-16页 |
| 第二章 材料和方法 | 第16-21页 |
| 2.1 实验材料 | 第16页 |
| 2.1.1 菌株与质粒 | 第16页 |
| 2.1.2 引物 | 第16页 |
| 2.2 主要实验药品 | 第16-17页 |
| 2.3 主要实验仪器 | 第17-18页 |
| 2.4 方法 | 第18-21页 |
| 2.4.1 培养基配制 | 第18页 |
| 2.4.2 青海弧菌冻干粉复苏 | 第18页 |
| 2.4.3 青海弧菌Q67基因组DNA提取 | 第18-19页 |
| 2.4.4 引物设计 | 第19页 |
| 2.4.5 质粒提取 | 第19页 |
| 2.4.6 琼脂糖凝胶配制（以浓度为 1%为例） | 第19-21页 |
| 第三章 目的基因的克隆 | 第21-33页 |
| 3.1 青海弧菌Q67菌液准备 | 第21-26页 |
| 3.1.1 青海弧菌培养基配方选择 | 第21-25页 |
| 3.1.2 青海弧菌Q67性质测定 | 第25-26页 |
| 3.2 青海弧菌Q67基因组DNA提取 | 第26-27页 |
| 3.3 目的基因PCR | 第27-29页 |
| 3.3.1 luxAB PCR尝试 | 第27-28页 |
| 3.3.2 目的基因PCR | 第28-29页 |
| 3.4 目的基因PCR产物连接T载体 | 第29-31页 |
| 3.4.1 目的基因PCR产物琼脂糖凝胶回收 | 第29-30页 |
| 3.4.2 目的基因连接T载体并转化大肠杆菌DH5α | 第30-31页 |
| 3.5 本章小结 | 第31-33页 |
| 第四章 青海弧菌luxAB和luxCDABE基因在大肠杆菌中的表达 | 第33-38页 |
| 4.1 质粒提取 | 第33页 |
| 4.2 目的基因与载体连接并转化宿主菌 | 第33-36页 |
| 4.2.1 配制酶切体系 | 第33-34页 |
| 4.2.2 酶切产物琼脂糖凝胶电泳纯化 | 第34页 |
| 4.2.3 目的片段与载体连接 | 第34-35页 |
| 4.2.4 连接有目的基因的载体转化大肠杆菌BL21（DE3） | 第35-36页 |
| 4.3 重组菌生长曲线测定 | 第36-38页 |
| 第五章 重组菌的初步应用 | 第38-42页 |
| 5.1 重金属离子溶液配制 | 第38页 |
| 5.2 毒性测试 | 第38-42页 |
| 第六章 结论与展望 | 第42-44页 |
| 6.1 结论 | 第42页 |
| 6.2 展望 | 第42-44页 |
| 参考文献 | 第44-48页 |
| 发表论文和科研情况说明 | 第48-49页 |
| 致谢 | 第49-50页 |
| 附件1 luxAB和luxCDABE测序结果 | 第50-53页 |
