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COG复合体亚基COG3在花粉管生长中的功能研究

摘要第7-10页
Abstract第10-13页
缩略语第14-15页
第一章 文献综述第15-43页
    1.1 花粉的发育第15-16页
    1.2 花粉的体内萌发第16-17页
    1.3 花粉体外萌发第17-29页
        1.3.1 细胞壁与花粉管的生长第19-23页
        1.3.2 离子与花粉管的生长第23-25页
        1.3.3 小G蛋白与花粉管的生长第25-27页
        1.3.4 细胞骨架与花粉管的生长第27-29页
    1.4 囊泡运输与花粉管的生长第29-35页
        1.4.1 囊泡运输的基本过程第29-30页
        1.4.2 囊泡运输在花粉管生长中的作用第30-35页
    1.5 高尔基体与COG复合体第35-41页
        1.5.1 高尔基体第35-36页
        1.5.2 COG复合体的发现及结构第36-38页
        1.5.3 COG复合体的功能第38-39页
        1.5.4 COG复合体可能的作用方式第39-41页
    1.6 本论文的立题依据及研究目的第41-43页
第二章 材料与方法第43-63页
    2.1 实验材料第43-44页
        2.1.1 植物材料第43页
        2.1.2 菌株及质粒载体第43页
        2.1.3 酶、试剂及各种化学药品第43-44页
    2.2 实验仪器第44-45页
    2.3 实验方法第45-63页
        2.3.1 拟南芥的栽培与管理第45页
        2.3.2 拟南芥总DNA的快速提取(Edwards法)第45-46页
        2.3.3 拟南芥RNA的提取及第一链cDNA的合成第46-47页
        2.3.4 引物设计及PCR扩增第47-48页
        2.3.5 PCR扩增产物的回收第48页
        2.3.6 限制性内切酶反应第48-49页
        2.3.7 DNA片段的连接第49页
        2.3.8 大肠杆菌感受态的制备第49-50页
        2.3.9 大肠杆菌质粒提取第50页
        2.3.10 农杆菌感受态的制备第50-51页
        2.3.11 农杆菌的转化第51页
        2.3.12 农杆菌浸染拟南芥第51-52页
        2.3.13 本实验所需要的克隆载体的构建第52-55页
        2.3.14 拟南芥的人工杂交第55页
        2.3.15 GUS染色第55页
        2.3.16 DAPI染色第55-56页
        2.3.17 Alexander染色第56页
        2.3.18 拟南芥花粉体外萌发第56-57页
        2.3.19 拟南芥花粉体外液体萌发第57页
        2.3.20 拟南芥花粉体内萌发和苯胺蓝染色观察第57-58页
        2.3.21 拟南芥花粉体外萌发的苯胺蓝染色和钌红染色第58页
        2.3.22 拟南芥花粉体外萌发的Calcofluor染色第58-59页
        2.3.23 拟南芥花粉体外萌发的免疫荧光染色第59页
        2.3.24 扫描电子显微镜观察拟南芥花粉第59-60页
        2.3.25 拟南芥花粉的超薄切片第60页
        2.3.26 酵母双杂交第60-63页
第三章 实验结果第63-91页
    3.1 COG3基因的突变影响雄配子体的传递第63-64页
        3.1.1 cog3突变体的鉴定第63页
        3.1.2 cog3突变体的遗传分析第63-64页
    3.2 COG3基因在拟南芥幼苗、雄配子体和胚胎中都有表达第64-67页
    3.3 COG3基因的突变影响花粉管的生长第67-73页
        3.3.1 将cog3/+引入到qrt1/qrt1的背景中第67页
        3.3.2 COG3基因的突变并未影响到花粉的发育第67-68页
        3.3.3 COG3基因的突变使得花粉管生长出现畸形、爆裂和生长受抑制第68-71页
        3.3.4 COG3基因的突变影响花粉管的体内生长第71-73页
    3.4 COG3能够回补突变体雄性不育的表型第73-76页
        3.4.1 cog3纯合突变体影响胚胎的发育第73-74页
        3.4.2 COG3蛋白定位在高尔基体第74-76页
    3.5 COG3基因的突变影响高尔基体的形态第76-80页
    3.6 COG3基因的缺失影响了高尔基体潴泡的逆向运输第80-81页
    3.7 COG3基因的缺失影响了部分花粉管细胞壁多糖的定位第81-87页
    3.8 植物细胞中的COG复合体的组织结构第87-91页
讨论第91-95页
    1 COG3基因的缺失影响雄配子体的传递第91页
    2 COG3基因的缺失影响了花粉管细胞壁部分多糖组分的分布第91-93页
    3 COG复合体是高尔基体内的一种栓系因子第93-95页
全文总结以及研究的创新之处第95-97页
附录第97-99页
参考文献第99-109页
致谢第109页

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