| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 缩略表 | 第17-18页 |
| 第一章 前言 | 第18-35页 |
| 1.1 肺癌现状 | 第18-19页 |
| 1.1.1 国内外肺癌研究背景 | 第18-19页 |
| 1.1.2 云南当地肺癌研究背景 | 第19页 |
| 1.2 肺癌诊断标准 | 第19-24页 |
| 1.2.1 肺癌分类 | 第19-22页 |
| 1.2.2 肺癌分期 | 第22-24页 |
| 1.3 肺癌病因的高危因素 | 第24-25页 |
| 1.4 肺癌发生机制 | 第25-28页 |
| 1.4.1 DNA甲基化与肿瘤发生 | 第26-27页 |
| 1.4.2 DNA甲基化的重要性 | 第27-28页 |
| 1.5 DNA甲基化检测技术 | 第28-32页 |
| 1.5.1 特异位点的甲基化检测 | 第28-31页 |
| 1.5.2 全基因组的甲基化分析 | 第31-32页 |
| 1.6 基因DNA甲基化位点筛选 | 第32-34页 |
| 1.6.1 与肺癌相关基因的异常DNA甲基化 | 第32-33页 |
| 1.6.2 与环境暴露因素(吸烟)相关基因的异常DNA甲基化 | 第33-34页 |
| 1.7 研究目的与意义 | 第34-35页 |
| 第二章 肺癌DNA甲基化测定 | 第35-62页 |
| 2.1 实验材料 | 第35-38页 |
| 2.1.1 实验样本 | 第35页 |
| 2.1.2 主要仪器 | 第35-37页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第37-38页 |
| 2.2 患者全血样本收集及预处理 | 第38页 |
| 2.3 DNA提取及核酸定量 | 第38-44页 |
| 2.3.1 A549细胞系DNA提取 | 第38-42页 |
| 2.3.2 全血白细胞DNA提取 | 第42-43页 |
| 2.3.3 核酸定量 | 第43-44页 |
| 2.4 引物设计及合成 | 第44-46页 |
| 2.4.1 普通PCR引物设计 | 第44-45页 |
| 2.4.2 qPCR引物设计 | 第45-46页 |
| 2.5 重亚硫酸盐转化 | 第46-47页 |
| 2.6 q-MSP实验(荧光定量PCR绝对定量法) | 第47-61页 |
| 2.6.1 绝对定量标准品模板制备 | 第47-52页 |
| 2.6.2 荧光定量PCR绝对定量标准品制备 | 第52-58页 |
| 2.6.3 荧光定量PCR绝对定量 | 第58-61页 |
| 2.7 SPSS软件处理、分析数据 | 第61-62页 |
| 第三章 实验结果与分析 | 第62-80页 |
| 3.1 临床信息整理 | 第62-64页 |
| 3.1.1 样本信息汇总 | 第62-64页 |
| 3.2 全血样本DNA提取 | 第64页 |
| 3.3 阳性克隆鉴定结果 | 第64-68页 |
| 3.3.1 普通PCR琼脂糖凝胶电泳鉴定 | 第64-66页 |
| 3.3.2 阳性克隆进一步测序结果 | 第66-68页 |
| 3.4 肺癌患者中APC、PCDH20、RUNX3基因的DNA甲基化变化 | 第68-69页 |
| 3.5 不同地区患者中APC、PCDH20、RUNX3三个基因的DNA甲基化变化 | 第69-71页 |
| 3.5.1 三个基因的DNA甲基化变化与地区分布的关系 | 第69-70页 |
| 3.5.2 肺癌患者中RUNX3基因的DNA甲基化变化与地区分布的关系 | 第70-71页 |
| 3.6 烟煤燃烧对APC、PCDH20、RUNX3甲基化变化的影响 | 第71-74页 |
| 3.6.1 烟煤燃烧对三个基因的DNA甲基化变化的影响 | 第71-73页 |
| 3.6.2 烧煤年限对三个基因的DNA甲基化变化的影响 | 第73-74页 |
| 3.7 吸烟对APC、PCDH20、RUNX3基因的DNA甲基化影响 | 第74-77页 |
| 3.7.1 三个基因在吸烟者与非吸烟者中的DNA甲基化比较 | 第74-75页 |
| 3.7.2 三个基因在不同地区中吸烟者与非吸烟者中的DNA甲基化变化 | 第75-76页 |
| 3.7.3 三个基因在宣威地区中烟煤燃烧实验组里吸烟者与不吸烟者的DNA甲基化比较 | 第76-77页 |
| 3.8 RUNX3基因与各临床信息联合分析 | 第77-80页 |
| 3.8.1 RUNX3基因在性别的DNA甲基化变化 | 第77-78页 |
| 3.8.2 RUNX3基因在肺癌分型的DNA甲基化情况 | 第78页 |
| 3.8.3 RUNX3基因在肺癌分期中的DNA甲基化情况 | 第78-79页 |
| 3.8.4 RUNX3在不同地区中男性、女性的DNA甲基化变化 | 第79-80页 |
| 第四章 讨论 | 第80-82页 |
| 第五章 总结与展望 | 第82-84页 |
| 5.1 总结 | 第82页 |
| 5.2 展望 | 第82-84页 |
| 致谢 | 第84-86页 |
| 参考文献 | 第86-91页 |
| 附录A 攻读硕士期间发表论文 | 第91页 |
