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基于TILLING的小麦淀粉合成关键基因突变体发掘与表达分析

摘要第6-7页
英文摘要第7页
英文缩略表第11-12页
第一章 引言第12-22页
    1.1 TILLING技术的建立与原理第12-13页
        1.1.1 TILLING技术的建立第12页
        1.1.2 TILLING技术的原理与主要诱变方法第12-13页
    1.2 TILLING技术的发展第13-15页
        1.2.1 多样化的点突变检测方法第13-14页
        1.2.2 生物信息学工具第14页
        1.2.3 EcoTILLING和De-TILLING第14-15页
    1.3 TILLING技术的应用第15-16页
        1.3.1 TILLING技术在基因功能研究中的应用第15-16页
        1.3.2 TILLING技术在作物遗传改良中的应用第16页
    1.4 小麦淀粉第16-17页
        1.4.1 小麦淀粉的结构第16-17页
        1.4.2 小麦淀粉的理化特性第17页
    1.5 淀粉生物合成第17-20页
        1.5.1 淀粉合成途径第17-18页
        1.5.2 小麦淀粉合成关键酶第18-20页
    1.6 本研究的目的与内容第20-22页
        1.6.1 研究目的与意义第20页
        1.6.2 已有工作基础第20页
        1.6.3 研究内容与目标第20-22页
第二章 小麦SSⅣ基因的突变体筛选第22-29页
    2.1 实验材料第22页
    2.2 实验方法第22-26页
        2.2.1 叶片DNA的提取第22-23页
        2.2.2 DNA混合池的构建第23页
        2.2.3 目的基因片段的引物设计与筛选第23-24页
        2.2.4 PCR扩增第24页
        2.2.5 CELⅠ酶切体系第24页
        2.2.6 变性聚丙稀酰胺凝胶电泳第24-25页
        2.2.7 突变测序分析第25-26页
    2.3 结果与分析第26-28页
    2.4 小结第28-29页
第三章 突变体基因型检测和基因表达分析第29-40页
    3.1 实验材料第29-30页
    3.2 实验方法第30-33页
        3.2.1 叶片DNA的提取和TILLING检测第30页
        3.2.2 总RNA的提取与反转录第30-31页
        3.2.3 单克隆测序第31-33页
        3.2.4 基因表达差异分析第33页
        3.2.5 淀粉含量的测定第33页
    3.3 结果与分析第33-39页
        3.3.1 SSⅣ基因的突变体基因型检测与基因表达分析第33-36页
        3.3.2 Agp2B基因的突变体基因型检测与基因功能分析第36-38页
        3.3.3 Wx-A1、SSII-A、SSII-B及SBE1基因的突变体基因型检测第38-39页
    3.4 小结第39-40页
第四章 讨论与结论第40-43页
    4.1 讨论第40-42页
        4.1.1 突变株的基因型第40页
        4.1.2 点突变对基因转录的影响第40-41页
        4.1.3 点突变引发可变剪接第41页
        4.1.4 Agp2B基因对淀粉合成的影响第41-42页
        4.1.5 SSⅣ基因的后续研究安排第42页
    4.2 结论第42-43页
参考文献第43-50页
致谢第50-51页
作者简历第51页

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