| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-8页 |
| 第一章 前言 | 第8-22页 |
| ·热激蛋白 | 第8-19页 |
| ·热激蛋白的分类 | 第8页 |
| ·热激蛋白的作用 | 第8-9页 |
| ·热激蛋白40 | 第9-13页 |
| ·热激蛋白70 | 第13-17页 |
| ·热激蛋白90 | 第17-19页 |
| ·迟缓爱德华氏菌的研究 | 第19-21页 |
| ·迟缓爱德华氏菌的致病性 | 第19-21页 |
| ·本论文的研究意义及研究目的 | 第21-22页 |
| 第二章 迟缓爱德华氏菌dnaK、dnaJ、htpG的克隆分析及其表达纯化 | 第22-39页 |
| ·材料和方法 | 第22-34页 |
| ·基因克隆 | 第23-29页 |
| ·迟缓爱德华氏菌基因组DNA的提取 | 第23-24页 |
| ·基因的扩增 | 第24-25页 |
| ·基因的序列鉴定和分析 | 第25-29页 |
| ·基因在大肠杆菌中的表达 | 第29-33页 |
| ·表达载体的构建 | 第29-31页 |
| ·重组蛋白的诱导表达 | 第31-32页 |
| ·SDS-PAGE诱导表达结果分析 | 第32-33页 |
| ·重组蛋白的纯化 | 第33-34页 |
| ·结果和讨论 | 第34-39页 |
| ·基因的克隆和序列分析 | 第34页 |
| ·蛋白结构预测 | 第34-37页 |
| ·DnaJ蛋白结构 | 第34-35页 |
| ·DnaK蛋白结构 | 第35-36页 |
| ·HtpG蛋白结构 | 第36-37页 |
| ·蛋白在大肠杆菌中的表达和纯化 | 第37-39页 |
| 第三章 迟缓爱德华氏菌DnaK与HtpG蛋白性质研究 | 第39-71页 |
| ·材料和方法 | 第39-61页 |
| ·HtpG蛋白二聚体状态的鉴定 | 第39页 |
| ·Malachite green assay测定酶活 | 第39-40页 |
| ·最适酶活温度的确定 | 第40-61页 |
| ·材料与方法 | 第61-65页 |
| ·不同温度培养条件下细菌的生长状况 | 第61页 |
| ·对外源性H_2O_2的耐受能力 | 第61-62页 |
| ·插入失活菌株毒力的动物实验检测 | 第62页 |
| ·细菌在血液中的散播 | 第62页 |
| ·对牙鲆的致死率 | 第62页 |
| ·插入失活菌株和野生型菌株与巨噬细胞间的作用 | 第62-65页 |
| ·巨噬细胞的提取及培养 | 第62-63页 |
| ·巨噬细胞的活化 | 第63-64页 |
| ·黏附与侵染巨噬细胞能力的检测 | 第64页 |
| ·插入失活菌株对细胞因子的诱导作用 | 第64-65页 |
| ·结果与讨论 | 第65-71页 |
| ·高温对细菌生长的影响 | 第66-67页 |
| ·对外源性H_2O_2的耐受能力 | 第67页 |
| ·动物实验结果 | 第67-68页 |
| ·侵染巨噬细胞 | 第68-71页 |
| 第七章 rDnaJ和rHtpG的抗原保护效应检测 | 第71-74页 |
| ·材料和方法 | 第71-72页 |
| ·重组蛋白保护效应的检测 | 第71页 |
| ·重组蛋白在牙鲆体内产生特异性抗体的效价检测 | 第71-72页 |
| ·结果和讨论 | 第72-74页 |
| 结论 | 第74-75页 |
| 附录—溶液的配置 | 第75-81页 |
| 参考文献 | 第81-88页 |
| 致谢 | 第88页 |
