| 摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 第一章 绪论 | 第13-29页 |
| 1.1 黄酮类化合物的酰化修饰 | 第13-15页 |
| 1.1.1 黄酮类化合物酰化的必要性 | 第13-15页 |
| 1.1.2 黄酮类化合物酰化的研究现状 | 第15页 |
| 1.2 全细胞催化技术的应用 | 第15-20页 |
| 1.2.1 全细胞催化 | 第15-16页 |
| 1.2.2 非水介质中全细胞催化的特点 | 第16页 |
| 1.2.3 全细胞催化的非水介质 | 第16-20页 |
| 1.2.3.1 无溶剂体系 | 第16-17页 |
| 1.2.3.2 有机溶剂体系 | 第17-18页 |
| 1.2.3.3 超临界流体和气体体系 | 第18页 |
| 1.2.3.4 离子液体体系 | 第18页 |
| 1.2.3.5 其他非水介质 | 第18-20页 |
| 1.3 微生物脂肪酶 | 第20-22页 |
| 1.3.1 微生物脂肪酶及其活性表征 | 第20-21页 |
| 1.3.2 产具有酰化活性脂肪酶的微生物来源 | 第21页 |
| 1.3.3 假单胞菌属的脂肪酶的研究进展 | 第21-22页 |
| 1.4 全细胞连接酶的研究 | 第22-27页 |
| 1.4.1 酶在全细胞中的定位 | 第22-26页 |
| 1.4.1.1 经细胞破碎的酶定位方法 | 第22-24页 |
| 1.4.1.2 未经细胞破碎的酶定位方法 | 第24-26页 |
| 1.4.2 全细胞连接酶在细胞中定位的研究进展 | 第26-27页 |
| 1.5 本研究的主要内容和意义 | 第27-29页 |
| 第二章 可催化黄酮酰化反应的施氏假单胞菌细胞连接脂肪酶的定位及活性研究 | 第29-44页 |
| 2.1 实验材料 | 第29-30页 |
| 2.1.1 菌种 | 第29页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第29-30页 |
| 2.2 主要仪器设备 | 第30页 |
| 2.3 实验方法 | 第30-33页 |
| 2.3.1 菌种培养及全细胞催化剂的制备 | 第30页 |
| 2.3.2 各细胞组分脂肪酶的制备 | 第30-31页 |
| 2.3.3 全细胞及其各组分催化秦皮甲素丙酰化的反应模型 | 第31页 |
| 2.3.4 高效液相色谱（HPLC）分析 | 第31页 |
| 2.3.5 反应初速度、产率和区域选择性的计算 | 第31-32页 |
| 2.3.5.1 初速度V_0值 | 第32页 |
| 2.3.5.2 产率Yield（%） | 第32页 |
| 2.3.5.3 区域选择性Regioselectivity（%） | 第32页 |
| 2.3.6 蛋白酶活力的测定 | 第32页 |
| 2.3.7 底物/产物在施氏假单胞菌细胞中运送机制的研究 | 第32-33页 |
| 2.4 结果与讨论 | 第33-42页 |
| 2.4.1 施氏假单胞菌各细胞组分粗脂肪酶的酰化活性 | 第33-35页 |
| 2.4.2 反应时间对各组分脂肪酶的催化活性的影响 | 第35-36页 |
| 2.4.3 培养时间对各组分脂肪酶的催化活性和蛋白酶的水解活性的影响 | 第36-38页 |
| 2.4.4 诱导剂种类对各组分脂肪酶的催化活性的影响 | 第38-39页 |
| 2.4.5 具有酰化活性的脂肪酶在施氏假单胞菌中的生产模型 | 第39-40页 |
| 2.4.6 施氏假单胞菌内底物/产物的运送机制 | 第40-42页 |
| 2.5 本章小结 | 第42-44页 |
| 第三章 非水介质中全细胞促曲克芦丁酰化的研究 | 第44-65页 |
| 3.1 实验材料 | 第45页 |
| 3.1.1 菌种 | 第45页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第45页 |
| 3.2 主要仪器设备 | 第45页 |
| 3.3 实验方法 | 第45-49页 |
| 3.3.1 菌种培养及全细胞催化剂的制备 | 第45-46页 |
| 3.3.2 不同微生物全细胞促曲克芦丁丙酰化反应 | 第46页 |
| 3.3.3 高效液相色谱（HPLC）分析 | 第46页 |
| 3.3.4 反应初速度、底物转化率、产率和区域选择性的计算 | 第46-47页 |
| 3.3.4.1 初速度V_0值 | 第46页 |
| 3.3.4.2 底物转化率Conversion（%） | 第46页 |
