摘要 | 第7-9页 |
Abstract | 第9-10页 |
第一章 绪论 | 第11-35页 |
1 硒的生理作用简介 | 第11-16页 |
1.1 硒的概述 | 第11-12页 |
1.2 硒的生理作用 | 第12-14页 |
1.3 硒在人体中的代谢 | 第14-16页 |
2 含硒化合物的检测技术研究进展 | 第16-22页 |
2.1 高效液相色谱法(HPLC) | 第17页 |
2.2 高效液相色谱—电感耦合等离子体质谱法(HPLC-ICP-MS) | 第17-18页 |
2.3 硒化氢发生-硒化银溶胶原子吸收法 | 第18页 |
2.4 毛细管电泳-质谱方法 | 第18-19页 |
2.5 荧光分析方法 | 第19-22页 |
3 本论文的研究意义、思路来源及实施路线 | 第22-28页 |
3.1 本论文的研究意义 | 第22-24页 |
3.2 荧光探针的设计及其生物应用 | 第24-28页 |
参考文献 | 第28-35页 |
第二章 用于检测硒醇的荧光探针的设计合成及化学体系分析 | 第35-58页 |
摘要 | 第35页 |
1 引言 | 第35-37页 |
2 实验部分 | 第37-43页 |
2.1 仪器与试剂 | 第37-38页 |
2.2 荧光探针(HB)的合成路线 | 第38页 |
2.3 部花菁荧光探针(HB)的合成与表征 | 第38-40页 |
2.4 量子化学计算方法 | 第40页 |
2.5 利用质谱分析探针与硒醇作用的机理 | 第40-41页 |
2.6 探针(HB)的化学体系分析 | 第41-43页 |
2.6.1 储备液与待测物的配制方法 | 第41页 |
2.6.2 探针(HB)荧光光谱性质的测定 | 第41页 |
2.6.3 探针(HB)选择性的测定 | 第41-42页 |
2.6.4 选择性干扰物的配制方法 | 第42页 |
2.6.5 硫氧还蛋白还原酶(TrxR)中硒代半胱氨酸残基的荧光分析 | 第42页 |
2.6.6 探针与硒醇反应的动力学测定 | 第42-43页 |
3 结果与讨论 | 第43-54页 |
3.1 苯并硒二唑环(BS)与 Ebselen 的韦伯键能(WBI)比较 | 第43-44页 |
3.2 探针反应机理的验证 | 第44-46页 |
3.2.1 苯并硒唑环(BS)与硒醇(Sec)的反应机理验证 | 第44-45页 |
3.2.2 探针与硒醇的反应机理验证 | 第45-46页 |
3.3 苯并硒唑环(BS)与硒醇的初步荧光响应 | 第46页 |
3.4 探针的光谱性质初步探讨 | 第46-47页 |
3.5 探针与硒醇响应实验条件的优化 | 第47-49页 |
3.5.1 缓冲溶液 pH 值条件的优化 | 第47-48页 |
3.5.2 探针浓度的优化 | 第48-49页 |
3.6 探针对硒醇的荧光响应 | 第49-50页 |
3.7 探针与硒醇反应的动力学测定 | 第50页 |
3.8 探针的选择性评价 | 第50-53页 |
3.8.1 探针对巯基类物质的选择性评价 | 第51页 |
3.8.2 探针对金属离子的选择性评价 | 第51-52页 |
3.8.3 探针对氨基酸、活性氧的选择性评价 | 第52-53页 |
3.9 硫氧还蛋白还原酶(TrxR)中硒代半胱氨酸残基的荧光分析 | 第53-54页 |
4 本章小结 | 第54-55页 |
参考文献 | 第55-58页 |
第三章 硒醇的生物成像及 Na2SeO3诱导肿瘤细胞凋亡过程中硒醇作用的研究 | 第58-75页 |
摘要 | 第58页 |
1 引言 | 第58-60页 |
2 实验部分 | 第60-64页 |
2.1 仪器与试剂 | 第60页 |
2.2 细胞培养技术 | 第60-61页 |
2.3 细胞毒性评价(MTT 实验) | 第61-62页 |
2.4 激光共聚焦成像实验 | 第62页 |
2.5 探针的抗光漂白实验 | 第62页 |
2.6 探针应用到活体成像实验 | 第62-63页 |
2.7 通过探针研究 Na2SeO3对肝癌细胞的影响 | 第63页 |
2.8 细胞周期分析实验 | 第63页 |
2.9 线粒体膜电位(MMP)分析 | 第63-64页 |
3 结果与讨论 | 第64-72页 |
3.1 探针的毒性评价(MTT 实验) | 第64-65页 |
3.2 探针的抗光漂白实验 | 第65页 |
3.3 活细胞中硒醇的荧光成像 | 第65-67页 |
3.4 活体中硒醇的荧光成像 | 第67页 |
3.5 利用探针可视化研究 Na2SeO3对肝癌细胞凋亡过程的影响 | 第67-69页 |
3.6 细胞周期分析实验 | 第69-70页 |
3.7 线粒体膜电位分析实验 | 第70-72页 |
4 结论 | 第72-73页 |
参考文献 | 第73-75页 |
附:合成产物谱图 | 第75-81页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文和参与的课题 | 第81-82页 |
致谢 | 第82页 |