摘要 | 第6-7页 |
英文摘要 | 第7页 |
英文缩略表 | 第11-12页 |
第一章 引言 | 第12-22页 |
1.1 TILLING技术的建立与原理 | 第12-13页 |
1.1.1 TILLING技术的建立 | 第12页 |
1.1.2 TILLING技术的原理与主要诱变方法 | 第12-13页 |
1.2 TILLING技术的发展 | 第13-15页 |
1.2.1 多样化的点突变检测方法 | 第13-14页 |
1.2.2 生物信息学工具 | 第14页 |
1.2.3 EcoTILLING和De-TILLING | 第14-15页 |
1.3 TILLING技术的应用 | 第15-16页 |
1.3.1 TILLING技术在基因功能研究中的应用 | 第15-16页 |
1.3.2 TILLING技术在作物遗传改良中的应用 | 第16页 |
1.4 小麦淀粉 | 第16-17页 |
1.4.1 小麦淀粉的结构 | 第16-17页 |
1.4.2 小麦淀粉的理化特性 | 第17页 |
1.5 淀粉生物合成 | 第17-20页 |
1.5.1 淀粉合成途径 | 第17-18页 |
1.5.2 小麦淀粉合成关键酶 | 第18-20页 |
1.6 本研究的目的与内容 | 第20-22页 |
1.6.1 研究目的与意义 | 第20页 |
1.6.2 已有工作基础 | 第20页 |
1.6.3 研究内容与目标 | 第20-22页 |
第二章 小麦SSⅣ基因的突变体筛选 | 第22-29页 |
2.1 实验材料 | 第22页 |
2.2 实验方法 | 第22-26页 |
2.2.1 叶片DNA的提取 | 第22-23页 |
2.2.2 DNA混合池的构建 | 第23页 |
2.2.3 目的基因片段的引物设计与筛选 | 第23-24页 |
2.2.4 PCR扩增 | 第24页 |
2.2.5 CELⅠ酶切体系 | 第24页 |
2.2.6 变性聚丙稀酰胺凝胶电泳 | 第24-25页 |
2.2.7 突变测序分析 | 第25-26页 |
2.3 结果与分析 | 第26-28页 |
2.4 小结 | 第28-29页 |
第三章 突变体基因型检测和基因表达分析 | 第29-40页 |
3.1 实验材料 | 第29-30页 |
3.2 实验方法 | 第30-33页 |
3.2.1 叶片DNA的提取和TILLING检测 | 第30页 |
3.2.2 总RNA的提取与反转录 | 第30-31页 |
3.2.3 单克隆测序 | 第31-33页 |
3.2.4 基因表达差异分析 | 第33页 |
3.2.5 淀粉含量的测定 | 第33页 |
3.3 结果与分析 | 第33-39页 |
3.3.1 SSⅣ基因的突变体基因型检测与基因表达分析 | 第33-36页 |
3.3.2 Agp2B基因的突变体基因型检测与基因功能分析 | 第36-38页 |
3.3.3 Wx-A1、SSII-A、SSII-B及SBE1基因的突变体基因型检测 | 第38-39页 |
3.4 小结 | 第39-40页 |
第四章 讨论与结论 | 第40-43页 |
4.1 讨论 | 第40-42页 |
4.1.1 突变株的基因型 | 第40页 |
4.1.2 点突变对基因转录的影响 | 第40-41页 |
4.1.3 点突变引发可变剪接 | 第41页 |
4.1.4 Agp2B基因对淀粉合成的影响 | 第41-42页 |
4.1.5 SSⅣ基因的后续研究安排 | 第42页 |
4.2 结论 | 第42-43页 |
参考文献 | 第43-50页 |
致谢 | 第50-51页 |
作者简历 | 第51页 |