| 中文摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 第一章 绪论 | 第13-28页 |
| 1.1 植物遗传转化技术 | 第13-16页 |
| 1.1.1 农杆菌介导法 | 第13-14页 |
| 1.1.2 花粉管通道法 | 第14-15页 |
| 1.1.3 基因枪法 | 第15页 |
| 1.1.4 其他转化方法 | 第15-16页 |
| 1.2 大豆遗传转化的再生系统 | 第16-18页 |
| 1.2.1 大豆体细胞胚发生途径 | 第16-17页 |
| 1.2.2 原生质体发生途径 | 第17页 |
| 1.2.3 不定芽器官发生途径 | 第17-18页 |
| 1.3 影响农杆菌介导遗传转化的主要因素 | 第18-21页 |
| 1.3.1 大豆基因型 | 第19页 |
| 1.3.2 农杆菌菌株 | 第19-20页 |
| 1.3.3 侵染及共培养的添加剂 | 第20-21页 |
| 1.3.4 筛选剂和标记基因 | 第21页 |
| 1.4 大豆异黄酮的研究概述 | 第21-27页 |
| 1.4.1 异黄酮的结构和性质 | 第22页 |
| 1.4.2 异黄酮的生理功能 | 第22-24页 |
| 1.4.3 异黄酮的生物合成 | 第24-25页 |
| 1.4.4 异黄酮相关合成酶基因的研究 | 第25-27页 |
| 1.4.5 大豆异黄酮的前景与展望 | 第27页 |
| 1.5 研究目的和意义 | 第27-28页 |
| 第二章 大豆子叶节遗传转化体系的优化 | 第28-42页 |
| 2.1 材料 | 第28-30页 |
| 2.1.1 基因材料和植物材料 | 第28页 |
| 2.1.2 农杆菌菌种 | 第28页 |
| 2.1.3 培养过程相关培养基 | 第28页 |
| 2.1.4 激素和生化试剂 | 第28-29页 |
| 2.1.5 用仪器设备 | 第29-30页 |
| 2.2 方法 | 第30-33页 |
| 2.2.1 大豆种子的灭菌消毒与萌发方式 | 第30页 |
| 2.2.2 农杆菌的制备及侵染 | 第30-31页 |
| 2.2.3 不同划伤方式侵染的 GUS 瞬时表达影响 | 第31-32页 |
| 2.2.4 共培养阶段外植体摆放方式对芽诱导的影响 | 第32页 |
| 2.2.5 天冬酰胺、谷氨酰胺和三十烷醇对子叶节芽伸长的影响 | 第32-33页 |
| 2.2.6 生根培养与炼苗移栽 | 第33页 |
| 2.3 结果与分析 | 第33-40页 |
| 2.3.1 大豆不同萌发方式对芽诱导的影响 | 第33-34页 |
| 2.3.2 不同划伤方式侵染的 GUS 瞬时表达影响 | 第34-36页 |
| 2.3.3 共培养阶段外植体摆放方式对芽诱导的影响 | 第36-37页 |
| 2.3.4 Asn、Gln 浓度对子叶节芽伸长的影响 | 第37-38页 |
| 2.3.5 TRIA 浓度对子叶节芽伸长的影响 | 第38-39页 |
| 2.3.6 生根培养时母液配比与添加 IBA 对生根的影响 | 第39-40页 |
| 2.4 优化后的大豆子叶节遗传转化体系的流程 | 第40-41页 |
| 2.5 本章小结 | 第41-42页 |
| 第三章 转大豆异黄酮相关合成酶基因阳性植株的鉴定 | 第42-52页 |
| 3.1 材料与方法 | 第42-47页 |
| 3.1.1 主要仪器 | 第42页 |
| 3.1.2 IFS2、CHS8 和 CHIⅡ基因的遗传转化 | 第42-43页 |
| 3.1.3 转基因植株的 PCR 检测 | 第43-44页 |
| 3.1.4 转基因植株的 Basta 叶片涂抹检测 | 第44页 |
| 3.1.5 转基因植株的 bar 试纸条检测 | 第44-45页 |
| 3.1.6 转基因植株的 western blot 检测 | 第45-47页 |
| 3.2 结果与分析 | 第47-51页 |
| 3.2.1 IFS2、CHS8 和 CHIⅡ基因扩增产物分析 | 第47页 |
| 3.2.2 转基因植株的 PCR 检测 | 第47-49页 |
| 3.2.3 转基因植株的 Basta 叶片涂抹检测 | 第49-50页 |
| 3.2.4 转基因植株的 bar 试纸条检测 | 第50-51页 |
| 3.2.5 转基因植株的 Western blot 检测 | 第51页 |
| 3.3 本章小结 | 第51-52页 |
| 第四章 转基因大豆异黄酮含量的测定 | 第52-60页 |
| 4.1 仪器与试剂 | 第52页 |
| 4.1.1 主要仪器 | 第52页 |
| 4.1.2 主要试剂 | 第52页 |
| 4.2 材料与方法 | 第52-53页 |
| 4.2.1 主要材料 | 第52-53页 |
| 4.2.2 标准品的配制 | 第53页 |
| 4.2.3 色谱柱条件的选择 | 第53页 |
| 4.2.4 样品异黄酮提取液的制备 | 第53页 |
| 4.2.5 数据采集分析 | 第53页 |
| 4.3 结果与分析 | 第53-58页 |
| 4.3.1 标准曲线的绘制 | 第53-54页 |
| 4.3.2 相同品种间转不同酶基因的异黄酮含量分析 | 第54-57页 |
| 4.3.3 不同品种间转相同酶基因的异黄酮含量分析 | 第57-58页 |
| 4.4 本章小结 | 第58页 |
| 4.5 讨论 | 第58-60页 |
| 结论 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-73页 |
| 作者简介 | 第73-74页 |
| 致谢 | 第74页 |
