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海蕴和锁阳多糖化学结构及生物活性机制研究

致谢第4-7页
中文摘要第7-10页
ABSTRACT第10-13页
缩略词表第14-21页
第一章 引言第21-63页
    第一节 岩藻聚糖和果胶结构生物活性研究进展第22-30页
        1 岩藻聚糖结构生物活性研究进展第22-25页
        2 果胶结构生物活性研究进展第25-30页
    第二节 抗血管生成多糖第30-41页
        1 糖胺聚糖类抗血管生成第32-35页
            1.1 肝素和硫酸乙酰肝素类多糖抗血管生成第32-34页
            1.2 透明质酸抗血管生成第34-35页
        2 岩藻聚糖类抗血管生成第35页
        3 中性糖及其衍生物抗血管生成第35-39页
            3.1 中性糖抗血管生成第35-37页
            3.2 中性糖硫酸化衍生物抗血管生成第37-39页
        4 酸性糖(除糖胺聚糖)抗血管生成第39-40页
            4.1 桔梗酸性多糖第39页
            4.2 丛生大叶藻多糖第39-40页
            4.3 海藻酸钠第40页
        5 碱性壳聚糖抗血管生成第40页
        6 总结第40-41页
    第三节 多糖调节BMP家族的功能第41-54页
        1 BMPs的功能第42-47页
            1.1 BMPs家族概况第42-44页
            1.2 BMPs家族功能第44-46页
            1.3 BMPs信号传导第46-47页
            1.4 BMPs内源性拮抗剂第47页
        2 糖胺聚糖调节BMP信号通路第47-53页
            2.1 肝素和硫酸乙酰肝素调节BMP的活性第47-51页
            2.2 肝素通过与BMP拮抗剂的相互作用调节BMP的活性第51页
            2.3 其他糖胺聚糖调节BMP活性第51-52页
            2.4 糖胺聚糖与BMP结合的结构分析第52-53页
        3 外源性多糖调节BMP活性第53页
        4 总结第53-54页
    第四节 立题依据与研究内容第54-57页
    参考文献第57-63页
第二章 海蕴多糖的化学结构研究第63-98页
    第一节 岩藻聚糖的提取和分离纯化第64-75页
        1 实验材料、试剂和仪器第64-65页
        2 海蕴多糖的提取和分离纯化第65-72页
            2.1 海蕴多糖的提取第65-66页
            2.2 海蕴粗多糖糖组成分析第66-69页
            2.3 海蕴粗多糖红外光谱分析第69-70页
            2.4 海蕴粗多糖NDH分离纯化第70-72页
        3 海蕴均一多糖物理化学性质测定第72-75页
            3.1 纯度和分子量测定方法第72-73页
            3.2 糖醛酸含量的测定方法(间苯基苯酚法)第73页
            3.3 蛋白浓度测定方法第73-74页
            3.4 硫酸基含量测定方法(氯化钡-明胶法)第74-75页
    第二节 岩藻聚糖NDH01的结构解析第75-97页
        1 实验材料、试剂和仪器第75-76页
        2 实验步骤第76-82页
            2.1 分子量及纯度测定第76页
            2.2 硫酸基含量测定第76页
            2.3 红外光谱分析第76页
            2.4 旋光度分析第76-77页
            2.5 糖组成分析第77页
            2.6 岩藻聚糖硫酸酯脱硫酸基反应第77页
            2.7 732 阳离子(H+)交换树脂活化第77页
            2.8 多糖脱乙酰基反应第77-78页
            2.9 糖醛酸还原第78页
            2.10 糖残基连接方式分析第78-81页
            2.11 NMR分析第81页
            2.12 部分酸水解第81-82页
        3 结果与讨论第82-97页
            3.1 化学物理参数的测定第82-83页
            3.2 NDH01脱硫酸基第83-84页
            3.3 NDH01糖醛酸还原第84-85页
            3.4 糖残基连接方式分析第85-86页
            3.5 部分酸水解分析第86-89页
            3.6 NMR分析第89-97页
    参考文献第97-98页
第三章 岩藻聚糖抗血管生成活性及其作用机制研究第98-118页
    第一节 岩藻聚糖NDH01抗血管生成活性及其与BMP4相互作用第99-110页
        1 实验材料、试剂和仪器第99-100页
        2 实验步骤第100-103页
