致谢 | 第4-7页 |
中文摘要 | 第7-10页 |
ABSTRACT | 第10-13页 |
缩略词表 | 第14-21页 |
第一章 引言 | 第21-63页 |
第一节 岩藻聚糖和果胶结构生物活性研究进展 | 第22-30页 |
1 岩藻聚糖结构生物活性研究进展 | 第22-25页 |
2 果胶结构生物活性研究进展 | 第25-30页 |
第二节 抗血管生成多糖 | 第30-41页 |
1 糖胺聚糖类抗血管生成 | 第32-35页 |
1.1 肝素和硫酸乙酰肝素类多糖抗血管生成 | 第32-34页 |
1.2 透明质酸抗血管生成 | 第34-35页 |
2 岩藻聚糖类抗血管生成 | 第35页 |
3 中性糖及其衍生物抗血管生成 | 第35-39页 |
3.1 中性糖抗血管生成 | 第35-37页 |
3.2 中性糖硫酸化衍生物抗血管生成 | 第37-39页 |
4 酸性糖(除糖胺聚糖)抗血管生成 | 第39-40页 |
4.1 桔梗酸性多糖 | 第39页 |
4.2 丛生大叶藻多糖 | 第39-40页 |
4.3 海藻酸钠 | 第40页 |
5 碱性壳聚糖抗血管生成 | 第40页 |
6 总结 | 第40-41页 |
第三节 多糖调节BMP家族的功能 | 第41-54页 |
1 BMPs的功能 | 第42-47页 |
1.1 BMPs家族概况 | 第42-44页 |
1.2 BMPs家族功能 | 第44-46页 |
1.3 BMPs信号传导 | 第46-47页 |
1.4 BMPs内源性拮抗剂 | 第47页 |
2 糖胺聚糖调节BMP信号通路 | 第47-53页 |
2.1 肝素和硫酸乙酰肝素调节BMP的活性 | 第47-51页 |
2.2 肝素通过与BMP拮抗剂的相互作用调节BMP的活性 | 第51页 |
2.3 其他糖胺聚糖调节BMP活性 | 第51-52页 |
2.4 糖胺聚糖与BMP结合的结构分析 | 第52-53页 |
3 外源性多糖调节BMP活性 | 第53页 |
4 总结 | 第53-54页 |
第四节 立题依据与研究内容 | 第54-57页 |
参考文献 | 第57-63页 |
第二章 海蕴多糖的化学结构研究 | 第63-98页 |
第一节 岩藻聚糖的提取和分离纯化 | 第64-75页 |
1 实验材料、试剂和仪器 | 第64-65页 |
2 海蕴多糖的提取和分离纯化 | 第65-72页 |
2.1 海蕴多糖的提取 | 第65-66页 |
2.2 海蕴粗多糖糖组成分析 | 第66-69页 |
2.3 海蕴粗多糖红外光谱分析 | 第69-70页 |
2.4 海蕴粗多糖NDH分离纯化 | 第70-72页 |
3 海蕴均一多糖物理化学性质测定 | 第72-75页 |
3.1 纯度和分子量测定方法 | 第72-73页 |
3.2 糖醛酸含量的测定方法(间苯基苯酚法) | 第73页 |
3.3 蛋白浓度测定方法 | 第73-74页 |
3.4 硫酸基含量测定方法(氯化钡-明胶法) | 第74-75页 |
第二节 岩藻聚糖NDH01的结构解析 | 第75-97页 |
1 实验材料、试剂和仪器 | 第75-76页 |
2 实验步骤 | 第76-82页 |
2.1 分子量及纯度测定 | 第76页 |
2.2 硫酸基含量测定 | 第76页 |
2.3 红外光谱分析 | 第76页 |
2.4 旋光度分析 | 第76-77页 |
2.5 糖组成分析 | 第77页 |
2.6 岩藻聚糖硫酸酯脱硫酸基反应 | 第77页 |
2.7 732 阳离子(H+)交换树脂活化 | 第77页 |
2.8 多糖脱乙酰基反应 | 第77-78页 |
2.9 糖醛酸还原 | 第78页 |
2.10 糖残基连接方式分析 | 第78-81页 |
2.11 NMR分析 | 第81页 |
2.12 部分酸水解 | 第81-82页 |
3 结果与讨论 | 第82-97页 |
3.1 化学物理参数的测定 | 第82-83页 |
3.2 NDH01脱硫酸基 | 第83-84页 |
3.3 NDH01糖醛酸还原 | 第84-85页 |
3.4 糖残基连接方式分析 | 第85-86页 |
3.5 部分酸水解分析 | 第86-89页 |
3.6 NMR分析 | 第89-97页 |
参考文献 | 第97-98页 |
第三章 岩藻聚糖抗血管生成活性及其作用机制研究 | 第98-118页 |
第一节 岩藻聚糖NDH01抗血管生成活性及其与BMP4相互作用 | 第99-110页 |
1 实验材料、试剂和仪器 | 第99-100页 |
2 实验步骤 | 第100-103页 |
2.1 HMEC-1 细胞培养 | 第100-101页 |
2.2 HMEC-1 细胞管腔形成实验 | 第101页 |