| 3.3.4.3 产率Yield（%） | 第46-47页 |
| 3.3.4.4 区域选择性Regioselectivity（%） | 第47页 |
| 3.3.5 产物分离纯化 | 第47页 |
| 3.3.6 有机溶剂种类对铜绿假单胞菌促曲克芦丁酰化的影响 | 第47页 |
| 3.3.7 含吡啶混合有机溶剂对铜绿假单胞菌促曲克芦丁酰化的影响 | 第47页 |
| 3.3.8 混合有机溶剂中疏水性溶剂浓度对铜绿假单胞菌促曲克芦丁酰化的影响 | 第47-48页 |
| 3.3.9 底物摩尔比对混合有机溶剂中铜绿假单胞菌促曲克芦丁酰化的影响 | 第48页 |
| 3.3.10 全细胞催化剂用量对铜绿假单胞菌促曲克芦丁酰化的影响 | 第48页 |
| 3.3.11 初始水含量对铜绿假单胞菌促曲克芦丁酰化的影响 | 第48页 |
| 3.3.12 反应温度对铜绿假单胞菌促曲克芦丁酰化的影响 | 第48-49页 |
| 3.3.13 反应时间对铜绿假单胞菌促曲克芦丁酰化的影响 | 第49页 |
| 3.4 结果与讨论 | 第49-63页 |
| 3.4.1 产物的结构鉴定 | 第49-53页 |
| 3.4.2 不同微生物全细胞在促曲克芦丁酰化反应中的催化行为 | 第53-55页 |
| 3.4.3 纯有机溶剂对铜绿假单胞菌促曲克芦丁酰化的影响 | 第55页 |
| 3.4.4 含吡啶混合有机溶剂对铜绿假单胞菌促曲克芦丁酰化的影响 | 第55-56页 |
| 3.4.5 混合有机溶剂中疏水性溶剂浓度对铜绿假单胞菌促曲克芦丁酰化的影响 | 第56-57页 |
| 3.4.6 底物摩尔比对铜绿假单胞菌促曲克芦丁酰化的影响 | 第57-59页 |
| 3.4.7 全细胞催化剂用量对铜绿假单胞菌促曲克芦丁酰化的影响 | 第59-60页 |
| 3.4.8 初始水含量对铜绿假单胞菌促曲克芦丁酰化的影响 | 第60-61页 |
| 3.4.9 反应温度对铜绿假单胞菌促曲克芦丁酰化的影响 | 第61-62页 |
| 3.4.10 反应时间对铜绿假单胞菌促曲克芦丁酰化的影响 | 第62-63页 |
| 3.5 本章小结 | 第63-65页 |
| 第四章 曲克芦丁酯的吸收特性及其抗氧化活性的研究 | 第65-80页 |
| 4.1 实验材料 | 第65-66页 |
| 4.2 主要仪器设备 | 第66页 |
| 4.3 实验方法 | 第66-69页 |
| 4.3.1 曲克芦丁及其单双酯对Caco-2 细胞的毒性作用 | 第66页 |
| 4.3.2 体外小肠（Caco-2 模型）模型的建立 | 第66-67页 |
| 4.3.3 细胞单层完整（紧密）性测定 | 第67-68页 |
| 4.3.3.1 跨上皮细胞电阻值的测定 | 第67页 |
| 4.3.3.2 荧光素钠渗漏检查 | 第67-68页 |
| 4.3.3.3 碱性磷酸酶（ALP）活性的测定 | 第68页 |
| 4.3.4 曲克芦丁及其单双酯的转运实验 | 第68页 |
| 4.3.5 AAPH 诱导红细胞溶血率的测定 | 第68-69页 |
| 4.3.6 体外清除自由基能力测定 | 第69页 |
| 4.3.6.1 清除·OH能力的测定 | 第69页 |
| 4.3.6.2 清除ABTS能力的测定 | 第69页 |
| 4.3.6.3 抗氧化能力的测定（ORAC） | 第69页 |
| 4.3.7 统计学处理 | 第69页 |
| 4.4 实验结果与讨论 | 第69-78页 |
| 4.4.1 曲克芦丁及其单双酯对Caco-2 细胞的毒性作用 | 第69-71页 |
| 4.4.2 Caco-2 细胞模型的建立 | 第71-72页 |
| 4.4.3 曲克芦丁及其单双酯在Caco-2 单层膜中的吸收效率 | 第72-73页 |
| 4.4.4 曲克芦丁及其单双酯对AAPH诱导的红细胞氧化溶血的抑制作用 | 第73-74页 |
| 4.4.5 曲克芦丁及其酯对羟自由基和ABTS自由基清除能力的比较分析 | 第74-75页 |
| 4.4.6 曲克芦丁及其酯ORAC法抗氧化能力的分析 | 第75-76页 |
| 4.4.7 曲克芦丁及其单双酯抗氧化机制的解析 | 第76-78页 |
| 4.5 本章小结 | 第78-80页 |
| 结论与展望 | 第80-83页 |
| 附录一 高效液相色谱图 | 第83-84页 |
| 附录二 核磁共振碳谱图 | 第84-87页 |
| 参考文献 | 第87-98页 |
| 攻读硕士学位期间取得的研究成果 | 第98-99页 |
| 致谢 | 第99-100页 |
| 附表 | 第100页 |
