| 中文摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 缩略语表 | 第11-13页 |
| 第一章 前言 | 第13-16页 |
| 第二章 CCT3在胃癌组织和胃癌细胞株中的表达 | 第16-28页 |
| 2.1 实验材料 | 第16-17页 |
| 2.1.1 实验试剂 | 第16-17页 |
| 2.1.2 实验器材 | 第17页 |
| 2.1.3 组织标本 | 第17页 |
| 2.1.4 细胞株 | 第17页 |
| 2.1.5 主要工作液配制 | 第17页 |
| 2.2 实验方法 | 第17-21页 |
| 2.2.1 临床组织病理切片的制备 | 第17-18页 |
| 2.2.2 组织标本免疫组化染色 | 第18页 |
| 2.2.3 细胞培养 | 第18-19页 |
| 2.2.4 胃癌细胞株及人胃粘膜上皮细胞株中CCT3基因qRT-PCR检测 | 第19-20页 |
| 2.2.5 统计学方法 | 第20-21页 |
| 2.3 结果 | 第21-23页 |
| 2.3.1 CCT3基因在TCGA数据库表达分析 | 第21页 |
| 2.3.2 胃癌组织中CCT3蛋白的表达高于癌旁组织 | 第21-22页 |
| 2.3.3 胃癌细胞株及人胃粘膜上皮细胞株中CCT3基因的表达 | 第22-23页 |
| 2.4 讨论 | 第23-28页 |
| 第三章 靶向沉默CCT3基因对胃癌细胞功能的影响 | 第28-49页 |
| 3.1 实验材料 | 第28-32页 |
| 3.1.1 实验质粒 | 第28页 |
| 3.1.2 实验菌株TOP10 | 第28页 |
| 3.1.3 细胞株 | 第28-29页 |
| 3.1.4 实验试剂 | 第29-30页 |
| 3.1.5 实验器材 | 第30-31页 |
| 3.1.6 主要工作液配制 | 第31-32页 |
| 3.2 实验方法 | 第32-37页 |
| 3.2.1 总体实验流程 | 第32页 |
| 3.2.2 细胞培养 | 第32页 |
| 3.2.3 CCT3基因RNAi慢病毒载体制备 | 第32-33页 |
| 3.2.4 CCT3基因RNAi慢病毒包装 | 第33-34页 |
| 3.2.5 CCT3基因RNAi慢病毒感染胃癌细胞株 | 第34-35页 |
| 3.2.6 qRT-PCR检测CCT3基因mRNA水平的沉默效率 | 第35页 |
| 3.2.7 Western blot检测CCT3基因蛋白水平的沉默效率 | 第35页 |
| 3.2.8 Cellomics细胞计数检测 | 第35-36页 |
| 3.2.9 MTT细胞活力检测 | 第36页 |
| 3.2.10 克隆形成检测 | 第36页 |
| 3.2.11 细胞凋亡检测 | 第36-37页 |
| 3.2.12 统计学方法 | 第37页 |
| 3.3 结果 | 第37-44页 |
| 3.3.1 慢病毒感染效率 | 第37页 |
| 3.3.2 CCT3-shRNA-LV感染后沉默CCT3基因 | 第37-40页 |
| 3.3.3 RNAi沉默CCT3基因对胃癌细胞增殖的影响 | 第40-42页 |
| 3.3.4 RNAi沉默CCT3基因对胃癌细胞活性的影响 | 第42-43页 |
| 3.3.5 RNAi沉默CCT3基因对胃癌细胞克隆的影响 | 第43-44页 |
| 3.3.6 RNAi沉默CCT3基因对胃癌细胞凋亡的影响 | 第44页 |
| 3.4 讨论 | 第44-49页 |
| 第四章 CCT3基因沉默后对胃癌细胞裸鼠成瘤的影响 | 第49-64页 |
| 4.1 实验材料 | 第49-50页 |
| 4.1.1 试剂 | 第49页 |
| 4.1.2 实验器材 | 第49页 |
| 4.1.3 细胞株 | 第49页 |
| 4.1.4 实验动物 | 第49-50页 |
| 4.2 实验方法 | 第50-51页 |
| 4.2.1 实验流程 | 第50页 |
| 4.2.2 细胞培养 | 第50页 |
| 4.2.3 CCT3基因RNAi慢病毒感染胃癌BGC-823 细胞 | 第50页 |
| 4.2.4 皮下接种 | 第50-51页 |
| 4.2.5 检测成瘤情况 | 第51页 |
| 4.2.6 统计学方法 | 第51页 |
| 4.3 结果 | 第51-61页 |
| 4.3.1 慢病毒感染BGC-823 细胞的效率 | 第51-53页 |
| 4.3.2 沉默CCT3后对裸鼠成瘤的影响 | 第53-58页 |
| 4.3.3 活体小动物成像 | 第58-61页 |
| 4.4 讨论 | 第61-64页 |
| 第五章 CCT3基因对胃癌发生发展影响的机制探索 | 第64-88页 |
| 5.1 实验材料 | 第64-65页 |
| 5.1.1 芯片信息 | 第64页 |
| 5.1.2 实验器材 | 第64-65页 |
| 5.1.3 实验试剂 | 第65页 |
| 5.1.4 细胞株 | 第65页 |
| 5.1.5 实验主要工作液配制 | 第65页 |
| 5.2 实验方法 | 第65-68页 |
| 5.2.1 实验流程 | 第65-66页 |
| 5.2.2 样品细胞总RNA抽提和质检 | 第66页 |
| 5.2.3 IVT反应获得片段化aRNA | 第66页 |
| 5.2.4 芯片杂交洗染、扫描 | 第66-67页 |
| 5.2.5 差异表达基因qRT-PCR和Western blot检测验证 | 第67页 |
| 5.2.6 PathScan? Antibody Array检测 | 第67-68页 |
| 5.2.7 统计学方法 | 第68页 |
| 5.3 结果 | 第68-81页 |
| 5.3.1 RNA质检结果 | 第68-69页 |
| 5.3.2 芯片数据质控 | 第69-72页 |
| 5.3.3 Affymetrix芯片数据结果 | 第72-74页 |
| 5.3.4 生物信息分析 | 第74-77页 |
| 5.3.5 差异表达基因qRT-PCR和Western blot检测验证结果 | 第77-80页 |
| 5.3.6 PathScan? Antibody Array检测结果 | 第80-81页 |
| 5.4 讨论 | 第81-88页 |
| 第六章 结论 | 第88-89页 |
| 参考文献 | 第89-96页 |
| 综述一 CCT3与肿瘤的关系及研究现状 | 第96-108页 |
| 参考文献 | 第104-108页 |
| 综述二 肿瘤微环境与免疫 | 第108-131页 |
| 参考文献 | 第122-131页 |
| 在学期间的研究成果 | 第131-132页 |
| 附件 | 第132-134页 |
| 致谢 | 第134页 |
