| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 1 前言 | 第12-26页 |
| 1.1 研究目的意义、研究内容、实验设计 | 第12-14页 |
| 1.1.1 本研究的目的意义 | 第12-13页 |
| 1.1.2 研究内容 | 第13页 |
| 1.1.3 试验设计 | 第13-14页 |
| 1.2 文献综述 | 第14-26页 |
| 1.2.1 番茄抗叶霉病的研究进展 | 第14-18页 |
| 1.2.2 膜受体蛋白研究进展 | 第18-21页 |
| 1.2.3 SOBIR1研究进展 | 第21-22页 |
| 1.2.4 互作蛋白鉴定方法的研究进展 | 第22-26页 |
| 2 材料与方法 | 第26-42页 |
| 2.1 实验材料 | 第26页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第26页 |
| 2.1.2 菌株和质粒 | 第26页 |
| 2.2 方法 | 第26-36页 |
| 2.2.1 植物的无菌培养与栽培 | 第26-27页 |
| 2.2.2 载体构建的一般方法 | 第27-30页 |
| 2.2.3 各种植物表达载体的构建 | 第30-31页 |
| 2.2.4 酵母杂交筛选c DNA文库 | 第31-33页 |
| 2.2.5 转基因植物获得 | 第33-34页 |
| 2.2.6 植物总蛋白的提取及免疫印迹共沉淀 | 第34-35页 |
| 2.2.7 质谱样品制备 | 第35页 |
| 2.2.8 总RNA的提取 | 第35-36页 |
| 2.2.9 HR检测和Cladosporium fulvum接种测定 | 第36页 |
| 2.3 试剂及缓冲液配方 | 第36-42页 |
| 2.3.1 常用分子生物学试剂配方 | 第36-38页 |
| 2.3.2 常用缓冲液配方 | 第38-39页 |
| 2.3.3 常用培养基配方 | 第39-42页 |
| 3 结果与分析 | 第42-75页 |
| 3.1 SOBIR1蛋白序列分析 | 第42-44页 |
| 3.1.1 SOBIR1蛋白进化树分析 | 第42页 |
| 3.1.2 SOBIR1蛋白结构域分析 | 第42-43页 |
| 3.1.3 SOBIR1同源蛋白跨膜区分析 | 第43-44页 |
| 3.2 通过酵母杂交技术鉴定Sl SOBIR1互作蛋白 | 第44-50页 |
| 3.2.1 酵母能稳定表达Sl SOBIR1-kinase domain(KD)和Sl SOBIR1-RD/ N-kinase domain | 第44-45页 |
| 3.2.2 自激活检测 | 第45-46页 |
| 3.2.3 毒性检测 | 第46-47页 |
| 3.2.4 酵母杂交效率检测 | 第47页 |
| 3.2.5 PCR及酶切筛选重复序列 | 第47页 |
| 3.2.6 测序结果 | 第47-49页 |
| 3.2.7 酵母共转化 | 第49-50页 |
| 3.2.8 候选基因功能预测 | 第50页 |
| 3.3 酵母杂交候选基因功能验证 | 第50-53页 |
| 3.3.1 VDAC功能验证 | 第50-52页 |
| 3.3.2 SAP18功能验证 | 第52-53页 |
| 3.4 通过质谱技术鉴定SlSOBIR1互作蛋白 | 第53-70页 |
| 3.4.1 植物材料准备 | 第53-58页 |
| 3.4.2 质谱样品准备 | 第58-62页 |
| 3.4.3 质谱结果与分析 | 第62-68页 |
| 3.4.4 候选基因生物信息学分析 | 第68-70页 |
| 3.5 质谱候选基因功能验证 | 第70-75页 |
| 3.5.1 候选基因表达量分析 | 第70-71页 |
| 3.5.2 功能验证 | 第71-75页 |
| 4 讨论 | 第75-81页 |
| 4.1 SOBIR1进化保守 | 第75-76页 |
| 4.2 酵母杂交及免疫沉淀假阳性 | 第76-77页 |
| 4.3 SOBIR1自激活 | 第77-78页 |
| 4.4 SOBIR1下游途径 | 第78页 |
| 4.5 假阳性基因功能讨论 | 第78-79页 |
| 4.6 主要创新点 | 第79页 |
| 4.7 今后研究的方向与目标 | 第79-81页 |
| 5 结论 | 第81-82页 |
| 致谢 | 第82-83页 |
| 参考文献 | 第83-94页 |
| 攻读博士学位期间发表的学术论文 | 第94页 |
