| 摘要 | 第4-6页 |
| abstract | 第6-7页 |
| 英文缩写和中英文对照表 | 第9-12页 |
| 第一章 引言 | 第12-23页 |
| 1.1 RNAi的研究概况 | 第12-16页 |
| 1.1.1 RNAi的发现 | 第12页 |
| 1.1.2 RNAi的基本原理 | 第12-15页 |
| 1.1.3 RNAi过程相关酶 | 第15-16页 |
| 1.2 RNAi技术在植物抗虫基因工程中的应用 | 第16-18页 |
| 1.2.1 植物抗虫基因工程的研究 | 第16-17页 |
| 1.2.2 植物病毒载体在RNAi中的应用 | 第17-18页 |
| 1.3 RNAi在昆虫研究领域的应用 | 第18-22页 |
| 1.3.1 昆虫RNAi | 第18-19页 |
| 1.3.2 利用RNAi控制农业害虫 | 第19-20页 |
| 1.3.3 dsRNA的摄取 | 第20-21页 |
| 1.3.4 dsRNA饲喂昆虫 | 第21-22页 |
| 1.4 研究目的及意义 | 第22-23页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第23-36页 |
| 2.1 实验材料 | 第23-26页 |
| 2.1.1 植物材料及昆虫饲养 | 第23页 |
| 2.1.2 病毒载体及昆虫饲喂实验 | 第23页 |
| 2.1.3 人工饲料及配制 | 第23-24页 |
| 2.1.4 引物序列 | 第24-26页 |
| 2.2 实验方法 | 第26-36页 |
| 2.2.1 克隆及鉴定目的基因 | 第26-29页 |
| 2.2.2 TMV病毒表达载体的构建 | 第29-32页 |
| 2.2.3 农杆菌转化重组质粒 | 第32-33页 |
| 2.2.4 TMV重组质粒侵染本氏烟草 | 第33-34页 |
| 2.2.5 本氏烟草饲喂玉米粘虫 | 第34页 |
| 2.2.6 dsRNA合成及玉米粘虫饲喂实验 | 第34页 |
| 2.2.7 RT-PCR检测基因沉默效率 | 第34页 |
| 2.2.8 地高辛标记(DIG)的Northern杂交分析 | 第34-36页 |
| 第三章 结果与分析 | 第36-49页 |
| 3.1 干扰基因片段的克隆 | 第36-37页 |
| 3.1.1 靶标基因的PCR扩增 | 第36页 |
| 3.1.2 pGM-T重组质粒的筛选 | 第36-37页 |
| 3.1.3 酶切检测pGM-T重组质粒 | 第37页 |
| 3.2 重组病毒表达载体的构建 | 第37-39页 |
| 3.2.1 TMV重组质粒的筛选 | 第37-38页 |
| 3.2.2 TMV重组质粒的酶切鉴定 | 第38-39页 |
| 3.3 农杆菌转化子的筛选 | 第39-40页 |
| 3.3.1 PCR检测农杆菌转化子 | 第39-40页 |
| 3.4 dsRNA的制备和检测 | 第40页 |
| 3.5 饲喂玉米黏虫 | 第40-41页 |
| 3.6 受试玉米黏虫的体重及死亡率统计 | 第41-44页 |
| 3.6.1 本氏烟草饲喂后的玉米黏虫的体重变化 | 第41-42页 |
| 3.6.2 本氏烟草饲喂后的玉米黏虫的死亡率统计 | 第42页 |
| 3.6.3 dsRNA饲喂后的玉米黏虫的体重变化 | 第42-43页 |
| 3.6.4 dsRNA饲喂后的玉米黏虫死亡率统计 | 第43-44页 |
| 3.7 受试玉米黏虫的表型变化 | 第44-45页 |
| 3.8 受试昆虫靶标基因表达量的检测 | 第45-47页 |
| 3.8.1 chitinase1基因表达量的变化 | 第45-46页 |
| 3.8.2 chitinase2基因表达量的变化 | 第46-47页 |
| 3.9 受试玉米黏虫体内靶标基因对应的siRNA的检测 | 第47-49页 |
| 第四章 讨论与结论 | 第49-51页 |
| 4.1 讨论 | 第49-50页 |
| 4.2 结论 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-60页 |
| 致谢 | 第60页 |