| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 符号说明 | 第9-13页 |
| 1 文献综述 | 第13-23页 |
| 1.1 器官移植面临问题及解决途径 | 第13-15页 |
| 1.1.1 人类器官移植取得成就和面临的问题 | 第13页 |
| 1.1.2 人类同种器官短缺解决途径 | 第13-15页 |
| 1.2 异种器官移植研究概况 | 第15-18页 |
| 1.2.1 异种器官移植研究历史进程 | 第15-16页 |
| 1.2.2 异种器官移植需要跨越的障碍及对策 | 第16-18页 |
| 1.3 转人补体调控蛋白基因克服超急性排斥研究进展 | 第18-20页 |
| 1.3.1 补体调节蛋白调控补体激活机制 | 第18-19页 |
| 1.3.2 CD46研究进展 | 第19页 |
| 1.3.3 CD46转基因猪研究进展 | 第19-20页 |
| 1.4 体细胞克隆技术 | 第20-21页 |
| 1.4.1 克隆技术研究进展 | 第20页 |
| 1.4.2 体细胞核移植技术研究 | 第20-21页 |
| 1.5 五指山小型猪概况 | 第21-23页 |
| 2 研究内容及目的意义 | 第23-24页 |
| 3 材料与方法 | 第24-37页 |
| 3.1 试验材料 | 第24-28页 |
| 3.1.1 动物材料 | 第24页 |
| 3.1.2 主要试验耗材 | 第24-25页 |
| 3.1.3 药品及试剂配制 | 第25-27页 |
| 3.1.4 生物化学试剂配制 | 第27-28页 |
| 3.2 主要仪器设备 | 第28-29页 |
| 3.3 试验方法 | 第29-37页 |
| 3.3.1 供核细胞系的建立和培养 | 第29-30页 |
| 3.3.2 供核细胞系的传代与冻存 | 第30页 |
| 3.3.3 hCD46微小基因表达载体的构建 | 第30-31页 |
| 3.3.4 hCD46微小基因载体的体外验证以及供核细胞的转染 | 第31-32页 |
| 3.3.5 供核细胞转染hCD46表达载体后的筛选及鉴定 | 第32页 |
| 3.3.6 体细胞核移植供核细胞的准备 | 第32页 |
| 3.3.7 卵母细胞的获得及体外成熟 | 第32页 |
| 3.3.8 体细胞核移植、重构胚激活与培养 | 第32-33页 |
| 3.3.9 重构胚的体外培养和胚胎移植 | 第33页 |
| 3.3.10 转基因猪的出生,采样和细胞系建立 | 第33页 |
| 3.3.11 转基因猪的鉴定 | 第33-35页 |
| 3.3.12 克隆猪转基因的体外功能验证 | 第35-37页 |
| 4 结果与分析 | 第37-43页 |
| 4.1 hCD46微小基因表达载体的构建结果 | 第37页 |
| 4.2 载体体外验证及转染筛选结果 | 第37页 |
| 4.3 转基因克隆猪的初步鉴定结果 | 第37-39页 |
| 4.4 转基因克隆猪蛋白水平鉴定结果 | 第39-41页 |
| 4.4.1 转基因猪免疫组织化学分析 | 第39-41页 |
| 4.4.2 转基因猪细胞系hCD46表达的流式分析结果 | 第41页 |
| 4.5 hCD46对宿主细胞的抗补体裂解保护作用 | 第41-43页 |
| 5 讨论 | 第43-46页 |
| 5.1 hCD46转基因策略的选择 | 第43页 |
| 5.2 影响转基因猪生产效率的因素 | 第43-44页 |
| 5.3 转基因猪体内转基因的表达分布 | 第44页 |
| 5.4 影响细胞裂解反应试验结果因素 | 第44-45页 |
| 5.5 影响转基因表达量的因素 | 第45-46页 |
| 6 结论 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-53页 |
| 致谢 | 第53-54页 |
| 攻读硕士期间发表学术论文 | 第54页 |