            2.1 HMEC-1 细胞培养第100-101页
            2.2 HMEC-1 细胞管腔形成实验第101页
            2.3 MTT实验第101页
            2.4 划痕愈合实验第101页
            2.5 Western Blotting实验第101-102页
            2.6 RT-PCR实验第102页
            2.7 SPR实验第102-103页
        3 结果与讨论第103-110页
            3.1 NDH01抑制HMEC-1 细胞管腔形成、增殖和迁移第103-105页
            3.2 NDH01下调Smad1/5/8,Erk和FAK的磷酸化第105-106页
            3.3 NDH01下调MBP的表达和抑制BMP/Smad信号通路第106-108页
            3.4 NDH01抑制BMP4引起的管腔形成和Smad1/5/8 磷酸化第108-110页
    第二节 其他岩藻聚糖抗血管生成活性及与BMP,BMPR相互作用第110-117页
        1 实验材料、试剂和仪器第110页
        2 实验步骤第110页
        3 结果与讨论第110-117页
            3.1 NDH231抗血管生成活性及其作用机制第110-114页
            3.2 其他海蕴岩藻聚糖抗血管生成活性及其作用机制第114-117页
    参考文献第117-118页
第四章 岩藻聚糖与BMP2共晶探索研究第118-151页
    1 岩藻寡糖的制备第123-131页
        1.1 实验材料、试剂和仪器第123-124页
        1.2 实验步骤第124-125页
            1.2.1 寡糖降解第124-125页
        1.3 实验结果第125-131页
    2 rh BMP2表达纯化第131-147页
        2.1 实验材料、试剂和仪器第131-135页
        2.2 实验步骤第135-141页
            2.2.1 感受态细胞制备第135页
            2.2.2 BMP2表达质粒构建第135-138页
            2.2.3 BMP2/Pet22b重组质粒小量表达验证第138-141页
            2.2.5 BMP2蛋白活性检测第141页
        2.3 结果与讨论第141-147页
    3 岩藻寡糖与BMP2共晶培养条件探索第147-150页
        3.1 实验材料、试剂和仪器第147-148页
        3.2 实验步骤第148-149页
            3.2.1 晶体培养第148页
            3.2.2 晶体初步X-衍射筛选第148-149页
        3.3 结果和讨论第149-150页
    参考文献第150-151页
第五章 锁阳多糖结构和生物活性研究第151-171页
    第一节 锁阳多糖的提取和分离纯化第153-156页
        1 实验材料、试剂和仪器第153页
        2 海蕴多糖的提取和分离纯化第153-156页
    第二节 锁阳多糖CSW2S2结构解析及其活性测试第156-170页
        1 实验材料、试剂和仪器第156页
        2 实验步骤第156-158页
            2.1 结构解析第156页
            2.2 部分酸水解第156-157页
            2.3 细胞培养第157页
            2.4 MTT测试第157-158页
        3 结果和讨论第158-170页
            3.1 CSW2S2理化参数测定第158-159页
            3.2 糖残基连接方式分析第159-160页
            3.3 部分酸水解分析第160-161页
            3.4 NMR分析第161-164页
            3.5 C3I结构分析第164-167页
            3.6 CSW2S2减少高糖诱导INS-1E细胞凋亡第167-170页
    参考文献第170-171页
第六章 总结与讨论第171-174页
    1 岩藻聚糖结构、生物活性及其与功能性蛋白相互作用研究第171-172页
    2 锁阳多糖结构及其生物活性研究第172页
    3 全文总结第172-174页
附录第174-192页
    附录1 海蕴岩藻聚糖HPLC图谱第174页
    附录2 岩藻聚糖与BMP及BMPR相互作用SPR图谱第174-182页
    附录3 肝素寡糖与GLCE共晶结构解析第182-192页
        1 肝素寡糖的制备第182-190页
            1.1 实验材料、试剂和仪器第182页
            1.2 实验步骤第182-184页
            1.3 结果与讨论第184-190页
        2 肝素寡糖与GLCE共晶解析第190-192页
作者简历第192页

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