| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 文献综述 | 第13-31页 |
| 第一章 Toll样受体介导的天然免疫应答研究进展 | 第13-31页 |
| 1.1 天然免疫概述 | 第13页 |
| 1.2 TLRs介导的抗病毒天然免疫 | 第13-23页 |
| 1.2.1 病毒诱导的TLRs信号通路 | 第14-17页 |
| 1.2.2 TLRs在识别病毒PAMPs中的作用及其介导的抗病毒天然免疫 | 第17-23页 |
| 1.3 TLRs信号通路的调控机制 | 第23-24页 |
| 1.4 病毒逃避TLRs信号通路的机制 | 第24-27页 |
| 1.4.1 降解TLR信号通路关键信号分子 | 第24-25页 |
| 1.4.2 破坏TLRs信号分子间的相互作用 | 第25页 |
| 1.4.3 细胞蛋白的分子模拟 | 第25页 |
| 1.4.4 转录调节 | 第25-26页 |
| 1.4.5 信号分子的去泛素化 | 第26-27页 |
| 1.5 猪瘟病毒调控TLRs信号通路 | 第27-31页 |
| 1.5.1 CSFV基因组结构、组成及功能的主要特征 | 第28页 |
| 1.5.2 CSFV对TLRs介导天然免疫应答的影响 | 第28-31页 |
| 试验研究 | 第31-78页 |
| 第二章 猪瘟病毒石门株和C株对Toll样受体表达影响的比较研究 | 第31-49页 |
| 2.1 材料 | 第32-33页 |
| 2.1.1 细胞与病毒 | 第32页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第32页 |
| 2.1.3 主要仪器设备 | 第32-33页 |
| 2.2 方法 | 第33-36页 |
| 2.2.1 pMDMs的分离与培养 | 第33页 |
| 2.2.2 动物的感染与免疫 | 第33页 |
| 2.2.3 病毒的感染 | 第33页 |
| 2.2.4 实时荧光定量PCR | 第33-35页 |
| 2.2.5 Western blot检测各基因蛋白的表达量 | 第35页 |
| 2.2.6 Flow cytometry检测各基因蛋白的表达量 | 第35页 |
| 2.2.7 ELISA检测细胞因子的蛋白表达量 | 第35-36页 |
| 2.2.8 数据统计分析 | 第36页 |
| 2.3 结果 | 第36-46页 |
| 2.3.1 确定猪瘟病毒感染pMDMs | 第36页 |
| 2.3.2 CSFV石门株和C株感染后TLR基因的表达 | 第36-39页 |
| 2.3.3 CSFV诱导pMDMs中促炎性细胞因子和干扰素的表达 | 第39-41页 |
| 2.3.4 CSFV石门株和C株对TLR信号通路的影响 | 第41-43页 |
| 2.3.5 CSFV石门株调节TLR3介导的天然免疫应答 | 第43-45页 |
| 2.3.6 TLR2、TLR3、TLR4和TLR7的配体对CSFV增殖的影响 | 第45-46页 |
| 2.4 讨论 | 第46-48页 |
| 2.5 小结 | 第48-49页 |
| 第三章 猪瘟病毒石门株对Toll样受体 2、3、4 和7在组织表达中的影响 | 第49-62页 |
| 3.1 材料 | 第50-51页 |
| 3.1.1 动物与病毒 | 第50页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第50页 |
| 3.1.3 主要仪器设备 | 第50-51页 |
| 3.2 方法 | 第51-52页 |
| 3.2.1 动物的感染 | 第51页 |
| 3.2.2 实时荧光定量PCR检测 | 第51页 |
| 3.2.3 Western blot检测各基因蛋白的表达量 | 第51页 |
| 3.2.4 组织学检测IHC染色 | 第51-52页 |
| 3.2.5 数据统计分析 | 第52页 |
| 3.3 结果 | 第52-60页 |
| 3.3.1 确定猪瘟病毒感染各组织的病毒表达量 | 第52-53页 |
| 3.3.2 CSFV感染后临床特征和各组织的病理观察 | 第53页 |
| 3.3.3 CSFV感染后猪各组织中TLR表达水平的变化 | 第53-55页 |
| 3.3.4 IHC染色法分析感染组与对照组中TLR2、TLR3、TLR4和TLR7的表达 | 第55-60页 |
| 3.4 讨论 | 第60-61页 |
| 3.5 小结 | 第61-62页 |
| 第四章 猪瘟病毒非结构蛋白对TLRs介导的天然免疫应答的影响 | 第62-78页 |
| 4.1 材料 | 第63页 |
| 4.1.1 细胞与病毒 | 第63页 |
| 4.1.2 主要试剂 | 第63页 |
| 4.1.3 主要仪器设备 | 第63页 |
| 4.2 方法 | 第63-67页 |
| 4.2.1 过表达猪瘟病毒非结构蛋白慢病毒载体的构建 | 第63-65页 |
| 4.2.2 过表达猪瘟病毒非结构蛋白慢病毒的包装 | 第65页 |
| 4.2.3 慢病毒的感染 | 第65页 |
| 4.2.4 稳定表达猪瘟病毒非结构蛋白细胞系的构建 | 第65-66页 |
| 4.2.5 RT-PCR | 第66页 |
| 4.2.6 实时荧光定量PCR | 第66-67页 |
| 4.2.7 Western blot检测各基因蛋白的表达量 | 第67页 |
| 4.2.8 ELISA检测细胞因子的蛋白表达量 | 第67页 |
| 4.2.9 数据统计分析 | 第67页 |
| 4.3 结果 | 第67-76页 |
| 4.3.1 过表达猪瘟病毒非结构蛋白慢病毒载体的构建 | 第67-68页 |
| 4.3.2 表达猪瘟病毒非结构蛋白慢病毒的包装与慢病毒滴度的确定 | 第68-69页 |
| 4.3.3 猪巨噬细胞中CSFV非结构蛋白表达的确定 | 第69-70页 |
| 4.3.4 CSFV非结构蛋白对巨噬细胞中TLR2、TLR3、TLR4和TLR7表达的影响 | 第70-72页 |
| 4.3.5 CSFV非结构蛋白对巨噬细胞中TLR信号通路关键蛋白的影响 | 第72-73页 |
| 4.3.6 CSFV非结构蛋白对巨噬细胞中TLR信号通路下游免疫效应分子的影响 | 第73-75页 |
| 4.3.7 CSFV非结构蛋白NS3、NS3/4A、NS4B和NS5A对巨噬细胞中TLR3信号通路的影响 | 第75-76页 |
| 4.4 讨论 | 第76-77页 |
| 4.5 小结 | 第77-78页 |
| 结论 | 第78-79页 |
| 本文的创新之处 | 第79-80页 |
| 参考文献 | 第80-94页 |
| 主要缩略词和中英对照表（Abbreviation Index） | 第94-96页 |
| 附录 | 第96-102页 |
| 致谢 | 第102-104页 |
| 作者简介 | 第104页 |
