拟除虫菊酯类农药多残留免疫分析研究
摘要 | 第6-7页 |
ABSTRACT | 第7-8页 |
第一章 文献综述 | 第11-21页 |
1.1 拟除虫菊酯类农药多残留分析研究现状 | 第11-12页 |
1.1.1 拟除虫菊酯类农药及其理化性质 | 第11页 |
1.1.2 农药多残留分析现状 | 第11-12页 |
1.1.3 农药多残留免疫分析技术研究进展 | 第12页 |
1.2 酶联免疫分析技术 | 第12-18页 |
1.2.1 拟除虫菊酯类化合物半抗原设计与合成 | 第12-14页 |
1.2.2 拟除虫菊酯类农药通用人工抗原的制备 | 第14-16页 |
1.2.3 抗体制备技术 | 第16-18页 |
1.3 单链抗体的筛选 | 第18-20页 |
1.3.1 噬菌体展示技术简介 | 第18-19页 |
1.3.2 噬菌体展示技术在抗体筛选中的应用 | 第19-20页 |
1.4 问题的提出与研究内容 | 第20-21页 |
第二章 半抗原及人工抗原的合成与鉴定 | 第21-31页 |
2.1 材料与试剂 | 第21页 |
2.1.1 主要试剂 | 第21页 |
2.1.2 主要仪器 | 第21页 |
2.1.3 试验动物 | 第21页 |
2.2 试验方法 | 第21-25页 |
2.2.1 拟除虫菊酯类农药通用半抗原合成与鉴定 | 第21-23页 |
2.2.2 人工抗原的制备与鉴定 | 第23页 |
2.2.3 动物免疫 | 第23-24页 |
2.2.4 抗血清效价测定 | 第24-25页 |
2.3 结果与分析 | 第25-29页 |
2.3.1 半抗原的结构鉴定 | 第25页 |
2.3.2 人工抗原的鉴定及偶联比测定 | 第25-28页 |
2.3.3 抗血清效价的测定 | 第28-29页 |
2.4 小结与讨论 | 第29-31页 |
第三章 ScFv基因的构建 | 第31-38页 |
3.1 材料与试剂 | 第31页 |
3.1.1 主要试剂 | 第31页 |
3.1.2 主要仪器 | 第31页 |
3.2 研究方法 | 第31-34页 |
3.2.1 小鼠脾脏总RNA的提取 | 第31页 |
3.2.2 第一链的合成及VL、VH链的扩增 | 第31-33页 |
3.2.3 ScFv基因的构建 | 第33-34页 |
3.3 结果与分析 | 第34-36页 |
3.3.1 小鼠脾脏RNA的提取 | 第34页 |
3.3.2 VH、VL基因的PCR扩增 | 第34-35页 |
3.3.3 ScFv基因的拼接与扩增 | 第35-36页 |
3.4 小结与讨论 | 第36-38页 |
第四章 ScFv噬菌体抗体库构建与阳性克隆筛选 | 第38-49页 |
4.1 材料与试剂 | 第38页 |
4.1.1 主要试剂和材料 | 第38页 |
4.1.2 主要仪器 | 第38页 |
4.2 研究方法 | 第38-42页 |
4.2.1 重组噬菌体质粒的构建与鉴定 | 第38-39页 |
4.2.2 重组质粒的鉴定 | 第39-40页 |
4.2.3 噬菌体抗体库的构建与淘筛 | 第40-41页 |
4.2.4 阳性克隆的筛选与鉴定 | 第41-42页 |
4.3 结果与分析 | 第42-47页 |
4.3.1 重组噬菌体质粒鉴定 | 第42-43页 |
4.3.2 噬菌体抗体库的淘筛 | 第43页 |
4.3.3 阳性克隆的筛选与鉴定 | 第43-47页 |
4.4 小结与讨论 | 第47-49页 |
第五章 ScFv融合表达及其半抗原亲和性检测 | 第49-56页 |
5.1 材料与试剂 | 第49页 |
5.1.1 主要材料 | 第49页 |
5.1.2 主要仪器 | 第49页 |
5.2 研究方法 | 第49-50页 |
5.2.1 阳性ScFv抗体的融合表达 | 第49-50页 |
5.2.2 ScFv融合抗体与半抗原亲和性测定 | 第50页 |
5.3 结果与分析 | 第50-54页 |
5.3.1 ScFv融合抗体与半抗原亲和性测定 | 第50-54页 |
5.4 小结与讨论 | 第54-56页 |
第六章 结论 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-61页 |
附录 | 第61-64页 |
缩略词 | 第64-65页 |
致谢 | 第65-66页 |
作者简介 | 第66页 |