| 摘要 | 第4-10页 |
| Abstract | 第10-18页 |
| 英文缩写词表 | 第24-26页 |
| 第1章 引言 | 第26-46页 |
| 1.1 综述一 化学治疗引起卵巢功能损伤的机制与保护措施 | 第27-40页 |
| 1.1.1 卵巢早衰与卵巢功能不全 | 第27-28页 |
| 1.1.2 卵巢早衰的病因 | 第28-29页 |
| 1.1.3 化疗药物对卵巢的损伤及可能机制 | 第29-34页 |
| 1.1.4 化疗导致卵巢功能损伤的保护措施 | 第34-40页 |
| 1.2 综述二 羊水干细胞的研究进展 | 第40-46页 |
| 1.2.1 羊水细胞组成 | 第40页 |
| 1.2.2 羊水干细胞的获得 | 第40-41页 |
| 1.2.3 羊水干细胞的特性与优势 | 第41-42页 |
| 1.2.4 羊水干细胞的应用前景 | 第42-46页 |
| 第2章 hAFSc的分离、培养、鉴定与生物学特性分析 | 第46-66页 |
| 2.1 实验材料 | 第47-51页 |
| 2.1.1 实验标本 | 第47页 |
| 2.1.2 实验动物 | 第47页 |
| 2.1.3 实验仪器与设备 | 第47-48页 |
| 2.1.4 实验试剂 | 第48-49页 |
| 2.1.5 主要溶液的配制 | 第49-51页 |
| 2.2 实验方法 | 第51-55页 |
| 2.2.1 hAFSc的分离、培养与纯化 | 第51页 |
| 2.2.2 hAFSc的传代与扩增 | 第51页 |
| 2.2.3 hAFSc的冻存与复苏 | 第51-52页 |
| 2.2.4 流式细胞术检测hAFSc表面分子的表达 | 第52页 |
| 2.2.5 MTT方法检测hAFSc增殖活力 | 第52-53页 |
| 2.2.6 Western Blot方法检测hAFSc中多能干细胞标志物的表达 | 第53-54页 |
| 2.2.7 hAFSc分化潜能的检测 | 第54-55页 |
| 2.2.8 hAFSc体内致瘤性的分析 | 第55页 |
| 2.2.9 统计分析 | 第55页 |
| 2.3 实验结果 | 第55-62页 |
| 2.3.1 hAFSc的形态学观察 | 第55-57页 |
| 2.3.2 hAFSc表面分子标志物的表达 | 第57-58页 |
| 2.3.3 hAFSc生长曲线 | 第58-59页 |
| 2.3.4 hAFSc中多能干细胞特异性蛋白的表达 | 第59-60页 |
| 2.3.5 hAFSc的分化潜能 | 第60-61页 |
| 2.3.6 hAFSc的成瘤性 | 第61-62页 |
| 2.4 讨论 | 第62-64页 |
| 2.5 结论 | 第64-66页 |
| 第3章 顺铂诱导大鼠卵巢损伤模型的建立及损伤途径的研究 | 第66-86页 |
| 3.1 实验材料 | 第66-68页 |
| 3.1.1 实验动物 | 第66-67页 |
| 3.1.2 实验仪器与设备 | 第67页 |
| 3.1.3 实验试剂 | 第67-68页 |
| 3.1.4 主要溶液的配制 | 第68页 |
| 3.2 实验方法 | 第68-72页 |
| 3.2.1 大鼠卵巢顺铂损伤模型的建立 | 第68-69页 |
| 3.2.2 大鼠一般状态的观察 | 第69页 |
| 3.2.3 大鼠标本的取样方法 | 第69页 |
| 3.2.4 Elisa方法检测大鼠卵巢内分泌功能 | 第69-70页 |
| 3.2.5 HE染色评估大鼠卵巢、子宫组织损伤程度 | 第70-71页 |
| 3.2.6 TUNEL方法检测大鼠卵巢组织凋亡情况 | 第71页 |
| 3.2.7 Western Blot方法检测大鼠卵巢FSHR蛋白的表达 | 第71-72页 |
| 3.2.8 统计分析 | 第72页 |
| 3.3 实验结果 | 第72-82页 |
| 3.3.1 一般状态和体重 | 第72-73页 |
| 3.3.2 生存曲线 | 第73-74页 |
| 3.3.3 血清FSH和E2水平 | 第74-75页 |
| 3.3.4 卵巢和子宫外观的变化 | 第75-77页 |
| 3.3.5 卵巢和子宫组织形态学变化 | 第77-80页 |
| 3.3.6 卵巢细胞的凋亡情况 | 第80-81页 |
| 3.3.7 卵巢FSHR蛋白的表达情况 | 第81-82页 |
| 3.4 讨论 | 第82-85页 |
| 3.5 结论 | 第85-86页 |
| 第4章 hAFSc预防和治疗顺铂所致大鼠卵巢损伤的体内实验 | 第86-110页 |
