| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 第一章 研究背景 | 第12-14页 |
| 第二章 材料与方法 | 第14-25页 |
| 2.1 主要实验试剂 | 第14-15页 |
| 2.2 主要实验仪器 | 第15-16页 |
| 2.3 实验操作 | 第16-24页 |
| 2.3.1 食管成纤维细胞分离及培养 | 第16-17页 |
| 2.3.1.1 原代细胞培养及纯化 | 第16-17页 |
| 2.3.2 Western Blot检测基因的表达 | 第17-20页 |
| 2.3.2.1 主要试剂制备 | 第17-18页 |
| 2.3.2.2 蛋白样品提取 | 第18页 |
| 2.3.2.3 BCA法蛋白定量 | 第18页 |
| 2.3.2.4 SDS-聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE)电泳 | 第18-20页 |
| 2.3.3 荧光定量RT-PCR实验 | 第20-22页 |
| 2.3.3.1 总RNA提取 | 第20页 |
| 2.3.3.2 反转录(RT) | 第20-21页 |
| 2.3.3.3 聚合酶链反应(PCR) | 第21-22页 |
| 2.3.4 细胞划痕实验 | 第22页 |
| 2.3.5 Transwell小室侵袭、迁移实验 | 第22-23页 |
| 2.3.5.1 Transwell侵袭实验 | 第22-23页 |
| 2.3.5.2 Transwell迁移实验 | 第23页 |
| 2.3.6 免疫组织化学 | 第23-24页 |
| 2.3.6.1 实验材料 | 第23页 |
| 2.3.6.2 免疫组化 | 第23-24页 |
| 2.4 统计分析 | 第24-25页 |
| 第三章 结果 | 第25-31页 |
| 3.1 IL-6处理后正常食管成纤维细胞中Twist1的表达 | 第25页 |
| 3.2 IL-6处理后正常食管成纤维细胞中Twist1,SMA和FAPα的表达 | 第25-26页 |
| 3.3 表达Twist1的食管成纤维细胞CM对食管癌细胞划痕愈合的作用 | 第26页 |
| 3.4 表达Twist1的食管成纤维细胞CM对食管癌细胞迁移侵袭能力的作用 | 第26-27页 |
| 3.5 食管鳞癌间质Twist1表达与癌相关成纤维细胞标志物的关系 | 第27-28页 |
| 3.6 食管鳞癌间质Twist1表达与其临床病理特征及患者生存率之间的关系 | 第28-31页 |
| 第四章 讨论 | 第31-35页 |
| 第五章 结论 | 第35-36页 |
| 参考文献 | 第36-40页 |
| 致谢 | 第40-41页 |
| 综述 | 第41-56页 |
| 参考文献 | 第51-56页 |
