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稀有鮈鲫ER基因的克隆及内分泌干扰物对其表达的影响

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-11页
第一章 文献综述第11-22页
   ·前言第11页
   ·雌激素受体(ER)的研究进展第11-17页
     ·雌激素受体的概述第11-12页
     ·雌激素受体的分类第12页
     ·雌激素受体的结构与功能第12-14页
     ·雌激素受体的作用机制第14-16页
     ·雌激素受体在硬骨鱼类中的表达模式第16-17页
   ·内分泌干扰物(EDCs)的危害及其与雌激素受体的关系第17-19页
     ·EDCs 的概述第17页
     ·EDCs 的危害第17-18页
     ·EDCs 与 ER 的关系第18页
     ·EDCs 对鱼类的影响第18-19页
     ·EDCs 的检测与筛选方法第19页
   ·实验材料的选择第19-21页
     ·EDCs 的选择第19-20页
     ·实验动物的选择第20-21页
   ·本文研究的目的和意义第21-22页
第二章 稀有鮈鲫雌激素受体(ERα、ERβ1 和 ERβ2)基因全长的克隆与表达第22-48页
   ·前言第22页
   ·材料与试剂第22-23页
     ·主要仪器第22页
     ·主要试剂第22-23页
     ·实验用鱼及其组织样品第23页
   ·实验方法第23-31页
     ·总 RNA 的提取第23-24页
     ·中间片段的克隆第24-25页
     ·ERα、ERβ1 和 ERβ2 基因 cDNA 末端序列的快速扩增第25-29页
     ·DNA 片段的纯化回收第29页
     ·连接反应第29页
     ·连接产物的转化实验第29-30页
     ·阳性克隆的筛选第30页
     ·测序及生物信息学分析第30-31页
     ·半定量方法检测 ERα、ERβ1 和 ERβ2 基因的组织表达第31页
   ·结果与分析第31-45页
     ·总 RNA 的检测第31页
     ·稀有鮈鲫雌激素受体(ERα、ERβ1 和 ERβ2)基因 cDNA 全长的克隆第31-33页
     ·稀有鮈鲫 ERs 基因全长 cDNA 的序列分析第33-44页
     ·稀有鮈鲫 ERs 基因的组织表达第44-45页
   ·讨论第45-47页
     ·稀有鮈鲫 ERs 基因结构与功能之间的关系第45-46页
     ·稀有鮈鲫 ERs 基因组织分布与其功能的关系第46-47页
   ·小结第47-48页
第三章 EDCs 对稀有鮈鲫幼鱼 ERs 基因 mRNA 表达的影响第48-55页
   ·前言第48页
   ·材料与试剂第48-49页
     ·主要仪器第48页
     ·主要试剂第48页
     ·实验用鱼第48页
     ·EDCs 暴露实验第48-49页
   ·实验方法第49-50页
     ·总 RNA 的提取及其反转录第49页
     ·实时定量 PCR第49-50页
     ·数据分析第50页
   ·结果与分析第50-52页
     ·EDCs 对 ERα基因 mRNA 表达的影响第50页
     ·EDCs 对 ERβ1 基因 mRNA 表达的影响第50页
     ·EDCs 对 ERβ2 基因 mRNA 表达的影响第50-52页
   ·讨论第52-54页
     ·EE2 对稀有鮈鲫 ERs 基因表达的影响第52-53页
     ·NP 对稀有鮈鲫 ERs 基因表达的影响第53页
     ·BPA 对稀有鮈鲫 ERs 基因表达的影响第53-54页
   ·小结第54-55页
结论第55-56页
参考文献第56-63页
附录第63-66页
缩略词第66-67页
致谢第67-68页
作者简介第68页

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