| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-11页 |
| 前言 | 第11-13页 |
| 第一部分 农杆菌介导的AtNHX5 大豆胚尖的遗传转化 | 第13-26页 |
| 1 引言 | 第13-14页 |
| 2 材料方法 | 第14-18页 |
| ·供试材料 | 第14页 |
| ·植物材料 | 第14页 |
| ·细菌和质粒 | 第14页 |
| ·试验过程中使用的培养基 | 第14页 |
| ·胚尖转化过程 | 第14-16页 |
| ·种子消毒 | 第14页 |
| ·组织培养过程 | 第14-15页 |
| ·农杆菌的培养 | 第15页 |
| ·侵染和共培养 | 第15页 |
| ·恢复培养 | 第15页 |
| ·转化芽的筛选和植株再生 | 第15-16页 |
| ·超声波辅助农杆菌介导的遗传转化条件的摸索 | 第16页 |
| ·超声波时间对农杆菌转化的影响 | 第16页 |
| ·超声波次数对农杆菌转化的影响 | 第16页 |
| ·不同基因型对农杆菌转化的影响 | 第16页 |
| ·转AtNHX5 基因的植株PCR 检测 | 第16-18页 |
| ·大豆基因组的提取方法 | 第16-17页 |
| ·Hpt 基因PCR 检测反应体系 | 第17-18页 |
| 3 结果与分析 | 第18-23页 |
| ·不同大豆品种潮霉素筛选终浓度的确定 | 第18页 |
| ·不同超声波时间对农杆菌转化的影响 | 第18-19页 |
| ·不同超声波次数对农杆菌转化的影响 | 第19-20页 |
| ·不同基因型对农杆菌转化的影响 | 第20-21页 |
| ·转AtNHX5 基因的植株PCR 检测 | 第21-23页 |
| 4 讨论 | 第23-25页 |
| 5 结论 | 第25-26页 |
| 第二部分 农杆菌介导的AtNHX5 大豆活体子叶节的遗传转化 | 第26-40页 |
| 1 引言 | 第26-27页 |
| 2 材料与方法 | 第27-33页 |
| ·AtNHX5 基因整合到双元载体为pCAMBIA3301 | 第27-30页 |
| ·菌株、酶、质粒、试剂 | 第27页 |
| ·培养基 | 第27页 |
| ·E.coli 感受态细胞的制备和转化 | 第27-28页 |
| ·农杆菌感受态细胞的制备和转化 | 第28页 |
| ·质粒的提取 | 第28-29页 |
| ·AtNHX5 基因的克隆测序 | 第29页 |
| ·载体构建过程 | 第29-30页 |
| ·大豆的遗传转化 | 第30-33页 |
| ·植物材料 | 第30页 |
| ·种子消毒 | 第30页 |
| ·外植体的获得 | 第30页 |
| ·农杆菌的培养 | 第30-31页 |
| ·侵染和共培养 | 第31页 |
| ·移栽 | 第31页 |
| ·转化植株的筛选 | 第31页 |
| ·转化植株的PCR 验证 | 第31-33页 |
| 3 结果与分析 | 第33-37页 |
| ·目的片断的克隆与测序 | 第33页 |
| ·目的片断的连接及验证 | 第33-34页 |
| ·农杆菌转化及验证 | 第34-35页 |
| ·转化植株的筛选 | 第35页 |
| ·转化植株的PCR 鉴定 | 第35-37页 |
| 4 讨论 | 第37-39页 |
| 5 结论 | 第39-40页 |
| 参考文献 | 第40-46页 |
| 在读期间发表的学术论文 | 第46-47页 |
| 作者简介 | 第47-48页 |
| 致谢 | 第48-49页 |
