| 摘要 | 第10-12页 |
| 英文摘要 | 第12-13页 |
| 符号说明 | 第14-15页 |
| 1 文献综述 | 第15-27页 |
| 1.1 引言 | 第15页 |
| 1.2 IFN-γ研究进展 | 第15-20页 |
| 1.2.1 IFN-γ分子结构和编码基因 | 第16页 |
| 1.2.2 IFN-γ的诱生 | 第16-17页 |
| 1.2.3 IFN-γ信号传导 | 第17-18页 |
| 1.2.4 IFN-γ的生物活性 | 第18-20页 |
| 1.3 IL-18 研究进展 | 第20-24页 |
| 1.3.1 IL-18 分子结构和产生 | 第20-21页 |
| 1.3.1.1 IL-18 的分子结构 | 第20页 |
| 1.3.1.2 IL-18 的前体加工 | 第20-21页 |
| 1.3.2 IL-18 信号传导 | 第21-22页 |
| 1.3.3 IL-18 生物学活性 | 第22-24页 |
| 1.4 传染性法氏囊病研究进展 | 第24-25页 |
| 1.5 本研究的目的及意义 | 第25-27页 |
| 2 材料与方法 | 第27-43页 |
| 2.1 材料 | 第27页 |
| 2.1.1 菌株和实验动物 | 第27页 |
| 2.1.2 主要试验试剂及工具酶 | 第27页 |
| 2.1.3 主要试剂盒及其他 | 第27页 |
| 2.1.4 主要仪器设备 | 第27页 |
| 2.2 方法 | 第27-43页 |
| 2.2.1 目的基因引物的设计与合成 | 第27-28页 |
| 2.2.2 目的基因ChIL-18 和ChIFN-γ的模板RNA提取 | 第28-29页 |
| 2.2.3 目的基因片段扩增 | 第29-30页 |
| 2.2.4 PCR产物回收与纯化 | 第30页 |
| 2.2.5 目的片段连接到pMD18-T载体 | 第30-31页 |
| 2.2.6 重组蛋白原核表达载体构建 | 第31-32页 |
| 2.2.7 蛋白表达及纯化 | 第32-33页 |
| 2.2.8 重组蛋白体外抗病毒活性分析 | 第33-34页 |
| 2.2.9 鉴定重组蛋白体内抗病毒活性 | 第34-36页 |
| 2.2.10 蛋白体内抗病毒机制研究 | 第36-40页 |
| 2.2.10.1 实验检测基因引物 | 第37页 |
| 2.2.10.2 实验动物处理 | 第37-38页 |
| 2.2.10.3 分离雏鸡脾脏淋巴细胞 | 第38-39页 |
| 2.2.10.4 淋巴细胞增殖实验 | 第39页 |
| 2.2.10.5 细胞因子检测 | 第39-40页 |
| 2.2.11 蛋白体外抗病毒机制研究 | 第40-41页 |
| 2.2.11.1 检测巨噬细胞中NO分泌 | 第40页 |
| 2.2.11.2 TLR信号通路分析 | 第40-41页 |
| 2.2.12 数据统计分析 | 第41-43页 |
| 3 结果与分析 | 第43-57页 |
| 3.1 目的基因的获得 | 第43页 |
| 3.2 pMD18-T-ChIL-18 和pMD18-T-ChIFN-γ重组质粒鉴定鉴定结果 | 第43页 |
| 3.3 重组质粒pET28a-ChIL-18 和pET28a-ChIFN-γ的获得 | 第43-45页 |
| 3.4 ChIL-18 和ChIFN-γ蛋白的诱导表达与纯化 | 第45页 |
| 3.5 重组蛋白体外抗病毒感染 | 第45-46页 |
| 3.6 重组蛋白抑制病毒对机体的感染 | 第46-47页 |
| 3.7 蛋白体内抗病毒机制研究 | 第47-57页 |
| 3.7.1 重组蛋白刺激体外细胞因子转录水平分析 | 第47-49页 |
| 3.7.2 重组蛋白体外刺激鸡脾淋巴细胞增殖及细胞因子分泌 | 第49-51页 |
| 3.7.3 重组蛋白体内刺激血液中细胞因子检测 | 第51-53页 |
| 3.7.4 蛋白诱导巨噬细胞产生NO | 第53页 |
| 3.7.5 蛋白激活巨噬细胞中信号通路 | 第53-57页 |
| 4 讨论 | 第57-61页 |
| 5 结论 | 第61-63页 |
| 参考文献 | 第63-75页 |
| 致谢 | 第75-77页 |
| 附录 （一） | 第77-81页 |
| 附录 （二） | 第81-83页 |
| 个人简历 | 第83页 |
