| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 主要符号对照表 | 第9-10页 |
| 第1章 引言 | 第10-21页 |
| 1.1 FSH | 第10-13页 |
| 1.1.1 FSH的结构 | 第10-11页 |
| 1.1.2 FSH的功能和作用机制 | 第11页 |
| 1.1.3 超数排卵及常用激素 | 第11-13页 |
| 1.2 CHO细胞 | 第13-15页 |
| 1.2.1 CHO细胞简介 | 第13-14页 |
| 1.2.2 CHO细胞的无血清培养 | 第14-15页 |
| 1.3 哺乳动物细胞大规模培养 | 第15-18页 |
| 1.3.1 转瓶培养 | 第15页 |
| 1.3.2 细胞培养用生物反应器 | 第15-16页 |
| 1.3.3 细胞培养过程中的参数控制 | 第16-18页 |
| 1.4 染料亲和层析 | 第18-19页 |
| 1.4.1 亲和层析简介 | 第18页 |
| 1.4.2 染料亲和层析 | 第18-19页 |
| 1.5 本课题的来源及主要的研究内容与方法 | 第19-21页 |
| 1.5.1 本课题的来源与意义 | 第19-20页 |
| 1.5.2 研究内容与研究方法 | 第20-21页 |
| 第2章 高产CHO-FSH细胞株的筛选及工作细胞库的建立 | 第21-39页 |
| 2.1 实验材料、试剂及仪器 | 第21-25页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第21页 |
| 2.1.2 实验试剂 | 第21-22页 |
| 2.1.3 实验仪器 | 第22页 |
| 2.1.4 实验试剂的配制 | 第22-25页 |
| 2.2 实验方法 | 第25-31页 |
| 2.2.1 CHO-FSH高产细胞株筛选 | 第25-30页 |
| 2.2.2 工作细胞库的建立 | 第30页 |
| 2.2.3 工作细胞库中细胞支原体检验 | 第30-31页 |
| 2.3 实验结果与分析 | 第31-37页 |
| 2.3.1 CHO-FSH高产细胞株筛选 | 第31-36页 |
| 2.3.2 工作细胞库的建立 | 第36页 |
| 2.3.3 工作细胞库中细胞支原体检测 | 第36-37页 |
| 2.4 本章小结 | 第37-39页 |
| 第3章 CHO-FSH细胞的大规模培养及蛋白纯化 | 第39-50页 |
| 3.1 实验材料、试剂及仪器 | 第39-42页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第39页 |
| 3.1.2 实验试剂 | 第39-40页 |
| 3.1.3 实验仪器 | 第40页 |
| 3.1.4 试剂的配制 | 第40-42页 |
| 3.2 实验方法 | 第42-46页 |
| 3.2.1 CHO-FSH细胞的复苏、传代与冻存 | 第42页 |
| 3.2.2 CHO-FSH细胞的大规模培养 | 第42-45页 |
| 3.2.3 蛋白纯化 | 第45-46页 |
| 3.2.4 Western Blotting鉴定 | 第46页 |
| 3.3 实验结果与分析 | 第46-49页 |
| 3.3.1 CHO-FSH细胞的转瓶培养及发酵罐培养 | 第46-48页 |
| 3.3.2 染料亲和层析 | 第48-49页 |
| 3.3.3 洗脱峰的Western Blotting鉴定 | 第49页 |
| 3.4 本章小结 | 第49-50页 |
| 第4章 FSH类似物的生物活性测定 | 第50-58页 |
| 4.1 实验材料、试剂及仪器 | 第50-51页 |
| 4.1.1 实验材料 | 第50页 |
| 4.1.2 实验试剂 | 第50页 |
| 4.1.3 实验器材 | 第50-51页 |
| 4.1.4 实验试剂的配制 | 第51页 |
| 4.2 实验方法 | 第51-53页 |
| 4.2.1 CHO-FSH的长期连续培养 | 第51页 |
| 4.2.2 培养液上清的ELISA测定 | 第51页 |
| 4.2.3 FSH类似物生物活性的测定 | 第51-53页 |
| 4.3 实验结果与分析 | 第53-57页 |
| 4.3.1 基于《中国药典》测定FSH类似物的生物活性 | 第53-54页 |
| 4.3.2 基于《兽药国家标准汇编》测定FSH类似物的生物活性 | 第54-55页 |
| 4.3.3 CHO-FSH细胞长期培养的稳定性 | 第55-57页 |
| 4.4 本章小结 | 第57-58页 |
| 第5章 结论 | 第58-60页 |
| 参考文献 | 第60-65页 |
| 致谢 | 第65-66页 |
| 附录A 第二批FSH类似物的生物活性测定报告 | 第66-67页 |
| 附录B 第三批FSH类似物的生物活性测定报告 | 第67-68页 |
| 附录C 第四批FSH类似物的生物活性检测报告 | 第68页 |
