摘要 | 第7-10页 |
Abstract | 第10-13页 |
缩略语 | 第14-15页 |
第一章 文献综述 | 第15-43页 |
1.1 花粉的发育 | 第15-16页 |
1.2 花粉的体内萌发 | 第16-17页 |
1.3 花粉体外萌发 | 第17-29页 |
1.3.1 细胞壁与花粉管的生长 | 第19-23页 |
1.3.2 离子与花粉管的生长 | 第23-25页 |
1.3.3 小G蛋白与花粉管的生长 | 第25-27页 |
1.3.4 细胞骨架与花粉管的生长 | 第27-29页 |
1.4 囊泡运输与花粉管的生长 | 第29-35页 |
1.4.1 囊泡运输的基本过程 | 第29-30页 |
1.4.2 囊泡运输在花粉管生长中的作用 | 第30-35页 |
1.5 高尔基体与COG复合体 | 第35-41页 |
1.5.1 高尔基体 | 第35-36页 |
1.5.2 COG复合体的发现及结构 | 第36-38页 |
1.5.3 COG复合体的功能 | 第38-39页 |
1.5.4 COG复合体可能的作用方式 | 第39-41页 |
1.6 本论文的立题依据及研究目的 | 第41-43页 |
第二章 材料与方法 | 第43-63页 |
2.1 实验材料 | 第43-44页 |
2.1.1 植物材料 | 第43页 |
2.1.2 菌株及质粒载体 | 第43页 |
2.1.3 酶、试剂及各种化学药品 | 第43-44页 |
2.2 实验仪器 | 第44-45页 |
2.3 实验方法 | 第45-63页 |
2.3.1 拟南芥的栽培与管理 | 第45页 |
2.3.2 拟南芥总DNA的快速提取(Edwards法) | 第45-46页 |
2.3.3 拟南芥RNA的提取及第一链cDNA的合成 | 第46-47页 |
2.3.4 引物设计及PCR扩增 | 第47-48页 |
2.3.5 PCR扩增产物的回收 | 第48页 |
2.3.6 限制性内切酶反应 | 第48-49页 |
2.3.7 DNA片段的连接 | 第49页 |
2.3.8 大肠杆菌感受态的制备 | 第49-50页 |
2.3.9 大肠杆菌质粒提取 | 第50页 |
2.3.10 农杆菌感受态的制备 | 第50-51页 |
2.3.11 农杆菌的转化 | 第51页 |
2.3.12 农杆菌浸染拟南芥 | 第51-52页 |
2.3.13 本实验所需要的克隆载体的构建 | 第52-55页 |
2.3.14 拟南芥的人工杂交 | 第55页 |
2.3.15 GUS染色 | 第55页 |
2.3.16 DAPI染色 | 第55-56页 |
2.3.17 Alexander染色 | 第56页 |
2.3.18 拟南芥花粉体外萌发 | 第56-57页 |
2.3.19 拟南芥花粉体外液体萌发 | 第57页 |
2.3.20 拟南芥花粉体内萌发和苯胺蓝染色观察 | 第57-58页 |
2.3.21 拟南芥花粉体外萌发的苯胺蓝染色和钌红染色 | 第58页 |
2.3.22 拟南芥花粉体外萌发的Calcofluor染色 | 第58-59页 |
2.3.23 拟南芥花粉体外萌发的免疫荧光染色 | 第59页 |
2.3.24 扫描电子显微镜观察拟南芥花粉 | 第59-60页 |
2.3.25 拟南芥花粉的超薄切片 | 第60页 |
2.3.26 酵母双杂交 | 第60-63页 |
第三章 实验结果 | 第63-91页 |
3.1 COG3基因的突变影响雄配子体的传递 | 第63-64页 |
3.1.1 cog3突变体的鉴定 | 第63页 |
3.1.2 cog3突变体的遗传分析 | 第63-64页 |
3.2 COG3基因在拟南芥幼苗、雄配子体和胚胎中都有表达 | 第64-67页 |
3.3 COG3基因的突变影响花粉管的生长 | 第67-73页 |
3.3.1 将cog3/+引入到qrt1/qrt1的背景中 | 第67页 |
3.3.2 COG3基因的突变并未影响到花粉的发育 | 第67-68页 |
3.3.3 COG3基因的突变使得花粉管生长出现畸形、爆裂和生长受抑制 | 第68-71页 |
3.3.4 COG3基因的突变影响花粉管的体内生长 | 第71-73页 |
3.4 COG3能够回补突变体雄性不育的表型 | 第73-76页 |
3.4.1 cog3纯合突变体影响胚胎的发育 | 第73-74页 |
3.4.2 COG3蛋白定位在高尔基体 | 第74-76页 |
3.5 COG3基因的突变影响高尔基体的形态 | 第76-80页 |
3.6 COG3基因的缺失影响了高尔基体潴泡的逆向运输 | 第80-81页 |
3.7 COG3基因的缺失影响了部分花粉管细胞壁多糖的定位 | 第81-87页 |
3.8 植物细胞中的COG复合体的组织结构 | 第87-91页 |
讨论 | 第91-95页 |
1 COG3基因的缺失影响雄配子体的传递 | 第91页 |
2 COG3基因的缺失影响了花粉管细胞壁部分多糖组分的分布 | 第91-93页 |
3 COG复合体是高尔基体内的一种栓系因子 | 第93-95页 |
全文总结以及研究的创新之处 | 第95-97页 |
附录 | 第97-99页 |
参考文献 | 第99-109页 |
致谢 | 第109页 |