| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-21页 |
| 1.1 蜡样芽孢杆菌概述 | 第11-12页 |
| 1.2 乙烯对植物生长的影响 | 第12-14页 |
| 1.2.1 乙烯的生物合成 | 第12-13页 |
| 1.2.2 逆境胁迫下植物体内乙烯的变化 | 第13-14页 |
| 1.2.3 乙烯促进植物凋亡 | 第14页 |
| 1.3 ACC脱氨酶及其应用 | 第14-18页 |
| 1.3.1 ACC脱氨酶 | 第14-15页 |
| 1.3.2 ACC脱氨酶活性影响因素 | 第15页 |
| 1.3.3 ACC脱氨酶的应用 | 第15-18页 |
| 1.4 烟草耐盐性概述 | 第18-19页 |
| 1.5 研究目的意义 | 第19-21页 |
| 第二章 蜡样芽胞杆菌acdS超表达载体构建与转化 | 第21-41页 |
| 2.1 Gateway技术与叶盘法 | 第21-24页 |
| 2.1.1 Gateway技术概述 | 第21-23页 |
| 2.1.2 叶盘法转化烟草概述 | 第23-24页 |
| 2.2 acdS基因克隆及表达载体构建 | 第24-31页 |
| 2.2.1 实验材料 | 第24-25页 |
| 2.2.2 acdS目的基因克隆 | 第25-27页 |
| 2.2.3 Gateway技术之入门载体构建 | 第27-29页 |
| 2.2.4 Gateway技术之表达载体构建 | 第29-30页 |
| 2.2.5 pMDC 45-acdS表达载体转化农杆菌 | 第30-31页 |
| 2.3 烟草遗传转化体系建立 | 第31-32页 |
| 2.3.1 烟草无菌苗的获得 | 第31-32页 |
| 2.3.2 烟草愈伤及根潮霉素选择 | 第32页 |
| 2.3.3 烟草愈伤及头孢霉素选择 | 第32页 |
| 2.4 转基因烟草的获得 | 第32-33页 |
| 2.5 结果与讨论 | 第33-41页 |
| 2.5.1 acdS目的基因克隆 | 第33页 |
| 2.5.2 pMDC 45-acdS表达载体构建 | 第33-35页 |
| 2.5.3 pMDC 45-acdS转化农杆菌GV3101 | 第35页 |
| 2.5.4 目的蛋白三维结构预测 | 第35-38页 |
| 2.5.5 烟草抗生素敏感性实验结果 | 第38-39页 |
| 2.5.6 转基因烟草的获得 | 第39-41页 |
| 第三章 转acdS基因烟草筛选及分子生物学鉴定 | 第41-51页 |
| 3.1 转acdS基因烟草DNA水平验证 | 第41-43页 |
| 3.2 转acdS基因烟草RNA水平验证 | 第43-44页 |
| 3.3 转acdS基因烟草表达产物验证 | 第44-47页 |
| 3.3.1 烟草蛋白质提取及定量 | 第44页 |
| 3.3.2 SDS-PAGE及免疫印迹 | 第44-47页 |
| 3.4 荧光显微镜观察融合基因的表达 | 第47-48页 |
| 3.4.1 临时切片的制作 | 第47页 |
| 3.4.2 荧光显微镜观察 | 第47-48页 |
| 3.5 结果与讨论 | 第48-51页 |
| 3.5.1 PCR结果分析 | 第48页 |
| 3.5.2 RT-PCR结果分析 | 第48-49页 |
| 3.5.3 Western blot结果分析 | 第49-50页 |
| 3.5.4 荧光显微镜观测 | 第50-51页 |
| 第四章 转acdS基因烟草耐盐性测定 | 第51-67页 |
| 4.1 盐处理下生长指标测定 | 第51页 |
| 4.2 盐处理下生根率测定 | 第51-52页 |
| 4.3 盐处理下生理指标测定 | 第52-56页 |
| 4.3.1 叶绿素含量测定 | 第52页 |
| 4.3.2 脯氨酸含量测定 | 第52-54页 |
| 4.3.3 保护酶活性测定 | 第54-56页 |
| 4.4 acdS基因与ACC脱氨酶功能性验证 | 第56-57页 |
| 4.5 结果与讨论 | 第57-67页 |
| 4.5.1 盐处理下生长指标分析 | 第57-59页 |
| 4.5.2 盐处理下转基因烟草与未转化烟草生根率一致 | 第59-61页 |
| 4.5.3 盐处理下生理指标分析 | 第61-65页 |
| 4.5.4 acdS基因相关功能验证 | 第65-67页 |
| 第五章 结论与讨论 | 第67-71页 |
| 5.1 结论 | 第67-68页 |
| 5.2 讨论 | 第68-71页 |
| 主要试剂配置 | 第71-75页 |
| 主要试剂 | 第71-72页 |
| 试剂配方 | 第72-75页 |
| 参考文献 | 第75-82页 |
| 附录 | 第82-83页 |
| 个人简历 | 第83-85页 |
| 致谢 | 第85页 |
