| 中文摘要 | 第5-6页 |
| 英文摘要 | 第6页 |
| 1 前言 | 第8-16页 |
| 1．1 TGEV生物学性状 | 第8-9页 |
| 1．2 TGEV基因组结构及其表达方式 | 第9-10页 |
| 1．3 TGEV蛋白的结构与功能 | 第10-13页 |
| 1．3．1 非结构蛋白 | 第10-11页 |
| 1．3．2 结构蛋白 | 第11-13页 |
| 1．4 TGE的诊断 | 第13-15页 |
| 1．5 本课题研究的目的和意义 | 第15-16页 |
| 2 材料与方法 | 第16-26页 |
| 2．1 实验材料 | 第16-19页 |
| 2．1．1 病毒 | 第16页 |
| 2．1．2 质粒和菌株 | 第16页 |
| 2．1．3 引物 | 第16页 |
| 2．1．4 试剂 | 第16-18页 |
| 2．1．5 试验动物 | 第18页 |
| 2．1．6 试验主要仪器设备 | 第18-19页 |
| 2．2 实验方法 | 第19-26页 |
| 2．2．1 病毒核酸（RNA）提取 | 第19页 |
| 2．2．2 病毒基因组cDNA的合成 | 第19页 |
| 2．2．3 TGEV N基因的扩增 | 第19页 |
| 2．2．4 0．8％琼脂糖凝胶电泳检测PCR产物 | 第19-20页 |
| 2．2．5 TGEV N基因的纯化 | 第20页 |
| 2．2．6 TGEV N基因的克隆 | 第20-22页 |
| 2．2．7 TGEV N基因在原核系统中的表达 | 第22-23页 |
| 2．2．8 免疫印记（Western-blot）分析 | 第23页 |
| 2．2．9 融合蛋白的纯化 | 第23-24页 |
| 2．2．10 Western-blot分析 | 第24页 |
| 2．2．11 纯化后的融合蛋白含量测定 | 第24页 |
| 2．2．12 动物免疫 | 第24页 |
| 2．2．13 ELISA方法测定抗血清效价 | 第24-25页 |
| 2．2．14 中和试验以检测血清的中和抗体 | 第25-26页 |
| 3 实验结果 | 第26-41页 |
| 3．1 TGEV N基因的RT-PCR扩增结果 | 第26页 |
| 3．2 TGEV N基因的酶切鉴定结果 | 第26-27页 |
| 3．3 重组质粒PHN的酶切鉴定 | 第27页 |
| 3．4 融合蛋白诱导后的检测 | 第27-30页 |
| 3．4．1 SDS—PAGE结果 | 第27-28页 |
| 3．4．2 Western blot结果 | 第28页 |
| 3．4．3 重组蛋白PHN表达效率分析结果 | 第28-30页 |
| 3．5 融合蛋白纯化结果 | 第30页 |
| 3．6 纯化后的融合蛋白Western-blot检测结果 | 第30页 |
| 3．7 纯化后的融合蛋白含量测定结果 | 第30-31页 |
| 3．8 间接ELISA检测抗血清效价结果 | 第31-32页 |
| 3．9 中和实验结果 | 第32-34页 |
| 3．10 TGEV N基因的核苷酸序列与氨基酸序列分析 | 第34-41页 |
| 4 讨论 | 第41-43页 |
| 5 结论 | 第43-44页 |
| 致谢 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-49页 |
