| 致谢 | 第5-6页 |
| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-11页 |
| 第一章 引言 | 第16-33页 |
| 1.1 概述 | 第16-17页 |
| 1.2 辐射敏感性的相关因素 | 第17-24页 |
| 1.2.1 DNA的损伤与修复 | 第17-20页 |
| 1.2.2 端粒及端粒酶 | 第20页 |
| 1.2.3 抗氧化酶水平 | 第20-22页 |
| 1.2.4 细胞周期调控 | 第22-23页 |
| 1.2.5 细胞凋亡 | 第23页 |
| 1.2.6 其它 | 第23-24页 |
| 1.3 DNA损伤修复相关蛋白 | 第24-28页 |
| 1.3.1 同源重组途径中主要蛋白 | 第24-25页 |
| 1.3.2 非同源末端连接途径中的主要蛋白 | 第25页 |
| 1.3.3 参与同源重组途径和非同源末端连接途径的蛋白 | 第25页 |
| 1.3.4 错配修复家族蛋白 | 第25-28页 |
| 1.4 错配修复基因MSH2的结构和功能 | 第28-32页 |
| 1.4.1 MSH2的结构 | 第28-29页 |
| 1.4.2 MSH2在肿瘤细胞中表达 | 第29页 |
| 1.4.3 MSH2在DNA损伤修复中的作用 | 第29页 |
| 1.4.4 MSH2在肿瘤细胞凋亡中的作用 | 第29-30页 |
| 1.4.5 MSH2与端粒酶 | 第30-31页 |
| 1.4.6 MSH2与ROS | 第31-32页 |
| 1.5 研究目的及意义 | 第32-33页 |
| 第二章 X射线及重离子辐照对HepG2细胞MSH2表达及生物学效应影响 | 第33-50页 |
| 2.1 实验目的 | 第33-34页 |
| 2.2 实验材料与方法 | 第34-40页 |
| 2.2.1 实验材料 | 第34页 |
| 2.2.2 实验方法和步骤 | 第34-40页 |
| 2.3 实验结果 | 第40-48页 |
| 2.3.1 形态学变化 | 第40-42页 |
| 2.3.2 细胞存活曲线 | 第42-44页 |
| 2.3.3 细胞周期 | 第44-45页 |
| 2.3.4 MSH2参与重离子辐照后肝癌HepG2细胞核中DNA损伤修复 | 第45-47页 |
| 2.3.5 mRNA水平上MSH2表达的差异 | 第47页 |
| 2.3.6 蛋白水平上MSH2表达的差异 | 第47-48页 |
| 2.4 讨论 | 第48-50页 |
| 第三章 抑制MSH2表达提高HepG2细胞碳离子辐射敏感性 | 第50-65页 |
| 3.1 实验目的 | 第50-51页 |
| 3.2 实验材料与方法 | 第51-55页 |
| 3.2.1 实验材料 | 第51页 |
| 3.2.2 寡核苷酸合成 | 第51页 |
| 3.2.3 分组 | 第51-52页 |
| 3.2.4 转染 | 第52页 |
| 3.2.5 siRNA抑制MSH2表达效果检测 | 第52-53页 |
| 3.2.6 Western Blotting检测 | 第53页 |
| 3.2.7 辐照 | 第53页 |
| 3.2.8 周期检测 | 第53页 |
| 3.2.9 克隆存活检测 | 第53-54页 |
| 3.2.10 MTT检测 | 第54页 |
| 3.2.11 流式细胞术检测细胞凋亡 | 第54页 |
| 3.2.12 Western Blotting检测凋亡蛋白 | 第54-55页 |
| 3.2.13 统计学分析 | 第55页 |
| 3.3 实验结果 | 第55-64页 |
| 3.3.1 realtime PCR检测目的基因表达 | 第55-56页 |
| 3.3.2 Western Blotting检测目的基因的表达 | 第56-57页 |
| 3.3.3 下调MSH2对HepG2细胞增殖及克隆形成能力的影响 | 第57-58页 |
| 3.3.4 MSH2抑制后肝癌HepG2细胞对放射线的敏感性变化 | 第58-59页 |
| 3.3.5 MSH2抑制后对肝癌HepG2细胞存活率的影响 | 第59-61页 |
| 3.3.6 转染细胞的周期检测 | 第61-62页 |
| 3.3.7 MSH2抑制后细胞凋亡的变化 | 第62-63页 |
| 3.3.8 p53信号通路的作用 | 第63-64页 |
| 3.4 讨论 | 第64-65页 |
| 第四章 端粒酶活性通过线粒体影响癌细胞重离子辐射敏感性 | 第65-75页 |
| 4.1 实验目的 | 第65页 |
| 4.2 实验材料与方法 | 第65-69页 |
| 4.2.1 实验材料 | 第65-66页 |
| 4.2.2 实验方法 | 第66-69页 |
| 4.3 实验结果 | 第69-73页 |
| 4.3.1 重离子辐射引起hTERT下调，端粒酶活性被抑制 | 第69页 |
| 4.3.2 端粒酶抑制剂使人乳腺癌MCF-7 细胞辐射性敏感性增加 | 第69-71页 |
| 4.3.3 重离子在端粒酶抑制剂作用下细胞周期的再分布 | 第71页 |
| 4.3.4 端粒酶活性及重离子辐射影响线粒体功能 | 第71-72页 |
| 4.3.5 重离子辐射引起线粒体功能障碍介导的肿瘤细胞老化 | 第72-73页 |
| 4.4 讨论 | 第73-75页 |
| 第五章 NADPH氧化酶与肝癌细胞HepG2重离子辐射敏感性关系 | 第75-82页 |
| 5.1 实验目的： | 第75页 |
| 5.2 实验材料与方法 | 第75-77页 |
| 5.2.1 主要材料 | 第75页 |
| 5.2.2 主要试剂 | 第75-76页 |
| 5.2.3 细胞辐照 | 第76页 |
| 5.2.4 Western Blotting检测 | 第76页 |
| 5.2.5 活性氧检测 | 第76-77页 |
| 5.2.6 细胞生存分析 | 第77页 |
| 5.2.7 激光共聚焦显微镜 | 第77页 |
| 5.2.8 统计学分析 | 第77页 |
| 5.3.结果 | 第77-80页 |
| 5.3.1 NADPH氧化酶参与重离子诱导的细胞死亡 | 第77-78页 |
| 5.3.2 NADPH氧化酶介导重离子辐射细胞内ROS的产生 | 第78-79页 |
| 5.3.3 ~(12)C~(6+) 诱导细胞膜p47~(phox)转位激活NADPH氧化酶 | 第79页 |
| 5.3.4 重离子上调NOX的表达 | 第79-80页 |
| 5.4 讨论 | 第80-82页 |
| 第六章 结论与展望 | 第82-85页 |
| 6.1 结论 | 第82页 |
| 6.2 展望 | 第82-85页 |
| 参考文献 | 第85-99页 |
| 缩写词表 | 第99-101页 |
| 作者简介及在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第101-102页 |
