摘要 | 第6-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
缩略语一览表 | 第9-10页 |
第一章 绪论 | 第10-30页 |
1.1 放线菌 | 第10-11页 |
1.2 海洋放线菌 | 第11-20页 |
1.2.1 海洋放线菌简介 | 第12-14页 |
1.2.2 海洋放线菌的次级代谢产物 | 第14-20页 |
1.2.3 海洋放线菌及其次级代谢产物研究现状 | 第20页 |
1.3 双信号转导系统 | 第20-27页 |
1.3.1 双组分信号转导系统简介 | 第21-24页 |
1.3.2 双组分信号转导系统作用 | 第24-25页 |
1.3.3 组分信号转导系统研究现状 | 第25-27页 |
1.4 本研究的选题意义 | 第27-28页 |
1.5 本研究的主要内容及技术路线 | 第28-30页 |
1.5.1 研究内容 | 第28-29页 |
1.5.2 技术路线 | 第29-30页 |
第二章 海洋放线菌的分离与筛选 | 第30-46页 |
2.1 引言 | 第30-31页 |
2.2 实验材料 | 第31-35页 |
2.2.1 土壤样品 | 第31页 |
2.2.2 实验菌株 | 第31-32页 |
2.2.3 主要试剂与溶液 | 第32-33页 |
2.2.4 培养基 | 第33-35页 |
2.3 实验方法 | 第35-39页 |
2.3.1 土样的预处理 | 第35页 |
2.3.2 放线菌的分离筛选 | 第35页 |
2.3.3 放线菌孢子的培养与保存 | 第35页 |
2.3.4 放线菌16S rDNA的分类鉴定 | 第35-39页 |
2.3.5 链霉菌生物活性的检测 | 第39页 |
2.4 实验结果与讨论 | 第39-44页 |
2.4.1 筛选到的菌株信息及生长状况 | 第39-41页 |
2.4.2 菌株的形态观察 | 第41-42页 |
2.4.3 生物活性测定 | 第42-44页 |
2.5 本章小结 | 第44-46页 |
第三章 链霉菌TVG-purple双组份信号转导系统功能的研究 | 第46-64页 |
3.1 引言 | 第46-47页 |
3.2 实验材料 | 第47-48页 |
3.2.1 实验质粒 | 第47页 |
3.2.2 实验菌株 | 第47页 |
3.2.3 培养基 | 第47-48页 |
3.2.4 主要试剂与溶液 | 第48页 |
3.3 实验方法 | 第48-55页 |
3.3.1 链霉菌文库杂交膜的制备 | 第48-50页 |
3.3.2 链霉菌基因文库杂交 | 第50-51页 |
3.3.3 链霉菌双组分信号转导系统的敲除 | 第51-54页 |
3.3.4 链霉菌与重组大肠杆菌跨属接合转移 | 第54-55页 |
3.3.5 缺失型突变菌株的筛选与鉴定 | 第55页 |
3.4 实验结果与讨论 | 第55-63页 |
3.4.1 TVG-purple菌株基因文库的构建 | 第55-56页 |
3.4.2 利用地高辛标记的探针与基因文库杂交的实验结果 | 第56-57页 |
3.4.3 酶切及再杂交验证结果 | 第57-58页 |
3.4.4 根据再筛选结果确定阳性克隆 | 第58页 |
3.4.5 替换目的基因4275/76的Marker基因的PCR克隆结果 | 第58-59页 |
3.4.6 19 | 第59-60页 |
3.4.7 PCR-targeting验证结果 | 第60-61页 |
3.4.8 敲除质粒电转化到ET12567(pUZ8002)中PCR验证结果 | 第61-62页 |
3.4.9 缺失突变菌株TVG-purple(Δ4275/76)PCR验证结果 | 第62-63页 |
3.5 本章小结 | 第63-64页 |
第四章 总结与展望 | 第64-66页 |
4.1 总结 | 第64-65页 |
4.2 展望 | 第65-66页 |
参考文献 | 第66-76页 |
附录 | 第76-82页 |
致谢 | 第82-83页 |
附件 | 第83页 |