2.3 MTT实验 | 第101页 |
2.4 划痕愈合实验 | 第101页 |
2.5 Western Blotting实验 | 第101-102页 |
2.6 RT-PCR实验 | 第102页 |
2.7 SPR实验 | 第102-103页 |
3 结果与讨论 | 第103-110页 |
3.1 NDH01抑制HMEC-1 细胞管腔形成、增殖和迁移 | 第103-105页 |
3.2 NDH01下调Smad1/5/8,Erk和FAK的磷酸化 | 第105-106页 |
3.3 NDH01下调MBP的表达和抑制BMP/Smad信号通路 | 第106-108页 |
3.4 NDH01抑制BMP4引起的管腔形成和Smad1/5/8 磷酸化 | 第108-110页 |
第二节 其他岩藻聚糖抗血管生成活性及与BMP,BMPR相互作用 | 第110-117页 |
1 实验材料、试剂和仪器 | 第110页 |
2 实验步骤 | 第110页 |
3 结果与讨论 | 第110-117页 |
3.1 NDH231抗血管生成活性及其作用机制 | 第110-114页 |
3.2 其他海蕴岩藻聚糖抗血管生成活性及其作用机制 | 第114-117页 |
参考文献 | 第117-118页 |
第四章 岩藻聚糖与BMP2共晶探索研究 | 第118-151页 |
1 岩藻寡糖的制备 | 第123-131页 |
1.1 实验材料、试剂和仪器 | 第123-124页 |
1.2 实验步骤 | 第124-125页 |
1.2.1 寡糖降解 | 第124-125页 |
1.3 实验结果 | 第125-131页 |
2 rh BMP2表达纯化 | 第131-147页 |
2.1 实验材料、试剂和仪器 | 第131-135页 |
2.2 实验步骤 | 第135-141页 |
2.2.1 感受态细胞制备 | 第135页 |
2.2.2 BMP2表达质粒构建 | 第135-138页 |
2.2.3 BMP2/Pet22b重组质粒小量表达验证 | 第138-141页 |
2.2.5 BMP2蛋白活性检测 | 第141页 |
2.3 结果与讨论 | 第141-147页 |
3 岩藻寡糖与BMP2共晶培养条件探索 | 第147-150页 |
3.1 实验材料、试剂和仪器 | 第147-148页 |
3.2 实验步骤 | 第148-149页 |
3.2.1 晶体培养 | 第148页 |
3.2.2 晶体初步X-衍射筛选 | 第148-149页 |
3.3 结果和讨论 | 第149-150页 |
参考文献 | 第150-151页 |
第五章 锁阳多糖结构和生物活性研究 | 第151-171页 |
第一节 锁阳多糖的提取和分离纯化 | 第153-156页 |
1 实验材料、试剂和仪器 | 第153页 |
2 海蕴多糖的提取和分离纯化 | 第153-156页 |
第二节 锁阳多糖CSW2S2结构解析及其活性测试 | 第156-170页 |
1 实验材料、试剂和仪器 | 第156页 |
2 实验步骤 | 第156-158页 |
2.1 结构解析 | 第156页 |
2.2 部分酸水解 | 第156-157页 |
2.3 细胞培养 | 第157页 |
2.4 MTT测试 | 第157-158页 |
3 结果和讨论 | 第158-170页 |
3.1 CSW2S2理化参数测定 | 第158-159页 |
3.2 糖残基连接方式分析 | 第159-160页 |
3.3 部分酸水解分析 | 第160-161页 |
3.4 NMR分析 | 第161-164页 |
3.5 C3I结构分析 | 第164-167页 |
3.6 CSW2S2减少高糖诱导INS-1E细胞凋亡 | 第167-170页 |
参考文献 | 第170-171页 |
第六章 总结与讨论 | 第171-174页 |
1 岩藻聚糖结构、生物活性及其与功能性蛋白相互作用研究 | 第171-172页 |
2 锁阳多糖结构及其生物活性研究 | 第172页 |
3 全文总结 | 第172-174页 |
附录 | 第174-192页 |
附录1 海蕴岩藻聚糖HPLC图谱 | 第174页 |
附录2 岩藻聚糖与BMP及BMPR相互作用SPR图谱 | 第174-182页 |
附录3 肝素寡糖与GLCE共晶结构解析 | 第182-192页 |
1 肝素寡糖的制备 | 第182-190页 |
1.1 实验材料、试剂和仪器 | 第182页 |
1.2 实验步骤 | 第182-184页 |
1.3 结果与讨论 | 第184-190页 |
2 肝素寡糖与GLCE共晶解析 | 第190-192页 |
作者简历 | 第192页 |