| 缩略词 | 第4-10页 |
| 摘要 | 第10-13页 |
| Abstract | 第13-15页 |
| 第一章 文献综述 | 第20-38页 |
| 1 牦牛概况 | 第20页 |
| 2 生殖系统(下丘脑-垂体-卵巢轴调节排卵) | 第20-21页 |
| 3 卵泡发育的调节 | 第21-22页 |
| 4 卵泡发育-优势卵泡与卵泡闭锁 | 第22-23页 |
| 5 FSH活化蛋白激酶A(PKA) | 第23页 |
| 6 附加的PKA监管图途径 | 第23-27页 |
| 6.1 p38 MAPK | 第23-24页 |
| 6.2 PI3K | 第24页 |
| 6.3 FOXO | 第24-27页 |
| 7 cAMP-特殊的磷酸二酯酶：一类不同的酶信号 | 第27页 |
| 8 cAMP-PDEs调控机制 | 第27-28页 |
| 9 在细胞适应和分化中调节cAMP-PDE表达 | 第28页 |
| 10 FOXO转录因子：在调节细胞增殖、生存和生物的衰老中PI3K-Akt通路的关键目标 | 第28-29页 |
| 11 FOXO亚科的转录因子的识别 | 第29页 |
| 12 FOXO-PI3K-Akt转录因子的调节通路通 | 第29-30页 |
| 13 FOXOs的其他磷酸化控制位点 | 第30-31页 |
| 14 将FOXOs从细胞核中排除的机制以应对生长因子刺激 | 第31页 |
| 15 FOXOs转录激活剂的性质 | 第31-32页 |
| 16 FOXOs对凋亡的调控机制 | 第32页 |
| 17 FOXO是细胞周期的几个阶段的主要监管机构 | 第32-34页 |
| 18 可变剪接在细胞周期和细胞程序性死亡中的重要作用 | 第34页 |
| 19 凋亡和剪切作用 | 第34-36页 |
| 20 细胞周期和拼接调节 | 第36-38页 |
| 第二章 FSH通过FSHR/cAMP/Foxo3a通路调节牦牛GCs凋亡及对细胞因子分泌和相关基因表达的作用研究 | 第38-93页 |
| 实验一 FSH对颗粒细胞FSHR和cAMP的调节 | 第38-60页 |
| 1 实验材料 | 第39-41页 |
| 2 实验方法 | 第41-49页 |
| 2.1 GCs培养与FSHR的鉴定 | 第41-42页 |
| 2.2 RT-qPCR法检测FSHR mRNA | 第42-43页 |
| 2.3 Western blotting法检测FSHR蛋白 | 第43-47页 |
| 2.4 ELISA法检测cAMP | 第47-49页 |
| 2.5 数据分析 | 第49页 |
| 3 结果 | 第49-54页 |
| 3.1 牦牛GCs细胞原代培养及鉴定的结果 | 第49-50页 |
| 3.2 不同浓度和不同作用时间FSH对FSHR mRNA表达的影响 | 第50-51页 |
| 3.3 不同浓度和不同作用时间FSH对FSHR蛋白表达的影响 | 第51-53页 |
| 3.4 FSH对cAMP表达的影响 | 第53-54页 |
| 4 讨论 | 第54-58页 |
| 5 小结 | 第58-60页 |
| 实验二 FSH对FOXO3a磷酸化前后核位移及蛋白表达影响 | 第60-76页 |
| 1 实验材料 | 第60-61页 |
| 2 实验方法 | 第61-66页 |
| 2.1 免疫荧光法定位FSH作用后的FOXO3a和FOXO3a(Ser253) 核位移 | 第61-62页 |
| 2.2 Western blotting法定量FSH作用后的Foxo3a和Foxo3a(Ser253)蛋白 | 第62-65页 |
| 2.3 免疫荧光定位FSH作用后的FOXO3a(+p/-p)磷酸化 | 第65-66页 |
| 2.4 数据分析 | 第66页 |
| 3 结果 | 第66-73页 |
| 3.1 FSH对Foxo3a核位移的影响 | 第66-68页 |
| 3.2 FSH对Foxo3a(Ser253)核位移的影响 | 第68-71页 |
| 3.3 Foxo3a和Foxo3a(Ser253)蛋白相对定量表达 | 第71-72页 |
| 3.4 FSH对FOXO3a(+p/-p)磷酸化的影响 | 第72-73页 |
| 4 讨论 | 第73-75页 |
| 5 小结 | 第75-76页 |
| 实验三 FSH联合血清通过FSHR/cAMP/FOXO3a通路对Foxo3a及凋亡相关基因表达的影响 | 第76-85页 |
| 1 实验材料 | 第76页 |
| 2 实验方法 | 第76-78页 |
| 2.1 牦牛GCs的准备 | 第76-77页 |
| 2.2 引物设计 | 第77页 |
| 2.3 RNA提取 | 第77-78页 |
| 2.4 反转录c DNA | 第78页 |
| 2.5 RT-PCR法检测Foxo3a、Fas L、Bim、Fas、Bax、Bcl-2、BCL-x L、Caspase-3 mRNA | 第78页 |
| 2.6 RT-qPCR法检测Foxo3a、Fas L、Bim、Fas、Bax、Bcl-2、BCL-x L、Caspase-3 mRNA | 第78页 |
| 2.7 数据分析 | 第78页 |
| 3 结果 | 第78-80页 |
| 3.1 FSH对Foxo3a及死亡受体通路相关基因Fas、Fas L和Caspase-3 表达的影响 | 第78-79页 |
| 3.3 FSH对线粒体通路关键基因Bim、Bax、Bcl-2 和BCL-x L mRNA表达的影响 | 第79-80页 |
| 4 讨论 | 第80-84页 |
| 5 小结 | 第84-85页 |
| 实验四 FSH对GCs生长因子分泌及c-fos、Akt、NF-k B、Oct-4 和Caspase-6 mRNA表达的影响 | 第85-93页 |
| 1 实验材料 | 第85页 |
| 2 实验方法 | 第85-87页 |
| 2.1 ELISA法检测LIF、b FGF、EGF、TNF-α 分泌 | 第85页 |
| 2.2 RT-qPCR法检测c-fos、Akt、NF-k B、Oct-4 和Caspase-6 mRNA | 第85-87页 |
| 2.3 数据分析 | 第87页 |
| 3 结果 | 第87-90页 |
| 3.1 FSH对LIF、b FGF、EGF和TNF-α 的分泌的影响 | 第87-89页 |
| 3.2 FSH对c-fos、Akt、NF-k B、Oct-4、Caspase-6 mRNA表达的影响 | 第89-90页 |
| 4 讨论 | 第90-92页 |
| 5 小结 | 第92-93页 |
| 结论 | 第93-95页 |
| 参考文献 | 第95-115页 |
| 致谢 | 第115-117页 |
| 个人简介 | 第117-118页 |
| 导师简介 | 第118-120页 |
