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面向病毒侵染机制研究的基于量子点的单颗粒示踪方法

摘要第9-11页
ABSTRACT第11-12页
第1章 绪论第13-45页
    1.1 单颗粒示踪技术第13-15页
    1.2 荧光标记物第15-18页
        1.2.1 荧光蛋白第15-16页
        1.2.2 有机荧光染料第16页
        1.2.3 量子点第16-18页
    1.3 成像装置第18-21页
        1.3.1 倒置荧光显微镜第19页
        1.3.2 全内反射荧光显微镜第19-20页
        1.3.3 共聚焦荧光显微镜第20-21页
    1.4 数据分析第21-26页
        1.4.1 颗粒定位第23-24页
        1.4.2 轨迹重建第24页
        1.4.3 轨迹分析第24-26页
    1.5 单颗粒示踪技术在生物领域的应用第26-33页
        1.5.1 细胞膜结构和功能研究第26-28页
        1.5.2 分子马达运输机制研究第28-29页
        1.5.3 染色质运动机制研究第29-30页
        1.5.4 病毒侵染机制研究第30-33页
    1.6 本文的选题背景及主要研究内容第33-34页
    参考文献第34-45页
第2章 基于量子点的单颗粒示踪方法的建立第45-89页
    2.1 引言第45页
    2.2 实验部分第45-51页
        2.2.1 试剂与仪器第45-46页
        2.2.2 溶液配制第46页
        2.2.3 细胞培养及病毒扩增第46-47页
        2.2.4 量子点及Cy3分别标记流感病毒的包膜第47页
        2.2.5 量子点与DiD同时标记流感病毒包膜第47页
        2.2.6 量子点与Syto 82分别标记流感病毒包膜和RNA第47页
        2.2.7 免疫荧光法标记流感病毒包膜蛋白血凝素第47-48页
        2.2.8 量子点标记麦胚凝集素第48页
        2.2.9 荧光标记A549细胞的细胞核、质膜、微丝及微管第48页
        2.2.10 抑制实验第48页
        2.2.11 共聚焦成像第48-49页
        2.2.12 图像处理第49页
        2.2.13 病毒滴度的测定第49-50页
        2.2.14 单颗粒三维图片的模拟第50页
        2.2.15 三维示踪精度评估第50页
        2.2.16 三维高斯非线性最小二乘拟合法第50页
        2.2.17 三维质心法第50-51页
    2.3 结果与讨论第51-81页
        2.3.1 单颗粒示踪成像平台的搭建第51-53页
        2.3.2 基于量子点的高效单病毒标记策略第53-59页
        2.3.3 维单颗粒示踪方法的建立第59-71页
        2.3.4 三维单颗粒示踪方法的建立第71-81页
    2.4 结论第81-82页
    参考文献第82-89页
第3章 利用基于量子点的单颗粒示踪技术研究禽流感病毒的侵染机制第89-119页
    3.1 引言第89页
    3.2 实验方法第89-90页
        3.2.1 试剂及仪器第89-90页
        3.2.2 荧光标记MDCK细胞的微丝、微管、Rab5及Rab7蛋白第90页
        3.2.3 药物抑制试验第90页
        3.2.4 图像处理第90页
    3.3 结果与讨论第90-112页
        3.3.1 流感病毒在单个细胞内的群体化侵染行为分析第90-93页
        3.3.2 流感病毒依赖于微管的运动行为分析第93-98页
        3.3.3 流感病毒在细胞内不同区域的运动行为分析第98-101页
        3.3.4 流感病毒侵染过程的五阶段分析第101-103页
        3.3.5 流感病毒在细胞核周围的运动行为分析第103-107页
        3.3.6 流感病毒与Rab5及Rab7蛋白相关的运动行为分析第107-112页
    3.4 结论第112-113页
    参考文献第113-119页
第4章 总结及展望第119-124页
    参考文献第121-124页
附录 作者攻读博士学位期间已发表及待发表的研究成果第124-128页
致谢第128页

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