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基于RNA-seq的玉米CMS-C花药可变剪接和新转录本的分析

摘要第4-6页
Abstract第6-7页
1 文献综述第10-20页
    1.1 植物CMS的生理生化研究第10-11页
    1.2 植物CMS败育机制的研究第11-13页
        1.2.1 线粒体与CMS第12-13页
        1.2.2 核质互作与CMS第13页
    1.3 高通量测序技术第13-15页
    1.4 可变剪接第15-19页
        1.4.1 可变剪接类型第15-16页
        1.4.2 可变剪接的调控第16-17页
        1.4.3 可变剪接的生物学意义第17-18页
        1.4.4 可变剪接的序列保守性和相邻内含子外显子长度第18-19页
    1.5 新转录本第19-20页
2 研究的目的意义与技术路线第20-21页
    2.1 目的意义第20页
    2.2 技术路线第20-21页
3 材料与方法第21-34页
    3.1 材料第21页
    3.2 方法第21-22页
        3.2.1 Illumina/Solexa技术测序流程第21-22页
        3.2.2 数据过滤及与参考序列比对第22页
    3.3 基因表达量及差异表达基因的鉴定第22-23页
    3.4 可变剪接分析第23-28页
        3.4.1 可变剪接位点第24-27页
        3.4.2 可变剪接事件分析第27页
        3.4.3 剪接位点序列保守性分析第27页
        3.4.4 可变剪接外显子长度分析第27-28页
    3.5 候选基因分析第28页
    3.6 新转录本分析第28-29页
        3.6.1 新转录本鉴定及组装第28-29页
        3.6.2 新转录本的功能注释第29页
    3.7 RT-PCR验证可变剪接和新转录本第29-34页
        3.7.1 DNA的提取第29-30页
        3.7.2 总RNA的提取第30-31页
        3.7.3 cDNA第一链的合成第31页
        3.7.4 RT-PCR验证可变剪接事件第31-33页
        3.7.5 RT-PCR验证新转录本第33页
        3.7.6 RT-PCR验证花粉发育相关基因的剪接异构体第33-34页
4 结果与分析第34-54页
    4.1 DNA的检测第34页
    4.2 RNA的检测第34-35页
    4.3 cDNA的检测第35-36页
    4.4 可变剪接事件分析第36-37页
    4.5 可变剪接的验证第37-39页
        4.5.1 内含子保留型第38页
        4.5.2 外显子跳跃型第38-39页
    4.6 剪接位点序列保守性第39-42页
    4.7 可变剪接外显子长度第42-43页
    4.8 候选基因的分析及验证第43-49页
        4.8.1 候选基因的分析第43-46页
        4.8.2 候选基因的验证第46-49页
    4.9 新转录本分析及验证第49-54页
        4.9.1 新转录本的分析第49-52页
        4.9.2 新转录本的验证第52-54页
5 讨论第54-59页
    5.1 可变剪接机制的推测第54-55页
    5.2 全基因组可变剪接的研究方法第55-57页
    5.3 新转录本的预测第57-59页
参考文献第59-65页
致谢第65-66页
附录第66-69页

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