| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 论文缩写词中英文对照 | 第7-12页 |
| 1 前言 | 第12-20页 |
| 1.1 家蚕的滞育 | 第12-13页 |
| 1.2 家蚕滞育研究现状 | 第13-15页 |
| 1.2.1 滞育关联酶的研究 | 第13-14页 |
| 1.2.2 滞育关联基因的研究 | 第14-15页 |
| 1.3 MicroRNA的研究 | 第15-18页 |
| 1.3.1 miRNA的发现及其作用机理 | 第15-16页 |
| 1.3.2 家蚕miRNA研究现状 | 第16-18页 |
| 1.4 本文研究背景和目的 | 第18-19页 |
| 本文采用的实验技术路线 | 第19-20页 |
| 2 材料与方法 | 第20-38页 |
| 2.1 材料 | 第20-23页 |
| 2.1.1 家蚕、菌株和细胞 | 第20页 |
| 2.1.2 主要仪器 | 第20-21页 |
| 2.1.3 主要药品试剂 | 第21页 |
| 2.1.4 主要试剂盒 | 第21-22页 |
| 2.1.5 主要试剂的配制 | 第22-23页 |
| 2.2 方法 | 第23-38页 |
| 2.2.1 蚕卵的取样 | 第23-24页 |
| 2.2.2 候选基因筛选 | 第24页 |
| 2.2.3 引物的设计 | 第24-26页 |
| 2.2.4 候选基因的表达情况 | 第26-28页 |
| 2.2.5 候选基因的荧光定量PCR | 第28-29页 |
| 2.2.6 miRNA的潜在靶基因鉴定 | 第29-36页 |
| 2.2.7 酶活测定 | 第36-38页 |
| 3 结果与分析 | 第38-52页 |
| 3.1 候选靶基因预测与扩增 | 第38-45页 |
| 3.1.1 靶标预测 | 第38-40页 |
| 3.1.2 候选靶基因的PCR扩增 | 第40-43页 |
| 3.1.3 候选基因的荧光定量PCR | 第43-45页 |
| 3.2 候选基因的靶标鉴定 | 第45-47页 |
| 3.2.1 bmo-miR33843p抑制BmNLK基因的表达 | 第45-46页 |
| 3.2.2 bmo-miR27613p抑制BmSDH基因的表达 | 第46-47页 |
| 3.3 BmNLK酶与BmSDH酶的活性测定 | 第47-52页 |
| 3.3.1 BmNLK的酶活测定 | 第47-50页 |
| 3.3.2 BmSDH的酶活测定 | 第50-52页 |
| 4 结论与讨论 | 第52-58页 |
| 4.1 结论 | 第52-53页 |
| 4.2 讨论 | 第53-57页 |
| 4.2.1 BmNLK基因与家蚕滞育的关系 | 第53-54页 |
| 4.2.2 BmSDH基因与家蚕滞育的关系 | 第54-55页 |
| 4.2.3 BmNLK酶、BmSDH酶的活性与家蚕滞育的关系 | 第55页 |
| 4.2.4 bmo-miR33843p基因与家蚕滞育的关系 | 第55-56页 |
| 4.2.5 bmo-miR27613p基因与家蚕滞育的关系 | 第56页 |
| 4.2.6 miRNA-mRNA-酶三者在家蚕滞育调控中的作用 | 第56-57页 |
| 4.3 本文的主要创新点 | 第57页 |
| 4.4 今后工作的展望 | 第57-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-64页 |
| 附录A：各候选基因的序列信息 | 第64-70页 |
| 附录B：T克隆测序图谱 | 第70-77页 |
| 附录C：荧光定量PCR扩增曲线和融解曲线 | 第77-79页 |
| 附录D：载体示意图 | 第79页 |
