中文摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
主要英文词缩写表 | 第10-11页 |
第1章 引言 | 第11-12页 |
第2章 文献综述 | 第12-16页 |
2.1 肿瘤细胞的多药耐药性 | 第12页 |
2.2 中药协同化疗药物抗肿瘤作用的机制 | 第12-16页 |
2.2.1 诱导细胞凋亡 | 第13页 |
2.2.2 抑制细胞周期 | 第13页 |
2.2.3 逆转肿瘤细胞中多药耐药基因 P-gp 的表达 | 第13-14页 |
2.2.4 拮抗钙离子通道,增加细胞内药物浓度 | 第14页 |
2.2.5 抑制 ABCB1 的药物转运功能,减少药物排出 | 第14页 |
2.2.6 降低谷胱甘肽 S-转移酶活性,减少细胞内药物代谢 | 第14-15页 |
2.2.7 抑制 DNA 损伤修复相关蛋白的表达 | 第15页 |
2.2.8 增加细胞内活性氧的产生 | 第15-16页 |
第3章 研究内容 | 第16-25页 |
3.1 材料 | 第16-19页 |
3.1.1 实验用细胞株 | 第16页 |
3.1.2 主要实验仪器 | 第16-17页 |
3.1.3 实验试剂 | 第17-18页 |
3.1.3.1 实验用药物 | 第17页 |
3.1.3.2 细胞培养相关试剂 | 第17页 |
3.1.3.3 Annexin V-FITC/PI 双染凋亡检测试剂盒 | 第17页 |
3.1.3.4 Western-blot相关试剂 | 第17-18页 |
3.1.3.5 其他相关试剂 | 第18页 |
3.1.4 主要试剂的配制方法 | 第18-19页 |
3.2 实验方法 | 第19-24页 |
3.2.1 细胞培养 | 第19-20页 |
3.2.1.1 细胞复苏及换液 | 第19页 |
3.2.1.2 细胞换液 | 第19页 |
3.2.1.3 细胞传代 | 第19页 |
3.2.1.4 细胞冻存 | 第19-20页 |
3.2.2 MTT法检测Skov3细胞的增殖活性 | 第20页 |
3.2.3 DHE染色检测活性氧 | 第20-21页 |
3.2.4 流式细胞术检测活性氧 | 第21页 |
3.2.5 Annexin V-FITC/PI 双染检测细胞凋亡 | 第21页 |
3.2.6 PI单染检测细胞周期 | 第21-22页 |
3.2.7 Western blot检测β-actin、CDK4、P53、CyclinB1蛋白的表达 | 第22-24页 |
3.2.7.1 提取样本总蛋白 | 第22页 |
3.2.7.2 蛋白定量 | 第22页 |
3.2.7.3 配置聚丙烯酰胺凝胶 | 第22-23页 |
3.2.7.4 SDS-PAGE 电泳 | 第23页 |
3.2.7.5 免疫印迹杂交 | 第23页 |
3.2.7.6 脱脂牛奶封闭 | 第23页 |
3.2.7.7 抗体孵育 | 第23-24页 |
3.2.7.8 显色 | 第24页 |
3.3 统计学分析 | 第24-25页 |
第4章 实验结果 | 第25-37页 |
4.1 五味子脂A增强紫杉醇抑瘤作用 | 第25-31页 |
4.1.1 MTT 法检测联合用药对 Skov3 细胞增殖的抑制作用 | 第25页 |
4.1.2 五味子脂A下调紫杉醇处理后Skov3细胞中的ROS | 第25-27页 |
4.1.2.1 DHE染色检测活性氧 | 第25-26页 |
4.1.2.2 流式细胞术检测GA联合PTX作用于Skov3后细胞内活性氧 | 第26-27页 |
4.1.3 流式细胞术检测联合用药后 Skov3 细胞的凋亡百分率 | 第27-28页 |
4.1.4 流式细胞术检测 GA 与 PTX 联合用药后对 Skov3 细胞周期的影响 | 第28-29页 |
4.1.5 Western Blot 方法检测联合用药后 Skov3 细胞中周期相关蛋白的表达 | 第29-31页 |
4.2 抗氧化剂NAC增强紫杉醇抑瘤作用的研究 | 第31-37页 |
4.2.1 MTT 法检测 NAC 联合 PTX 作用于 Skov3 后对细胞增殖的抑制作用 | 第31页 |
4.2.2 NAC 下调紫杉醇处理后 Skov3 细胞中的 ROS | 第31-33页 |
4.2.2.1 DHE 染色检测活性氧 | 第31-32页 |
4.2.2.2 流式细胞术检测活性氧 | 第32-33页 |
4.2.3 流式细胞术检测 NAC 与 PTX 联合用药后 Skov3 细胞的凋亡百分率 | 第33-34页 |
4.2.4 流式细胞术检测 NAC 与 PTX 联合用药对 Skov3 细胞周期的影响 | 第34-35页 |
4.2.5 Western Blot 方法检测联合用药后 Skov3 细胞中周期相关蛋白的表达 | 第35-37页 |
第5章 讨论 | 第37-42页 |
5.1 五味子脂A联合紫杉醇抑制Skov3细胞的增殖 | 第37-38页 |
5.2 五味子脂 A 联合紫杉醇诱导卵巢癌 Skov3 细胞内活性氧的改变 | 第38-39页 |
5.3 五味子脂 A 与紫杉醇联合应用对卵巢癌 Skov3 细胞凋亡的影响 | 第39页 |
5.4 五味子脂 A 与紫杉醇联合应用后对卵巢癌 Skov3 细胞周期的影响 | 第39-40页 |
5.5 五味子脂 A 与紫杉醇联合应用后对卵巢癌 Skov3 细胞周期影响的分子机制 | 第40-42页 |
第6章 结论 | 第42-43页 |
参考文献 | 第43-47页 |
作者简介及在学期间所取得的科研成果 | 第47-48页 |
致谢 | 第48页 |