| 摘要 | 第9-11页 |
| Abstract | 第11-12页 |
| 1 前言 | 第13-25页 |
| 1.1 植物抗旱分子机制 | 第13页 |
| 1.2 植物功能性蛋白基因 | 第13-16页 |
| 1.2.1 LEA蛋白基因 | 第13-14页 |
| 1.2.2 水通道蛋白基因 | 第14-15页 |
| 1.2.3 渗透物质合成关键酶基因 | 第15-16页 |
| 1.2.4 其他蛋白基因 | 第16页 |
| 1.3 植物调控性蛋白基因 | 第16-17页 |
| 1.3.1 蛋白激酶基因 | 第16-17页 |
| 1.3.2 转录因子 | 第17页 |
| 1.4 转录因子研究进展 | 第17-21页 |
| 1.4.1 转录因子的结构与功能 | 第17页 |
| 1.4.2 转录因子的表达与调控 | 第17-18页 |
| 1.4.3 转录因子的分类及研究进展 | 第18-21页 |
| 1.5 NFY家族转录因子研究进展 | 第21-23页 |
| 1.5.1 NFY转录因子结构特点及家族分类 | 第21页 |
| 1.5.2 NFY家族转录因子生物学功能 | 第21-23页 |
| 1.6 研究的目的意义 | 第23-25页 |
| 2 材料与方法 | 第25-42页 |
| 2.1 试验材料与仪器 | 第25-26页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第25页 |
| 2.1.2 菌株及载体 | 第25页 |
| 2.1.3 试剂 | 第25页 |
| 2.1.4 数据库及生物学分析软件 | 第25页 |
| 2.1.5 仪器及耗材 | 第25-26页 |
| 2.2 试验方法 | 第26-42页 |
| 2.2.1 大豆GmNFYB1序列获得及生物信息学分析 | 第26页 |
| 2.2.2 大豆GmNFYB1基因的获得 | 第26-29页 |
| 2.2.3 诱饵载体pGBKT7-GmNFYB1构建 | 第29-31页 |
| 2.2.4 大豆GmNFYA家族、GmNFYC家族基因克隆 | 第31-33页 |
| 2.2.5 表达载体pGADT7-GmNFYA/NFYC的构建 | 第33-34页 |
| 2.2.6 GmNFYB1自激活验证 | 第34-35页 |
| 2.2.7 GmNFYB1互作蛋白分析 | 第35页 |
| 2.2.8 PET-29b(+)-GmNFYB1表达载体构建及目的蛋白表达纯化 | 第35-37页 |
| 2.2.9 DNA探针的合成标记及检测 | 第37-39页 |
| 2.2.10 凝胶阻滞试验 | 第39-40页 |
| 2.2.11 转GmNFYB1拟南芥转录组测序分析及qRT-PCR分析 | 第40-42页 |
| 3 结果与分析 | 第42-69页 |
| 3.1 GmNFYB1及NFYA、NFYC家族基因分析 | 第42-54页 |
| 3.1.1 GmNFYB1基因的染色体分布及蛋白结构域分析 | 第42-43页 |
| 3.1.2 GmNFYB1基因启动子分析 | 第43-44页 |
| 3.1.3 GmNFYA和GmNFYC家族基因序列信息 | 第44-47页 |
| 3.1.4 GmNFYA和GmNFYC家族进化树分析 | 第47-49页 |
| 3.1.5 GmNFYA和GmNFYC家族拟南芥同源基因分析 | 第49-53页 |
| 3.1.6 GmNFYA和GmNFYC家族启动子分析 | 第53-54页 |
| 3.2 GmNFYB1与GmNFYA、NFYC的酵母双杂交载体构建 | 第54-59页 |
| 3.2.1 GmNFYB1基因目的片段的获得 | 第54-55页 |
| 3.2.2 pGBKT7-GmNFYB1诱饵载体的构建及验证 | 第55-57页 |
| 3.2.3 GmNFYA和GmNFYC家族基因克隆 | 第57页 |
| 3.2.4 pGADT7-GmNFYA/NFYC载体构建及验证 | 第57-59页 |
| 3.3 pGBKT7-GmNFYB1自激活验证 | 第59-60页 |
| 3.4 GmNFYB1互作蛋白的筛选及验证 | 第60-61页 |
| 3.5 转GmNFYB1拟南芥转录测序及定量PCR分析 | 第61-65页 |
| 3.5.1 测序质量检测 | 第61页 |
| 3.5.2 测序结果Mapping和基因组结构分析 | 第61-62页 |
| 3.5.3 定量PCR分析 | 第62-65页 |
| 3.6 GmNFYB1蛋白与下游基因探针结合的凝胶阻滞分析 | 第65-69页 |
| 3.6.1 GmNFYB1基因原核表达载体的构建 | 第65-66页 |
| 3.6.2 GmNFYB1蛋白的诱导表达及纯化 | 第66-67页 |
| 3.6.3 探针标记效率检测 | 第67页 |
| 3.6.4 GmNFYB1蛋白与探针结合的凝胶阻滞分析 | 第67-69页 |
| 4 讨论 | 第69-72页 |
| 4.1 大豆NFYA、NFYC基因家族的分析 | 第69页 |
| 4.2 大豆GmNFYB1与NFYA、NFYC家族成员蛋白互作分析 | 第69-71页 |
| 4.3 GmNFYB1蛋白与下游基因探针结合的凝胶阻滞分析 | 第71-72页 |
| 5 结论 | 第72-73页 |
| 致谢 | 第73-74页 |
| 参考文献 | 第74-83页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第83页 |