| 4.1 实验材料 | 第86-88页 |
| 4.1.1 实验细胞 | 第86-87页 |
| 4.1.2 实验动物 | 第87页 |
| 4.1.3 实验仪器与设备 | 第87页 |
| 4.1.4 实验试剂 | 第87页 |
| 4.1.5 主要溶液的配制 | 第87-88页 |
| 4.2 实验方法 | 第88-91页 |
| 4.2.1 PKH26标记h AFSc | 第88页 |
| 4.2.2 MTT方法检测PKH26标记和未标记的hAFSc增殖能力 | 第88-89页 |
| 4.2.3 hAFSc悬液的制备 | 第89页 |
| 4.2.4 体内实验分组及处理 | 第89-90页 |
| 4.2.5 大鼠一般状态的观察 | 第90页 |
| 4.2.6 大鼠标本的取样方法 | 第90页 |
| 4.2.7 荧光显微镜观察hAFSc的定向迁移与存活 | 第90-91页 |
| 4.2.8 Elisa方法检测大鼠卵巢内分泌功能 | 第91页 |
| 4.2.9 HE染色评估大鼠卵巢组织损伤程度 | 第91页 |
| 4.2.10 Western Blot方法检测大鼠卵巢中相关蛋白的表达 | 第91页 |
| 4.2.11 统计分析 | 第91页 |
| 4.3 结果 | 第91-104页 |
| 4.3.1 荧光显微镜观察PKH26标记的hAFSc | 第91-92页 |
| 4.3.2 PKH26标记对hAFSc增殖的影响 | 第92-93页 |
| 4.3.3 PKH26标记的h AFSc在大鼠卵巢中的分布与存活 | 第93页 |
| 4.3.4 血清FSH、E2水平 | 第93-96页 |
| 4.3.5 卵巢外观的变化 | 第96-97页 |
| 4.3.6 卵巢形态学变化 | 第97-101页 |
| 4.3.7 卵巢中PI3K/PTEN/Akt信号通路相关蛋白的表达 | 第101-103页 |
| 4.3.8 卵巢中凋亡相关蛋白Bcl-2 和Bax的表达 | 第103-104页 |
| 4.4 讨论 | 第104-109页 |
| 4.5 结论 | 第109-110页 |
| 第5章 hAFSc修复顺铂所致大鼠卵巢颗粒细胞损伤的体外实验 | 第110-130页 |
| 5.1 实验材料 | 第110-112页 |
| 5.1.1 实验细胞 | 第110页 |
| 5.1.2 实验动物 | 第110页 |
| 5.1.3 实验仪器与设备 | 第110-111页 |
| 5.1.4 实验试剂 | 第111页 |
| 5.1.5 主要溶液的配制 | 第111-112页 |
| 5.2 实验方法 | 第112-116页 |
| 5.2.1 大鼠卵巢颗粒细胞的提取与原代培养 | 第112-113页 |
| 5.2.2 大鼠卵巢颗粒细胞的鉴定 | 第113页 |
| 5.2.3 MTT方法检测大鼠卵巢颗粒细胞活力 | 第113页 |
| 5.2.4 顺铂诱导大鼠卵巢颗粒细胞损伤模型的建立 | 第113-114页 |
| 5.2.5 Western Blot方法检测顺铂对大鼠卵巢颗粒细胞FSHR蛋白表达的影响 | 第114-115页 |
| 5.2.6 Transwell迁移实验检测hAFSc向受损颗粒细胞定向迁移的能力 | 第115页 |
| 5.2.7 Transwell小室共培养检测hAFSc修复受损颗粒细胞的能力 | 第115-116页 |
| 5.2.8 统计分析 | 第116页 |
| 5.3 结果 | 第116-125页 |
| 5.3.1 解剖显微镜下收集大鼠卵巢颗粒细胞 | 第116-117页 |
| 5.3.2 大鼠卵巢颗粒细胞的形态学观察 | 第117页 |
| 5.3.3 大鼠卵巢颗粒细胞FSHR的表达 | 第117-118页 |
| 5.3.4 大鼠卵巢颗粒细胞生长曲线 | 第118-119页 |
| 5.3.5 顺铂诱导大鼠卵巢颗粒细胞损伤模型的建立 | 第119-122页 |
| 5.3.6 顺铂对颗粒细胞FSHR蛋白表达的影响 | 第122页 |
| 5.3.7 hAFSc向顺铂损伤的颗粒细胞迁移的能力 | 第122-123页 |
| 5.3.8 hAFSc对颗粒细胞凋亡的影响 | 第123-124页 |
| 5.3.9 hAFSc对顺铂损伤颗粒细胞FSHR蛋白表达的影响 | 第124-125页 |
| 5.4 讨论 | 第125-128页 |
| 5.5 结论 | 第128-130页 |
| 第6章 结论 | 第130-132页 |
| 参考文献 | 第132-148页 |
| 作者简介及在学期间所取得的科研成果 | 第148-150页 |
| 致谢 | 第150页 |
