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玉米大斑病菌HOG-MAPK级联途径中StPBS2基因的结构分析及功能研究

摘要第4-6页
Abstract第6-7页
缩写词表第8-12页
1 引言第12-15页
    1.1 植物病原真菌中的 MAPK 信号转导途径第12-13页
    1.2 模式生物酿酒酵母中 HOG-MAPK 级联途径及其功能第13页
    1.3 基因功能的研究方法第13-14页
    1.4 本研究的目的及意义第14-15页
2 材料和方法第15-21页
    2.1 供试菌株和质粒第15页
    2.2 供试培养基第15页
    2.3 供试试剂第15页
    2.4 主要仪器第15-16页
    2.5 基因结构的生物信息学分析第16页
    2.6 玉米大斑病菌 StPBS2 基因 RNAi 转化子的验证第16-17页
        2.6.1 引物的设计第16-17页
        2.6.2 总 RNA 提取第17页
        2.6.3 cDNA 第一链的合成第17页
        2.6.4 荧光定量 PCR 检测第17页
    2.7 玉米大斑病菌 StPBS2 基因 RNAi 转化子的分析第17-21页
        2.7.1 菌落形态的观察及生长速率的测定第17-18页
        2.7.2 菌丝形态的光学显微观察及孢子产量的测定第18页
        2.7.3 菌丝形态的扫描电镜观察第18页
        2.7.4 菌丝形态的透射电镜观察第18-19页
        2.7.5 对细胞壁合成干扰物质的敏感性分析第19页
        2.7.6 对高渗胁迫的敏感性分析第19页
        2.7.8 氧胁迫的敏感性分析第19页
        2.7.9 杀菌剂作用的半致死浓度的测定第19页
        2.7.10 对杀菌剂的敏感性测定第19-20页
        2.7.11 菌株红色次生代谢物的测定第20页
        2.7.12 外源碳源对菌株红色次生代谢物产生的影响的测定第20-21页
3 结果与分析第21-37页
    3.1 StPBS2 基因的生物信息学分析第21-24页
        3.1.1 在基因组中的定位第21页
        3.1.2 基因结构分析第21页
        3.1.3 蛋白质的理化性质预测第21页
        3.1.4 蛋白质的二级结构预测第21-22页
        3.1.5 预测蛋白的保守域及功能位点分析第22页
        3.1.6 预测蛋白质的三级结构预测第22-23页
        3.1.7 系统发育分析第23-24页
    3.2 RNAi 转化子的验证第24页
    3.3 StPBS2 基因对病菌生长发育的影响第24-26页
        3.3.1 转化子菌落形态的观察第24-25页
        3.3.2 转化子生长速率的测定第25页
        3.3.3 转化子菌丝形态的光学显微观察第25-26页
        3.3.4 转化子产孢量的测定第26页
    3.4 StPBS2 基因对病菌细胞壁发育的调控作用第26-28页
        3.4.1 转化子菌丝细胞壁的透射电镜观察第26-27页
        3.4.2 转化子对细胞壁合成干扰物质的敏感性测定第27-28页
    3.5 StPBS2 基因对病菌高渗胁迫反应的影响第28-32页
        3.5.1 转化子在高渗胁迫下菌落生长速率的测定第28-31页
        3.5.2 转化子在高渗胁迫下的菌丝形态观察第31-32页
    3.6 StPBS2 基因对病菌氧胁迫反应的调控作用第32页
    3.7 StPBS2 基因对病菌抗杀菌剂能力的影响第32-33页
    3.8 StPBS2 基因对病菌红色分泌物产生的影响第33-37页
        3.8.1 转化子红色分泌物的光学显微及扫描电镜观察第33-34页
        3.8.2 红色分泌物的 HPLC 分析第34-35页
        3.8.3 转化子红色次生代谢物的产生与碳源的关系第35-37页
4 讨论第37-39页
    4.1 RNAi 技术在植物病原真菌基因功能研究中的应用第37页
    4.2 植物病原真菌中 PBS2 基因的研究现状第37-39页
5 结论第39-40页
参考文献第40-45页
在读期间发表的学术论文第45-46页
作者简历第46-47页
致谢第47-48页

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