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纳米SiO2颗粒对HepG2细胞的毒性及相关机制研究

摘要第4-7页
Abstract第7-10页
英文缩写第14-15页
第1章 绪论第15-31页
    1.1 纳米材料概述第15-16页
    1.2 纳米材料有害生物效应及潜在毒性第16-21页
        1.2.1 纳米材料毒性及安全性问题的提出第17页
        1.2.2 纳米材料毒性及安全性第17-21页
    1.3 纳米SiO_2的应用及毒性研究进展第21-25页
        1.3.1 纳米SiO_2的广泛应用第21-22页
        1.3.2 纳米SiO_2的毒性研究进展第22-25页
    1.4 细胞凋亡第25-31页
        1.4.1 细胞凋亡概述第25-26页
        1.4.2 凋亡通路第26-31页
第2章 材料与方法第31-43页
    2.1 试剂与仪器第31-33页
        2.1.1 主要试剂第31-32页
        2.1.2 主要器材第32页
        2.1.3 主要仪器第32-33页
    2.2 细胞株及细胞培养第33页
        2.2.1 细胞株第33页
        2.2.2 培养用液体配制第33页
        2.2.3 培养方法第33页
    2.3 纳米SiO_2颗粒的制备第33-34页
    2.4 纳米SiO_2颗粒表征第34页
        2.4.1 TEM观察颗粒粒径、形貌及分散性第34页
        2.4.2 动态光散射法检测颗粒水合粒径及粒径分布第34页
    2.5 荧光显微镜观察纳米颗粒细胞摄取第34页
    2.6 TEM观察纳米颗粒细胞摄取、分布及细胞形态改变第34-35页
    2.7 MTT法检测细胞存活率第35页
    2.8 倒置相差显微镜观察细胞形态改变第35-36页
    2.9 流式细胞术检测细胞内ROS的变化第36页
    2.10 流式细胞术检测细胞内Ca~(2+)的变化第36-37页
    2.11 线粒体膜电位的检测第37-38页
        2.11.1 激光共聚焦扫描显微镜检测线粒体膜电位第37页
        2.11.2 流式细胞术检测线粒体膜电位第37-38页
    2.12 流式细胞术检测细胞凋亡第38页
    2.13 western blot检测凋亡相关蛋白表达第38-41页
        2.13.1 试剂配制第38-39页
        2.13.2 蛋白提取和定量第39-40页
        2.13.3 western blot检测蛋白表达第40-41页
    2.14 统计学分析第41-43页
第3章 结果第43-67页
    3.1 纳米SiO_2颗粒的表征第43-46页
        3.1.1 TEM观察纳米SiO_2的粒径、形貌及分散性第43页
        3.1.2 纳米SiO_2颗粒在无血清DMEM中粒径随时间的变化第43-44页
        3.1.3 血清对纳米SiO_2颗粒在DMEM中粒径分布的影响第44-45页
        3.1.4 血清对纳米SiO_2颗粒在DMEM中粒径的影响第45-46页
    3.2 HepG2细胞对纳米SiO_2颗粒的摄取及颗粒在细胞内的分布第46-50页
        3.2.1 细胞对荧光纳米SiO_2颗粒的摄取第46-47页
        3.2.2 纳米SiO_2颗粒进入细胞的方式第47-48页
        3.2.3 纳米SiO_2颗粒在HepG2细胞内的分布第48-50页
    3.3 纳米SiO_2颗粒对细胞存活率的影响第50-51页
    3.4 纳米SiO_2颗粒对细胞形态的影响第51-53页
    3.5 纳米SiO_2对细胞内ROS的影响第53-54页
    3.6 纳米SiO_2颗粒对细胞内Ca~(2+)浓度的影响第54-55页
    3.7 纳米SiO_2颗粒对细胞线粒体膜电位的影响第55-57页
    3.8 纳米SiO_2颗粒对细胞凋亡的影响第57-61页
    3.9 纳米SiO_2颗粒对凋亡相关蛋白表达的影响第61-67页
        3.9.1 纳米SiO_2颗粒对凋亡线粒体通路相关蛋白表达的影响第61-63页
        3.9.2 纳米SiO_2颗粒对凋亡内质网通路相关蛋白表达的影响第63-65页
        3.9.3 纳米SiO_2颗粒对AIF蛋白表达的影响第65-67页
第4章 讨论第67-81页
    4.1 纳米SiO_2颗粒的表征及稳定性第67-69页
    4.2 纳米SiO_2颗粒对细胞的毒性作用第69-70页
    4.3 纳米SiO_2颗粒细胞摄取分布与细胞毒性的关系第70-72页
    4.4 纳米SiO_2颗粒细胞毒性相关机制第72-76页
    4.5 纳米SiO_2颗粒引起细胞凋亡的相关机制第76-81页
第5章 结论第81-83页
创新点第83-85页
参考文献第85-101页
作者简介及攻读博士期间取得的学术成果第101-103页
致谢第103页

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