| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 第一章 研究背景概述 | 第10-18页 |
| 1.1 单质硫的氧化机制是嗜酸性喜温硫杆菌研究中的重要课题 | 第10-11页 |
| 1.2 嗜酸性喜温硫杆菌的硫代谢研究进展 | 第11-13页 |
| 1.3 谷胱甘肽还原酶的功能研究 | 第13-16页 |
| 1.4 喜温硫杆菌的遗传操作研究 | 第16页 |
| 1.5 本论文的研究目的、内容和意义 | 第16-18页 |
| 第二章 谷胱甘肽还原酶的酶学性质研究 | 第18-34页 |
| 2.1 引言 | 第18页 |
| 2.2 材料与方法 | 第18-26页 |
| 2.2.1 材料 | 第18-19页 |
| 2.2.2 培养基和培养条件 | 第19-20页 |
| 2.2.3 试剂与仪器 | 第20-21页 |
| 2.2.4 常规分子生物学实验技术 | 第21-26页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第26-33页 |
| 2.3.1 谷胱甘肽还原酶(Glutathione reductase,GR)的表达及酶活测定 | 第26-30页 |
| 2.3.2 A.caldus中GR的生物信息学分析 | 第30-33页 |
| 2.4 本章小结 | 第33-34页 |
| 第三章 谷胱甘肽还原酶基因敲除菌株、回补菌株及过表达工程菌株的构建 | 第34-56页 |
| 3.1 引言 | 第34-35页 |
| 3.2 材料与方法 | 第35-43页 |
| 3.2.1 菌株与质粒 | 第35-36页 |
| 3.2.2 培养基和培养条件 | 第36页 |
| 3.2.3 试剂和仪器 | 第36-38页 |
| 3.2.4 基因敲除流程图 | 第38-39页 |
| 3.2.5 过表达工程菌构建流程 | 第39-40页 |
| 3.2.6 E. coli与A. caldus的接合转移 | 第40-41页 |
| 3.2.7 Southern blot | 第41-43页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第43-53页 |
| 3.3.1 谷胱甘肽还原酶基因的无痕敲除 | 第43-49页 |
| 3.3.2 A.caldus gr回补菌株的构建 | 第49-51页 |
| 3.3.3 过表达工程菌株的构建 | 第51-53页 |
| 3.4 本章小结 | 第53-56页 |
| 第四章 敲除株、回补菌株与野生株的生长性状及谷胱甘肽还原酶的功能研究 | 第56-74页 |
| 4.1 引言 | 第56页 |
| 4.2 材料与方法 | 第56-61页 |
| 4.2.1 菌株和质粒 | 第56页 |
| 4.2.2 培养基与培养条件 | 第56页 |
| 4.2.3 试剂与仪器 | 第56-58页 |
| 4.2.4 生长曲线测定 | 第58页 |
| 4.2.5 A.caldus总RNA的提取 | 第58-61页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第61-73页 |
| 4.3.1 S~0为硫源培养时,野生株、突变株与回补株的生长情况 | 第61-62页 |
| 4.3.2 不同浓度锌离子刺激下菌株的表型分析 | 第62-65页 |
| 4.3.3 不同浓度铜离子刺激下菌株的表型分析 | 第65-66页 |
| 4.3.4 不同浓度盐离子刺激下菌株的表型分析 | 第66-67页 |
| 4.3.5 S~0培养下A.caldus MTH-04相关基因表达水平的影响 | 第67-70页 |
| 4.3.6 金属离子刺激时A.caldus MTH-04相关基因表达水平的影响 | 第70-73页 |
| 4.4 本章小结 | 第73-74页 |
| 全文总结与展望 | 第74-76页 |
| 主要参考文献 | 第76-84页 |
| 致谢 | 第84-85页 |
| 附件 | 第85页 |
