摘要 | 第9-11页 |
ABSTRACT | 第11-12页 |
第1章 绪论 | 第13-45页 |
1.1 单颗粒示踪技术 | 第13-15页 |
1.2 荧光标记物 | 第15-18页 |
1.2.1 荧光蛋白 | 第15-16页 |
1.2.2 有机荧光染料 | 第16页 |
1.2.3 量子点 | 第16-18页 |
1.3 成像装置 | 第18-21页 |
1.3.1 倒置荧光显微镜 | 第19页 |
1.3.2 全内反射荧光显微镜 | 第19-20页 |
1.3.3 共聚焦荧光显微镜 | 第20-21页 |
1.4 数据分析 | 第21-26页 |
1.4.1 颗粒定位 | 第23-24页 |
1.4.2 轨迹重建 | 第24页 |
1.4.3 轨迹分析 | 第24-26页 |
1.5 单颗粒示踪技术在生物领域的应用 | 第26-33页 |
1.5.1 细胞膜结构和功能研究 | 第26-28页 |
1.5.2 分子马达运输机制研究 | 第28-29页 |
1.5.3 染色质运动机制研究 | 第29-30页 |
1.5.4 病毒侵染机制研究 | 第30-33页 |
1.6 本文的选题背景及主要研究内容 | 第33-34页 |
参考文献 | 第34-45页 |
第2章 基于量子点的单颗粒示踪方法的建立 | 第45-89页 |
2.1 引言 | 第45页 |
2.2 实验部分 | 第45-51页 |
2.2.1 试剂与仪器 | 第45-46页 |
2.2.2 溶液配制 | 第46页 |
2.2.3 细胞培养及病毒扩增 | 第46-47页 |
2.2.4 量子点及Cy3分别标记流感病毒的包膜 | 第47页 |
2.2.5 量子点与DiD同时标记流感病毒包膜 | 第47页 |
2.2.6 量子点与Syto 82分别标记流感病毒包膜和RNA | 第47页 |
2.2.7 免疫荧光法标记流感病毒包膜蛋白血凝素 | 第47-48页 |
2.2.8 量子点标记麦胚凝集素 | 第48页 |
2.2.9 荧光标记A549细胞的细胞核、质膜、微丝及微管 | 第48页 |
2.2.10 抑制实验 | 第48页 |
2.2.11 共聚焦成像 | 第48-49页 |
2.2.12 图像处理 | 第49页 |
2.2.13 病毒滴度的测定 | 第49-50页 |
2.2.14 单颗粒三维图片的模拟 | 第50页 |
2.2.15 三维示踪精度评估 | 第50页 |
2.2.16 三维高斯非线性最小二乘拟合法 | 第50页 |
2.2.17 三维质心法 | 第50-51页 |
2.3 结果与讨论 | 第51-81页 |
2.3.1 单颗粒示踪成像平台的搭建 | 第51-53页 |
2.3.2 基于量子点的高效单病毒标记策略 | 第53-59页 |
2.3.3 维单颗粒示踪方法的建立 | 第59-71页 |
2.3.4 三维单颗粒示踪方法的建立 | 第71-81页 |
2.4 结论 | 第81-82页 |
参考文献 | 第82-89页 |
第3章 利用基于量子点的单颗粒示踪技术研究禽流感病毒的侵染机制 | 第89-119页 |
3.1 引言 | 第89页 |
3.2 实验方法 | 第89-90页 |
3.2.1 试剂及仪器 | 第89-90页 |
3.2.2 荧光标记MDCK细胞的微丝、微管、Rab5及Rab7蛋白 | 第90页 |
3.2.3 药物抑制试验 | 第90页 |
3.2.4 图像处理 | 第90页 |
3.3 结果与讨论 | 第90-112页 |
3.3.1 流感病毒在单个细胞内的群体化侵染行为分析 | 第90-93页 |
3.3.2 流感病毒依赖于微管的运动行为分析 | 第93-98页 |
3.3.3 流感病毒在细胞内不同区域的运动行为分析 | 第98-101页 |
3.3.4 流感病毒侵染过程的五阶段分析 | 第101-103页 |
3.3.5 流感病毒在细胞核周围的运动行为分析 | 第103-107页 |
3.3.6 流感病毒与Rab5及Rab7蛋白相关的运动行为分析 | 第107-112页 |
3.4 结论 | 第112-113页 |
参考文献 | 第113-119页 |
第4章 总结及展望 | 第119-124页 |
参考文献 | 第121-124页 |
附录 作者攻读博士学位期间已发表及待发表的研究成果 | 第124-128页 |
致谢 | 第128页 |