摘要 | 第5-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
绪论 | 第11-16页 |
第一部分 C.elegans进行基因RNAi筛查寻找EAF2可能协同作用蛋白 | 第16-27页 |
1.前言 | 第16-17页 |
2.材料与方法 | 第17-21页 |
2.1 C. elegans虫株 | 第17页 |
2.2 RNAi大肠杆菌克隆库(feeding library) | 第17-18页 |
2.3 主要试剂 | 第18页 |
2.4 主要试剂的配制 | 第18-19页 |
2.5 主要仪器 | 第19页 |
2.6 C. elegans培养 | 第19-20页 |
2.7 RNAi筛查 | 第20-21页 |
2.8 统计学分析 | 第21页 |
3.结果 | 第21-23页 |
3.1 通过RNAi筛查出与eaf-1 起协同作用影响C. elegans生育能力的基因 | 第21-22页 |
3.2 pha-4 与eaf-1 发生协同作用影响C. elegans生育能力 | 第22-23页 |
4.讨论 | 第23-26页 |
5.结论 | 第26-27页 |
第二部分 FOXA1介导EAF2调控雄激素受体活性以及前列腺癌细胞增殖、迁移的分子机制研究 | 第27-71页 |
1.前言 | 第27-28页 |
2.材料与方法 | 第28-48页 |
2.1 细胞株 | 第28页 |
2.2 质粒和siRNA | 第28-29页 |
2.3 实验动物 | 第29页 |
2.4 主要试剂 | 第29-31页 |
2.5 主要试剂的配制 | 第31-33页 |
2.6 主要仪器 | 第33-34页 |
2.7 细胞培养 | 第34-36页 |
2.8 动物饲养 | 第36-37页 |
2.9 细胞转染 | 第37-38页 |
2.10 蛋白质免疫印迹(western blot) | 第38-40页 |
2.11 细胞核浆分离实验 | 第40-41页 |
2.12 蛋白质免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation,Co-IP) | 第41-42页 |
2.13 实时荧光定量PCR(realtime PCR) | 第42-44页 |
2.14 双荧光素酶报告基因检测 | 第44页 |
2.15 BrdU细胞增殖检测(Brd U incorporation assay) | 第44-45页 |
2.16 Transwell细胞迁移实验(Transwell Migration Assay) | 第45-46页 |
2.17 细胞克隆形成实验(Colony formation assay) | 第46页 |
2.18 染色质免疫共沉淀(Chromatin Immunoprecipitation,Ch IP) | 第46-48页 |
2.19 统计学处理 | 第48页 |
3.结果 | 第48-60页 |
3.1 EAF2和FOXA1相互结合 | 第48-51页 |
3.2 EAF2降低FOXA1的蛋白表达水平 | 第51-53页 |
3.3 FOXA1参与EAF2抑制AR转录活性的调节 | 第53-55页 |
3.4 FOXA1介导了EAF2对AR与其下游基因DNA结合能力的调控 | 第55-57页 |
3.5 FOXA1参与EAF2对前列腺癌细胞增殖和迁移能力的调节 | 第57-60页 |
4.讨论 | 第60-70页 |
5.结论 | 第70-71页 |
参考文献 | 第71-80页 |
致谢 | 第80-81页 |
在读期间发表论文 | 第81页 |