| 摘要 | 第5-6页 |
| ABSTRACT | 第6页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-41页 |
| 1.1 光敏色素蛋白研究进展概述 | 第10-32页 |
| 1.1.1 光敏色素蛋白的发现及其生理特性 | 第10-13页 |
| 1.1.2 编码光敏色素蛋白的基因家族 | 第13页 |
| 1.1.3 光敏色素蛋白的结构域 | 第13-16页 |
| 1.1.4 光敏色素蛋白的功能 | 第16-19页 |
| 1.1.5 光调控光敏色素蛋白的亚细胞定位 | 第19-21页 |
| 1.1.6 核斑点 | 第21-22页 |
| 1.1.7 光敏色素蛋白---光控激酶 | 第22-23页 |
| 1.1.8 光敏色素的磷酸化、去磷酸化 | 第23-25页 |
| 1.1.9 光敏色素的降解 | 第25-26页 |
| 1.1.10 光敏色素蛋白信号转导途径 | 第26-32页 |
| 1.2 SPAs蛋白研究进展概述 | 第32-41页 |
| 1.2.1 SPA1 | 第32-35页 |
| 1.2.2 其它SPAs蛋白及其功能 | 第35-36页 |
| 1.2.3 SPA1协助COP1负调控光形态建成 | 第36-38页 |
| 1.2.4 SPAs与其他蛋白的互作 | 第38-39页 |
| 1.2.5 SPA1与光受体的相互作用 | 第39-41页 |
| 第二章 材料与方法 | 第41-74页 |
| 2.1 材料 | 第41-44页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第41页 |
| 2.1.2 化学品 | 第41-42页 |
| 2.1.3 抗生素 | 第42页 |
| 2.1.4 菌株 | 第42-43页 |
| 2.1.5 质粒 | 第43页 |
| 2.1.6 试剂盒及常用酶 | 第43页 |
| 2.1.7 抗体及蛋白富集珠 | 第43-44页 |
| 2.2 实验方法 | 第44-51页 |
| 2.2.1 载体构建 | 第44-47页 |
| 2.2.2 大肠杆菌的转化 | 第47-51页 |
| 2.3 拟南芥材料种植 | 第51-53页 |
| 2.3.1 拟南芥种子的萌发 | 第51-52页 |
| 2.3.2 拟南芥土培 | 第52页 |
| 2.3.3 拟南芥杂交 | 第52-53页 |
| 2.4 拟南芥基因组DNA的提取 | 第53页 |
| 2.5 拟南芥多突变体的构建 | 第53-56页 |
| 2.5.1 spa1 spa2双突变体 | 第53-54页 |
| 2.5.2 spa1 spa2 spa4三突变体 | 第54页 |
| 2.5.3 spa1 spa2 spa3三突变体 | 第54页 |
| 2.5.4 spa1 spa2 spa3 spa4四突变体 | 第54-55页 |
| 2.5.5 phyB spa1 spa2和phyA spa1 spa2三突变体 | 第55页 |
| 2.5.6 phyB spa1 spa2 spa4和phyA spa1 spa2 spa4四突变体 | 第55页 |
| 2.5.7 phyB spa1 spa2 spa3 spa4和phyA spa1 spa2 spa3 spa4五突变体 | 第55-56页 |
| 2.5.8 phyB突变体背景下 35S::Myc-SPA1（phyB）的获得 | 第56页 |
| 2.6 酵母双杂交 | 第56-62页 |
| 2.6.1 GAL4系统的酵母双杂交定性分析 | 第56-59页 |
| 2.6.2 LexA系统酵母双杂交定性和定量分析 | 第59-62页 |
| 2.7 酵母三杂交 | 第62-64页 |
| 2.7.1 载体构建 | 第62-63页 |
| 2.7.2 酵母转化 | 第63-64页 |
| 2.8 原生质体瞬时表达系统中分析蛋白共定位 | 第64-66页 |
| 2.8.1 拟南芥幼苗原生质体制备 | 第64-65页 |
| 2.8.2 原生质体转化及检测 | 第65-66页 |
| 2.9 烟草瞬时表达系统中分析蛋白共定位 | 第66-68页 |
| 2.9.1 烟草种植 | 第66-67页 |
| 2.9.2 农杆菌菌液准备 | 第67-68页 |
| 2.9.3 烟草注射 | 第68页 |
| 2.10 双分子荧光互补实验 | 第68-69页 |
| 2.11 Western Blotting检测蛋白水平 | 第69-72页 |
| 2.11.1 植物蛋白的提取 | 第69-70页 |
| 2.11.2 SDS-PAGE蛋白质凝胶电泳 | 第70-71页 |
| 2.11.3 Semi-Dry转膜 | 第71页 |
| 2.11.4 封闭 | 第71-72页 |
| 2.11.5 孵育一抗 | 第72页 |
| 2.11.6 孵育二抗 | 第72页 |
| 2.11.7 显色 | 第72页 |
| 2.12 蛋白质免疫共沉淀实验（Coimmunoprecipitation assays, Co-IP） | 第72-74页 |
| 2.12.1 Beads处理 | 第72-73页 |
| 2.12.2 植物蛋白的提取 | 第73页 |
| 2.12.3 蛋白与Beads结合 | 第73页 |
| 2.12.4 洗去非特异性结合 | 第73页 |
| 2.12.5 蛋白洗脱及Western Blotting | 第73-74页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第74-110页 |
| 3.1 引言 | 第74页 |
| 3.2 实验结果 | 第74-104页 |
| 3.2.1 在酵母中phyB与SPA1发生依赖于红光的相互作用 | 第74-76页 |
| 3.2.2 在烟草细胞中phyB通过其N端和C端与SPA1共定位 | 第76-78页 |
| 3.2.3 在拟南芥原生质体中phyB与SPA1的共定位依赖于红光 | 第78-79页 |
| 3.2.4 phyB与SPA1在烟草表皮细胞中发生直接相互作用 | 第79-80页 |
| 3.2.5 在拟南芥体中phyB与SPA1的相互作用依赖于红光 | 第80-81页 |
| 3.2.6 在红光下SPAs位于PHYB的下游抑制光形态建成 | 第81-84页 |
| 3.2.7 SPAs位于phyB的下游抑制HY5蛋白的积累 | 第84-85页 |
| 3.2.8 在拟南芥中红光激活的phyB抑制SPA1与COP1的互作 | 第85-88页 |
| 3.2.9 在酵母中红光激活的phyB促进SPA1与COP1的解离 | 第88-90页 |
| 3.2.10 红光依赖性的phyB与SPA1的互作促进SPA1与COP1的解离 | 第90-92页 |
| 3.2.11 在酵母中SPA1特异性地与Pfr形式的phyA直接互作 | 第92-96页 |
| 3.2.12 烟草瞬时表达系统中phyA通过其N端和C端与SPA1共定位 | 第96-97页 |
| 3.2.13 在拟南芥原生质体中phyA与SPA1发生依赖于远红光/红光的共定位 | 第97-98页 |
| 3.2.14 phyA与SPA1在烟草表皮细胞中发生直接相互作用 | 第98-100页 |
| 3.2.15 在远红光下SPAs位于phyA的下游调控光形态建成 | 第100-103页 |
| 3.2.16 SPAs位于phyA的下游抑制HY5蛋白的积累 | 第103-104页 |
| 3.3 总结与讨论 | 第104-110页 |
| 3.3.1 phyB介导的红光信号转导机制涉及phyB与SPA1的直接互作 | 第104-105页 |
| 3.3.2 红光依赖性的phyB与SPA1的互作促进SPA1与COP1的解离 | 第105-106页 |
| 3.3.3 phyA介导的远红光信号转导机制可能涉及其与SPA1的互作 | 第106-107页 |
| 3.3.4 红光下光形态建成过程中phyB与SPA1的作用模型 | 第107-110页 |
| 第四章 创新点与研究展望 | 第110-111页 |
| 参考文献 | 第111-131页 |
| 附录1 构建载体所用引物 | 第131-133页 |
| 附录2 突变体鉴定引物 | 第133-134页 |
| 附录3 载体图谱 | 第134-139页 |
| 致谢 | 第139-140页 |
| 发表论文 | 第140页 |
